La ribonucleasi A (RNasi A) è un polipeptide a singolo filamento contenente 4 legami disolfuro con un peso molecolare di circa 13,7 kDa. La RNasi A è un'endoribonucleasi che degrada specificamente l'RNA a singolo filamento nei residui C e U. Nello specifico, la scissione riconosce il legame fosfodiesterico formato dal 5'-ribosio di un nucleotide e dal gruppo fosfato sul 3'-ribosio del nucleotide pirimidinico adiacente, in modo che i fosfati ciclici 2', 3' siano idrolizzati nei corrispondenti fosfati 3'-nucleosidici (ad esempio, pG-pG-pC-pA-pG viene scisso dalla RNasi A per generare pG-pG-pCp e A-PG). La RNasi A è la più attiva nella scissione dell'RNA a singolo filamento. La concentrazione di lavoro consigliata è 1-100 μ G/mL, compatibile con vari sistemi di reazione. Una bassa concentrazione di sale (0-100 mM NaCl) può essere utilizzata per tagliare l'RNA a singolo filamento, l'RNA a doppio filamento e le catene di RNA formate dall'ibridazione RNA-DNA. Tuttavia, ad alte concentrazioni di sale (≥ 0,3 M), la RNasi A scinde specificamente solo l'RNA a singolo filamento.

La RNasi A è più comunemente usata per rimuovere l'RNA durante la preparazione del DNA plasmidico o del DNA genomico. Che la DNasi sia attiva o meno durante il processo di preparazione può facilmente influenzare la reazione. Il metodo tradizionale di ebollizione in un bagno d'acqua può essere usato per inattivare l'attività della DNasi. Questo prodotto non contiene DNasi e proteasi e non richiede trattamento termico prima dell'uso. Inoltre, questo prodotto può anche essere usato in esperimenti di biologia molecolare come l'analisi della protezione della RNasi e l'analisi della sequenza dell'RNA.

Questo prodotto è fornito come soluzione a una concentrazione di 100 mg/mL. La concentrazione di lavoro consigliata è 1-100 μg/mL, a seconda del tipo di applicazione.

Caratteristiche

Ribonucleasi A (RNasi A), dal pancreas bovino

Attività ≥80 Kunitz U/mg

NO Residuo di DNasi

Applicazioni

RNasi

Analisi dell'epitrascrittoma

Estrazione e purificazione del DNA genomico

Specifiche

Spedizione e stoccaggio

Il prodotto deve essere conservato a una temperatura compresa tra -25°C e -15℃ per 2 anni.

Il tampone di conservazione era composto da 50 mM Tris-HCl (pH 7,4) e 50% (V/V) di glicerolo.

Cifre

Campione 1 non ha RNasi A,Campione 2-4 hanno aggiunto 1 μl di 100 mg/ml RNasi A. Quindi aggiungere 500 ng di RNA. Dopo l'incubazione a temperatura ambiente per 5 minuti, aggiungere 1 μl di tampone di caricamento RNA 10X. Quindi caricare tutti i campioni su un gel di agarosio a pori medi allo 0,8% per elettroforesi a 160 V per 10 minuti.

Documenti:

Scheda di sicurezza

10406ES-MSDS-HB240223.PDF

Manuali

10406_Manuale_Ver. HB240703_IT.pdf

Citazioni e riferimenti:

[1] Chen Q, Xin M, Wang L, et al. L'inibizione di LDHA per indurre il rilascio di eEF2 migliora la trombocitopoiesi. Sangue. 2022;139(19):2958-2971. doi:10.1182/blood.2022015620(IF:23.629)

[2] Chen K, Guo T, Li XM, et al. Regolazione traslazionale della risposta delle piante alle alte temperature mediante una tRNAHis Guanililtransferasi a doppia funzione nel riso. Mol Plant. 2019;12(8):1123-1142. doi:10.1016/j.molp.2019.04.012(IF:10.812)