Descrizione
2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (con colorante) è una soluzione premiscelata 2× pronta all'uso contenente Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase, dNTP e un sistema tampone ottimizzato, che contiene indicatori di elettroforesi pre-aggiunti. La premiscela contiene indicatori di elettroforesi pre-aggiunti, i prodotti PCR possono essere sottoposti direttamente a elettroforesi, i prodotti di amplificazione sono estremità piatte. 2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (con colorante) ha i vantaggi di essere rapido e facile, elevata sensibilità, elevata specificità, buona stabilità, ecc., il sistema di reazione può essere aggiunto solo con i primer e i template. Inoltre, il prodotto contiene anche uno specifico agente protettivo, in modo che il premix possa comunque mantenere un'attività stabile dopo ripetuti congelamenti e scongelamenti.
Fedeltà ultra elevata: Basso tasso di disadattamento nei soggetti a mutazione gene GC alto;
Velocità elevata: La velocità è veloce come 5 secondi/kb;
Ampia applicabilità: Può essere utilizzato per amplificare geni con un contenuto di GC pari al 20-80% e tollera lisati di sangue e di topo al 20%;
Buona stabilità: Conservato a 37°C per 7 giorni senza comprometterne le prestazioni;
Facile da usare: Basta aggiungere primer e template per l'amplificazione, con colorante di caricamento blu per l'elettroforesi diretta.
Specifiche
N. di cat. | 10164ES01 | 10164ES03 | 10164ES08 |
Misurare | 250 microlitri | 1 ml | 5×1 ml |
Cifre
Figura: Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase ha un'elevata fedeltà rispetto ai prodotti di altri marchi (A). Il test è stato eseguito esaminando la frequenza di mutazione dei prodotti PCR di 6 segmenti ricchi di GC (circa l'80%) amplificati dai genomi di specie diverse. I prodotti PCR amplificati da Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase sono stati clonati in vettori e 100 singoli cloni selezionati per ciascuna sequenza sono stati sottoposti a sequenziamento Sanger.
La DNA polimerasi ad alta fedeltà Hieff Canace™ AdvanceFast ha un'elevata velocità di amplificazione (B), un'elevata compatibilità con l'amplificazione GC (C) e una tolleranza al sangue (D). I risultati della PCR e del sequenziamento dei clienti dimostrano che la DNA polimerasi ad alta fedeltà Hieff Canace™ AdvanceFast offre buone prestazioni in termini di resa e specificità della PCR (EH).
Magazzinaggio
Questo prodotto deve essere conservato a una temperatura compresa tra -25 e -15 °C per 1 anno.
Istruzioni
- Sistemi di reazione PCR consigliati.
Componenti | Volume(μL) | Finale concentrazione |
2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (con colorante)* | 25 | 1× |
Modello** | X | - |
Inoltrare Primer (10 μmol/L)*** | 2 | 0,4 μmol/L |
Inversione Primer (10 μmol/L) | 2 | 0.4 μmol/L |
ddH2Lo | Fino a 50 | - |
Tabella 1 Sistema di reazione PCR
*In premiscele 1× contenenti 2 mM Mg2+ e 200 μM dNTP.
**Intervallo consigliato 10-200 ng, intervallo del volume di caricamento del campione di cDNA non superiore a 1/10 del sistema di reazione, consigliato 1-2,5 μL.
***La concentrazione finale del primer nel sistema di reazione PCR varia da 0,2 a 1 μM; si raccomanda 0,4 μM.
- Programma di reazione.
Ciclo fare un passo | Temperatura | Tempo | Cicli |
Denaturazione iniziale | 98℃ | 30 secondi | 1 |
Denaturazione | 98℃ | 10 secondi | 30-35 |
Ricottura* | 60℃ | 5 secondi | |
Estensione** | 72℃ | 5-10 secondi/kb | |
Finale estensione | 72℃ | 2 minuti | 1 |
Tabella 2 Programma di reazione PCR
*Temperatura consigliata: 60°C, è possibile impostare un gradiente di temperatura per trovare la temperatura ottimale per l'annealing del primer. Il tempo di annealing consigliato è impostato su 5 sec e può essere regolato da 5 a 30 sec. Un tempo di annealing troppo lungo può causare prodotti di amplificazione diffusi sul gel.
**Tempo di estensione: consigliato 5 sec/kb, estendibile anche a 10 sec/kb se necessario.
Appunti
- Questo prodotto è destinato esclusivamente alla ricerca.
- Per la vostra sicurezza, operate indossando camici da laboratorio e guanti monouso.
Documenti:
Citazioni e riferimenti:
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