Hifair^™ Advanced One Step RT-qPCR Kit è un kit per la quantificazione della fluorescenza basato sul colorante SYBR Green I. Utilizzando primer specifici per gene, la trascrizione inversa e le reazioni qPCR vengono completate in una provetta, eliminando la necessità di ripetute operazioni di apertura del tappo e pipettaggio, migliorando notevolmente l'efficienza del test e riducendo il rischio di contaminazione. Per i campioni di RNA, il kit impiega Hifair resistente al calore^™ V Trascrittasi inversa per una sintesi efficiente del cDNA e UNICON^™ HotStart Taq DNA Polymerase per amplificazione quantitativa. Con il sistema di buffer ottimizzato, la sensibilità del kit può essere pari a 0,1 pg per target altamente espressi e pari a 1 pg per target moderatamente espressi, e il kit è adatto anche per l'amplificazione e la quantificazione di campioni di DNA. Il kit è adatto per l'amplificazione e la quantificazione di campioni di DNA. Consente il rilevamento e la quantificazione sensibili di acidi nucleici da diversi campioni vegetali e animali, cellule e microrganismi.

Specifiche

Componenti

Magazzinaggio

Questo prodotto deve essere conservato a -25~-15℃ lontano da leggero per 1 anno.

Istruzioni

1. Reazione sistema configurazione*****

* I modelli Low Rox e i modelli senza correzione Rox vengono preparati direttamente secondo il sistema di reazione di cui sopra. Quando si utilizza il modello High Rox, aggiungere Hieff™ SP High Rox a 2 x Hifair™ Advanced SG Buffer a 1:250 v/v, mescolare bene e centrifugare. Il modello 2× Hifair^™ Advanced SG Buffer con Hieff™ SP High Rox non influisce sull'utilizzo dei modelli di correzione Low Rox e No Rox.

** La concentrazione finale del primer era pari a 0,2 μmol/L, ma poteva essere regolata tra 0,1 e 1 μmol/L, a seconda dei casi.

*** Il reagente è estremamente sensibile, con RNA totale nell'intervallo 1 pg-1 μg, e i test sui campioni umani hanno mostrato un apporto ottimale di 1 pg-100 ng, controllando un valore Ct complessivo nell'intervallo 15-30, come appropriato.

**** Si consiglia di utilizzare 20 μL o 50 μL per garantire la validità e la riproducibilità dell'amplificazione del gene target.

***** Si prega di preparare nel banco ultra-pulito e di utilizzare punte e provette di reazione prive di residui di nucleasi; si raccomandano punte con cartucce filtranti. Evitare la contaminazione incrociata e la contaminazione da aerosol.

2) Programma di reazione

*La temperatura di trascrizione inversa può essere selezionata tra 50-55°C in base alle esigenze sperimentali. Per i campioni di DNA, il processo di trascrizione inversa può essere omesso.

** In casi particolari la temperatura di ricottura/estensione può essere regolata in base al valore Tm del primer; si consiglia 60°C.

3）Modello applicabile

Modelli di strumenti che non richiedono la calibrazione Rox:

Prodotti: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;

Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;

Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;

Scienza applicata di Roche: LightCycler 480, LightCycler2.0, Ciclista di Luce 96;

Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR;

Modelli applicabili a Low Rox:

ABI 7500, 7500 Veloce, ViiA7, QuantStudio 3 e 5, QuantStudio 6, 7, 12k Flex;

Modelli Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000P;

Modelli applicabili High Rox*:

ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Veloce, StepOne, StepOne Plus.

* Per i modelli High Rox, notare che Hieff™ SP High Rox deve essere aggiunto proporzionalmente a 2 x Hifair^™ Tampone SG avanzato prima dell'uso.

Appunti

1. Questo prodotto è destinato esclusivamente alla ricerca.
2. Per la vostra sicurezza, operate indossando camici da laboratorio e guanti monouso.

Documenti:

Scheda di sicurezza

11175ES-A-Scheda di sicurezza-HB230927.PDF

11175ES-B-Scheda di sicurezza-HB230927.PDF

11175ES-C-Scheda di sicurezza-HB230927.PDF

Manuali