Fosfatasi alcalina di gamberi (SAP) (1 U/μl) _ 10322ES

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La fosfatasi alcalina può rimuovere i gruppi fosfato 5' dal DNA e dall'RNA. È comunemente usata per prevenire l'auto-legatura dei vettori. Negli esperimenti di clonazione molecolare, la DNA ligasi richiede la presenza di gruppi fosfato per catalizzare la legatura del DNA. Dopo la digestione con enzimi di restrizione, i vettori mantengono un gruppo fosfato nel sito di scissione. Tuttavia, dopo la defosforilazione da parte della fosfatasi alcalina, l'estremità 5' del vettore è priva di un gruppo fosfato e quindi non può connettersi con la propria estremità 3'. Di conseguenza, l'auto-legatura del vettore, che altrimenti si verificherebbe preferibilmente nella reazione di legatura, viene impedita. Ciò aumenta la velocità di inserimento del frammento target. Inoltre, la fosfatasi alcalina può essere usata per preparare modelli di DNA per l'etichettatura dell'estremità 5'.

Questo prodotto è una fosfatasi alcalina derivata dai gamberetti che può degradare quasi tutti i monoesteri fosfatici. Tuttavia, non può idrolizzare i diesteri fosfatici o i triesteri. L'enzima agisce sulla defosforilazione terminale, indipendentemente dal fatto che i terminali siano appiccicosi o smussati. SAP può anche essere utilizzato per degradare i dNTP nelle reazioni PCR, il che è utile per il successivo sequenziamento e l'analisi SNP.

Caratteristiche

  • Rimozione dei gruppi fosfato dalle estremità del DNA e dell'RNA. Prevenire l'autolegatura dei vettori.
  • Preparazione di modelli di DNA per l'etichettatura dell'estremità 5'.
  • Degradazione dei dNTP nelle reazioni PCR.

Applicazioni

  • Molecolare Csolitario
  • Sequenziamento del DNA
  • Analisi SNP

Componenti

Componenti n.

Nome

10322È72

10322-UN

Fosfatasi alcalina dei gamberetti (SAP) (1 U/µL)

250 Io

10322-B

Tampone SAP 10×

1 ML

Specifiche

Fonte

Il gene della fosfatasi alcalina del gambero è stato clonato da Pichia pastoris, in Pandalus borealis.

Controllo di qualità

Privo di contaminazione da ribonucleasi e deossiribonucleasi.

Purezza

95%

Inattivazione termica

Incubazione a 65 per 5 minuti provoca la perdita completa e irreversibile dell'attività.

Definizione di unità

La quantità di enzima necessaria per defosforilare 1 μg di DNA pUC19 digerito con HindIII (che produce sporgenze 5') entro 30 minuti a 25 è definita come un'unità di attività.

Magazzinaggio

IL i prodotti devono essere conservati a -25~-15℃ per 3 anni.

Documenti:

Scheda di sicurezza

10322Scheda di sicurezza ES-HB.PDF

Manuali

10322_Manuale_Ver. EN20250219_IT.pdf

Pagamento e sicurezza

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