Descrizione
La DNasi I è un'endonucleasi che può digerire DNA a singolo e doppio filamento per produrre singoli deossinucleotidi o oligodesossinucleotidi a singolo o doppio filamento. Può idrolizzare il legame fosfodiesterico per produrre monodesossinucleotidi e oligodesossinucleotidi contenenti gruppi 5'-fosfato e gruppi 3'-OH. Il prodotto medio della digestione è il più piccolo politetranucleotide. La DNasi I può catalizzare molte forme di DNA, come il DNA a singolo filamento, il DNA a doppio filamento e persino la cromatina (la sua velocità di taglio è influenzata dagli istoni). L'intervallo di pH ottimale è 7-8. L'attività della DNasi I dipende da Ca2+ e può essere attivato da ioni metallici bivalenti, come Co2+, Minnesota2+, Zinco2+, ecc. 5 mM Ca2+ può proteggere l'enzima dall'essere idrolizzato. In presenza di Mg2+, l'enzima può riconoscere e tagliare qualsiasi sito su qualsiasi filamento di DNA in modo casuale; e in presenza di Mn2+, può riconoscere due filamenti di DNA contemporaneamente e tagliarli quasi nello stesso punto per formare estremità smussate, oppure estremità appiccicose con 1-2 nucleotidi sporgenti. La DNasi I è ampiamente utilizzata nella preparazione di RNA privo di DNA; rimuove il DNA stampo dopo la trascrizione in vitro; prepara l'RNA privo di DNA prima delle reazioni RT-PCR e RT-qPCR; si combina con la DNA polimerasi I per eseguire l'etichettatura del DNA tramite traslocazione nick; costruzione di librerie di frammentazione del DNA.
Questo prodotto è realizzato in conformità ai requisiti di processo GMP ed è fornito in forma liquida.
Caratteristica
- Endonucleasi specifica del DNA
- Degrada il DNA a doppio e singolo filamento
- I prodotti sono oligo corti con 5'-fosfato e 3'-OH
Applicazione
- Rimozione del DNA genomico contaminante dai campioni di RNA
- Degradazione dei modelli di DNA nelle reazioni di trascrizione
Specificazione
| Fonte | Ricombinante Escherichia coli con gene DNasi I |
| Temperatura ottimale | 37℃ |
| Buffer di archiviazione | 10 mM Tris-HCl pH 7,6, 2 mM CaCl2, 50% (v/v) Glicerolo |
| Definizione di unità | La quantità di enzima necessaria per degradare completamente 1 μg di DNA plasmidico entro 10 min a 37°C. (Il tampone di reazione è: 10 mM Tris-HCl pH 7,6, 2,5 mM MgCl2, 0,5 mM CaCl2, 1 μg di DNA plasmidico) |
Componenti
| Componenti n. | Nome | 10611ES76 (500 unità) | 10611ES84 (2.000 unità) | 10611ES92 (10.000 unità) |
| 10611 | Desossiribonucleasi I (DNasi I) di grado GMP (2 U/μL) | 250 microlitri | 1 ml | 5 ml |
Spedizione e stoccaggio
I prodotti di grado GMP con desossiribonucleasi I (DNasi I) vengono spediti con ghiaccio secco e possono essere conservati a una temperatura compresa tra -15℃ e -25℃ per un anno.
Cifre
Figura 1. La DNasi I di YEASEN è in grado di rimuovere efficacemente il modello di DNA durante la trascrizione, rispetto ai marchi della concorrenza.
[1] Lu Z, Liu H, Song N, et al. METTL14 aggrava il danno dei podociti e la progressione della glomerulopatia attraverso la downregulation di Sirt1 dipendente da N<sup>6</sup>-metiladenosina. Cell Death Dis. 2021;12(10):881. Pubblicato il 27 settembre 2021. doi:10.1038/s41419-021-04156-y(IF:8.469)
[2] Yu Y, Wang Y, Zhang W, et al. Sostituto biomimetico periostio-osso composto da matrice derivata da preosteoblasti e idrogel per la riparazione di grandi difetti ossei segmentali. Acta Biomater. 2020;113:317-327. doi:10.1016/j.actbio.2020.06.030(IF:7.242)
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Indagine
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