Descrizione
LZCap GG (3'Acm) è un analogo del cap1. Il prodotto viene utilizzato per la trascrizione con la sequenza iniziale di 5'GG3' e la struttura naturale cap1 viene prodotta mediante il capping della trascrizione Cap1.
Brevetto statunitense approvato.
Componenti
| Numero di gatto. | Nome | Misurare |
| 10686 | Capsula LZG (3'Acm) (50 mM) | 100 microlitro |
| 1 ml |
Dettagli del prodotto
| Formula molecolare | C35H48N16Lo25P4 (Acido libero) |
| Peso molecolare | 1216.19 (Acido libero) |
| Concentrazione | 50±3 mM |
| Purezza | Analisi HPLC ≥95% |
LZCap Modello di DNA Designocco
LZCap GG(3'Acm) È adatto per Iniziato da GG sequenze. Come mostrato nel figura sotto, il SP6 promotore (sottolineato) seguito dalla sequenza GG può efefficacemente iniziato trascrizione.
Protocollo
1. Scongelare i componenti necessario per l'esperimentoente su ghiaccio.
2. Aggiungere Acqua priva di RNasi e NTP a tubo di reazione.
3． Calore LZCap Aliquota GG(3'Acm) per 15 minimo a 60°C. Raffreddare a temperatura ambiente per 5 minimo
4． Aggiungere immediatamente LZCap GG(3'Acm) al tubo e vortice a mescolare. girare brevemente a raccogliere liquido.
5. Aggiungere Trascrizione 10x Tampone e vortice.
6. Aggiungere Modello di DNA ae SP6 Enzima Mescolare.
7. Mescolare il preparato soluzione di reazione, spin brevemente, e incubare a 37°C per 2-3 ore. Se la trascrizione lunghezza È meno di 100nt, aumentare il tempo di reazione a 4-8 H.
| Componente | Volume (milioni di litro) | Concentrazione finale |
| RNasi Acqua gratuita | Fino a 20μL | / |
| ATP (100 mM) | 1 | 5 mm |
| Cavo UTP (100mM) | 1 | 5 mm |
| CTP (100 mM) | 1 | 5 mm |
| GTP (100 mM) | 0,2 | 1 millimetro |
| LZCap GG(3'Acm) (50 mm) | 1.6 | 4 millimetri |
| 10×Trascrizione Respingente | 2 | 1 × |
| Lineare Il DNA | 1 μg | 50 ng/μL |
| SP6 Enzima Mescolare | 2 | / |
| Volume finale | 20μL | |
Appunti:
1) IL SP6 enzima mescoliamo noi raccomandato A usato È MEGAscripunto® Kit（AM1330）.
2) LZCap GG(3'Acm) è adatto per il vettore di trascrizione del promotore SP6 con 5 sequenze iniziate da 'GG 3', Quale ha bisogno di da considerare quando si costruisce il vettore.
3) IL reagenti, materiali di consumo E contenitori usato In IL sperimentare Sono gratuito loF RNasi contaminazione.
4) Esso È consigliato a usare un linearizzato Temperatura del DNAin ritardo per la trascrizione.
5) Quando modificato i nucleotidi erano usato In posto di tipo selvatico nucleotidi, IL finale concentratozione Di IL la reazione è stata invariato.
6) Modificato N1-Me-pUTP Potere Essere usato In posto di tipo selvatico L'UTP. modelloificato N1-Me-pUTP riduce il immunogenicità Di RNA messaggero. Henovcom Potere Anche fornire modificato nucleotide N1-Me-pUTP (Gatto. NO.: (vedere anche HN1002).
7) Se il PCR professionistacondotto È usato COME la trascrizione iniziazione Il DNA modello, IL quantità Di Il DNA modello Potere Essere ridotto di metà.
Magazzinaggio
Questo prodotto può essere conservato a una temperatura compresa tra -25 e -15 ℃ per due anni.
Precauzioni
- Per la vostra sicurezza e salute, quando utilizzate questo prodotto indossate sempre dispositivi di protezione individuale (DPI), come camici da laboratorio e guanti monouso.
- Solo per uso di ricerca.
Domande e risposte
1. Come si progetta l'LZCap?
Gli enzimi hanno un riconoscimento relativamente "specifico" dei substrati. Pertanto, quando si progetta una nuova struttura di cap, da un lato, abbiamo bisogno di nuove modifiche strutturali per scopi di brevetto, ma dall'altro, ci sforziamo di mantenere la somiglianza con le strutture naturali/note il più possibile. La struttura naturale ha un ribosio 3' OH, che può essere modificato (ad esempio, metilazione). Sulla base di questa considerazione, abbiamo scelto di aggiungere un atomo di carbonio nella posizione 3' per la novità del brevetto, seguito da un NH per imitare il legame idrogeno di OH, e quindi un gruppo acetile per ridurre la basicità di NH e migliorare la sua capacità di legame idrogeno. L'attività di LzCap è meglio del metilatotappo naturale, probabilmente a causa dell'aumento del legame idrogeno. Rispetto ai gruppi metile e metossi, il gruppo acetilamino può anche aumentare le interazioni di van der Waals tra il substrato (cap) e il fattore di inizio (enzima).
2.Il gruppo acetilamino è stabile?
Il gruppo acetilamino è già sufficientemente stabile. È molto più stabile della posizione 7-metilata e del legame fosfodiesterico, che sono le parti meno stabili del cappuccio.
Per maggiori dettagli sulla licenza LZCap, contattateci.
Pagamento e sicurezza
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Indagine
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