Descrizione
L'mRNA degli eucarioti forma una struttura speciale all'estremità 5' dopo la trascrizione, che è la struttura cap. La struttura cap svolge un ruolo importante nella stabilità, nel trasporto e nella traduzione dell'mRNA. L'enzima capping del virus del vaccino è un enzima efficace che può catalizzare la formazione della struttura cap. È composto da due subunità D1 e D12. Ha anche attività RNA trifosfatasi, attività guanilato aciltransferasi e attività guanina metiltransferasi che potrebbero collegare la struttura cap 7-metilguanina (m7Gppp) all'estremità 5' dell'RNA (m7Gppp5'N). L'enzima capping del virus del vaccino può cappare l'RNA nella direzione corretta entro un'ora quando presente a una concentrazione adatta di tampone capping, guanosina trifosfato (GTP), S-adenosilmetionina (SAM), ecc.
Caratteristica
- Isolato da una fonte ricombinante
- Testato per l'assenza di endonucleasi, esonucleasi, RNasi
Applicazione
- Capping dell'mRNA prima dei test di traduzione/traduzione in vitro
- Etichettatura dell'estremità 5' dell'mRNA
Specificazione
| Fonte | Ricombinante Escherichia coli con gene dell'enzima di capping del virus del vaiolo |
| Temperatura ottimale | 37℃ |
| Buffer di archiviazione | 20 mM Tris-HCl pH 8,0, 100 mM NaCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 0,1% Triton X-100, 50% glicerina |
| Definizione di unità | 1 unità: la quantità di enzima necessaria per incorporare 10 pmol di GTP (α-32P) in un trascritto con 80 nucleotidi (80 nt) a 37℃ entro 1 ora. |
Componenti
| Componenti n. | Nome | 10615ES84 (2.000 unità) | 10615ES92 (10.000 unità) | 10615ES96 (100.000 unità) | 10615ES99 (5 unità) |
| 10615 | Enzima di capping del vaccino mRNA (10 U/μL) | 200 microlitri | 1 ml | 10 ml | 500 ml |
Spedizione e stoccaggio
I prodotti di grado GMP dell'enzima mRNA Vaccinia Capping vengono spediti con ghiaccio secco e possono essere conservati a una temperatura compresa tra -15℃ e -25℃ per un anno.
Cifre
Figura 1. L'efficienza di capping ha quasi raggiunto il 100% con il sistema di capping del vaccino vaccinico di YEASEN. La spettrometria di massa dell'acido nucleico prima della reazione di capping è stata mostrata nella Figura 1A. La spettrometria di massa dell'acido nucleico dopo la reazione di capping è stata mostrata nella Figura 1B.
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Indagine
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