Hieff Clone™ Universal II One Step Cloning Kit è un kit di clonazione di recente aggiornamento.

La seconda generazione 2× Hieff Clone™ accuratamente ottimizzata Universal II Enzyme Premix combina l'enzima ricombinante e il tampone necessari per la reazione ricombinante con l'aggiunta di un esclusivo potenziatore ricombinante per migliorare significativamente l'efficienza della clonazione ricombinante.

Il kit può essere indirizzato a clonare prodotti PCR in qualsiasi sito di qualsiasi vettore, compatibile con prodotti PCR non purificati, prodotti PCR recuperati direttamente, bassa concentrazione di prodotti recuperati in gomma, questo prodotto può riassemblare il contenuto GC del braccio omologo del 30%-70% del frammento congiunto. Il vettore è stato completamente linearizzato e sequenze omologhe dell'estremità del vettore linearizzato di 15-25 bp sono state introdotte nell'estremità 5' dei primer PCR positivi e inversi del frammento inserito, in modo che le estremità 5' e 3' dei prodotti PCR del frammento inserito avessero esattamente la stessa sequenza corrispondente alle due estremità del vettore linearizzato, rispettivamente. Sotto l'azione dell'enzima ricombinante, la reazione ricombinante del prodotto PCR e del vettore linearizzato può essere completata in appena 5 minuti a 50℃. Il tasso positivo di clonazione può raggiungere oltre il 95%.

Caratteristiche

Semplice: clonare fino a sei frammenti di DNA in un'unica reazione.

Flessibile: le linee guida di progettazione consentono l'assemblaggio in qualsiasi vettore di tua scelta.

Efficiente: Efficiente per la legatura di uno-sette frammenti.

Applicazioni

Rapid Clonazione: consente di collegare senza soluzione di continuità più frammenti di DNA sovrapposti in un'unica reazione isotermica della durata di 5-50 minuti.

Clonazione guidata; Mutagenesi sito-specifica.

Specifiche

Componenti

Magazzinaggio

Questo prodotto deve essere conservato a -25~-15℃ per 1 anni.

Cifre

Ffigura 1. Frammenti singoli a basso input da 10 ng sono stati collegati nello stato recettivo non rianimatorio del piccolo sistema da 6 μL. I risultati hanno mostrato che 10923ES aveva prestazioni migliori rispetto ai prodotti concorrenti, con elevata efficienza di connessione, più colonie e un tasso positivo del 100%. AB: Piastra clonica. Il rapporto molare tra carrier (10 kb) e frammento di inserimento (1 kb) era 1:2. C: Mappa elettroforetica identificata tramite PCR del frammento di inserimento, M: YEASEN Italiano:

Figura 2. Sei frammenti (una lunghezza totale di 7,6 kb) sono stati clonati in un plasmide di 11,6 kb. I risultati hanno mostrato che 10923ES aveva prestazioni migliori rispetto ai prodotti concorrenti, con più colonie e un tasso positivo del 100%. AB: Piastra per colonie. Il rapporto molare tra carrier (11,6 kb) e frammenti di inserimento era 1:2. C: Analisi elettroforetica del frammento di inserimento, M: YEASEN 10505ES. Input del plasmide：200 ng/20μL, 50°C, 50 minuti.

Citazioni e riferimenti correlati:

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