Descrizione
Alta qualità™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix per qPCR (gDNA Digester Plus) è un premix di riadattamento sviluppato sulla base di Hifair™ⅢReverse Transcriptase. Rispetto a Hifair™ ⅡReverse Transcriptase, Hifair™ Ⅲ Reverse Transcriptase ha una stabilità termica significativamente più elevata e può resistere a temperature di reazione fino a 60℃, ed è adatto per la trascrizione inversa di modelli di RNA con strutture secondarie complesse. Allo stesso tempo, l'enzima aumenta l'affinità con i modelli, il che è ideale per la trascrizione inversa di un piccolo numero di modelli e geni a bassa copia.
Il premiscelato contiene 5×gDNA Digester Mix e 4×Hifair™ Ⅲ SuperMix Plus. 5×gDNA Digester Mix può rimuovere la contaminazione residua del DNA genomico nei modelli di RNA per garantire risultati di follow-up più affidabili. 4×Hifair™ Ⅲ SuperMix Plus contiene tutti i componenti necessari per la trascrittasi inversa (tampone, dNTP, Hifair™ Ⅲ Trascrittasi inversa, inibitore della RNasi, primer casuali/miscela di primer Oligo (dT)18, stampo di RNA e H2O priva di RNasi vengono aggiunti alla trascrizione inversa e il digestore gDNA viene terminato simultaneamente per garantire l'integrità del cDNA.
Il prodotto è adatto per il rilevamento RT-QPCR in due fasi, appositamente ottimizzato per qPCR, mix di primer random/oligo (dT)18 ottimizzato proporzionalmente, che consente di avviare la sintesi di cDNA da tutte le regioni di trascrizione dell'RNA con la stessa efficienza di trascrizione inversa. L'autenticità e la ripetibilità dei risultati qPCR sono garantite nella massima misura. Il prodotto di trascrizione inversa è compatibile con il metodo SYBR Green e il metodo di sonda TaqMan qPCR, Hifair™ UNICON™ qPCR SYBR Green Master Mix, Hifair™ qPCR SYBR Green Master Mix o Hifair™ La miscela master della sonda qPCR TaqMan può essere selezionata in base agli scopi sperimentali e utilizzata in combinazione per eseguire analisi dell'espressione genica ad alte prestazioni.
Caratteristiche
- Trascrizione inversa ad alte prestazioni
- Aumentare la temperatura di reazione: il primo filamento di cDNA può essere sintetizzato nell'intervallo di temperatura da 55 a 60°C
- Rimozione efficiente dei residui genomici
- Ampio intervallo di rilevamento lineare
Applicazioni
- Costruzione della libreria cDNA
- Sintesi dell'RNA antisenso
Specifiche
Tipo di prodotto finale | cDNA (primo filamento) |
Metodo PCR | RT-PCR |
Tipo di reagente | Trascrizione inversa |
Tipo di campione | RNA |
Temperatura di reazione ottimale | 55℃-60℃ |
Trascrittasi inversa | M-MLV |
Componenti
Componenti n. | Nome | 11141ES10 (10T) | 11141ES60 (100 tonnellate) |
11141-A | H senza RNasi2Lo | 1 ml | 2×1 ml |
11141-B | Miscela digestiva 5×gDNA | 30 microlitri | 300 microlitri |
11141-C | 4×HifairTM Ⅲ SuperMix più | 50 microlitri | 500 microlitri |
Spedizione e stoccaggio
Il prodotto viene spedito con ghiaccio secco e può essere conservato a una temperatura compresa tra -15℃ e -25℃ per 18 mesi.
Cifre
Figura 1.Eccellente efficienza di trascrizione inversa, adatta a geni con diverse abbondanze di espressione con diversi contenuti di GC
Figura 2. Intervallo di analisi lineare RNA totale 5 pg~5 μg
Figura 3. Rimozione efficiente dei residui genomici
Citato da "Un enzima dell'acido nucleico treoso che scinde l'RNA in grado di discriminare le mutazioni a punto singolo. Nat Chem . 2022 Mar;14(3):350-359. doi: 10.1038/s41557-021-00847-3."
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