La luciferasi di lucciola è una proteina con un peso molecolare di circa 61 kDa, che può catalizzare l'ossidazione della luciferina in ossiluciferina in presenza di ATP, ioni magnesio e ossigeno. Emette bioluminescenza con una lunghezza d'onda di circa 560 nm. La luciferasi di renilla è una proteina con un peso molecolare di circa 36 kDa, che può catalizzare l'ossidazione della celenterazina in celenteramide in presenza di ossigeno, ed emette una lunghezza d'onda di 480 nm durante il processo di ossidazione. sulla bioluminescenza. Entrambe le bioluminescenza possono essere misurate tramite chemiluminescenza. Il principio di rilevamento è mostrato nella figura 1:

Figura 1: Schema del test della luciferasi Firefly e Renilla

Di solito, il 5´UTR o promotore del gene bersaglio viene clonato a monte della luciferasi di lucciola, oppure il 3´UTR viene clonato a valle della luciferasi di lucciola, e l'effetto di regolazione trascrizionale del promotore o dell'elemento regolatore viene rilevato rilevando la quantità di luciferasi di lucciola. La luciferasi di renilla è stata utilizzata come controllo interno per eliminare le differenze nel numero di cellule, nell'efficienza di trasfezione, ecc. Il kit di analisi del gene reporter della luciferasi duale utilizza la luciferina come substrato per rilevare l'attività del gene reporter della luciferasi di lucciola, quindi utilizza la celenterazina come substrato per rilevare la luciferina di renilla mentre spegne la reazione di fluorescenza. Attività del gene reporter enzimatico. Il kit ha le caratteristiche di elevata sensibilità.

Caratteristiche

Capacità di lisi migliorata: in grado di lisare completamente la stragrande maggioranza dei tipi di cellule.

Segnale più forte: rilevamento preciso dell'espressione debole del promotore.

Maggiore sensibilità: rilevabile fino a 10-20 picomoli di molecole di luciferasi.

Intervallo lineare più ampio: l'intervallo di rilevamento lineare supera 8 ordini di grandezza della concentrazione enzimatica.

Applicazioni

Verifica delle interazioni dei miRNA con i 3'UTR del gene bersaglio

Verifica delle interazioni lncRNA-miRNA

Verifica della regolazione del fattore di trascrizione nella regione del promotore

Analisi del percorso di segnalazione

Analisi dell'attività SNP

Specifiche

Componenti

Spedizione e stoccaggio

I prodotti del kit Dual Luciferase Reporter Gene Assay devono essere conservati a -15℃ ~ -25℃ per 1 anno.

Cifre

Figura 1. SÌ ... (Gatto#: 11402) ha un'intensità di fluorescenza paragonabile a quella del Brand P.

Figura2. EFACILITARE (Gatto#: 11402) I reagenti di rilevamento interagiscono con la luciferasi per ottenere un'intensità di luminescenza ottimale. Dopo l'aggiunta del substrato di luciferasi Renilla, la bioluminescenza della luciferasi di lucciola viene spenta: può essere essenzialmente spenta completamente.

Documenti:

Scheda di sicurezza

11402 MSDS HB220209 IT.PDF

Manuali

11402 Manuale HB241230 IT.pdf

Citazioni e riferimenti:

[1] Wang H, Yang J, Cai Y, Zhao Y. I macrofagi sopprimono la riprogrammazione cardiaca dei fibroblasti in vivo tramite il circuito autostimolante intercellulare mediato dall'IFN [la correzione pubblicata appare in Protein Cell. 2024 Dec 2;15(12):938. doi: 10.1093/procel/pwae038]. (SE=21,1)

[2] Zhao L, Zhu Y, Tao H, et al. L'ailanthone migliora la fibrosi polmonare sopprimendo l'attivazione di MEOX1 dipendente da JUN. Acta Pharm Sin B. 2024;14(8):3543-3560. doi:10.1016/j.apsb.2024.04.013(SE=14,5)

[3] Wu X, Chen S, Zhang Z, et al. Un percorso virale di mRNA di interferenza di piccole dimensioni-pianta ospite modula la tolleranza alla siccità indotta dal virus migliorando l'autofagia. Plant Cell. 2024;36(9):3219-3236. doi:10.1093/plcell/koae158(SE=12,6)

[4] Xuan H, Li Y, Liu Y, et al. Il dominio H1/H5 contribuisce alla separazione di fase OsTRBF2 e alla repressione genica durante lo sviluppo del riso. Plant Cell. 2024;36(9):3787-3808. doi:10.1093/plcell/koae199(SE=12)

[5] Han Y, Hu Q, Gong N, et al. La variazione naturale in MORE GRAINS 1 regola il numero e il peso dei grani nel riso. J Integr Plant Biol. 2024;66(7):1440-1458. doi:10.1111/jipb.13674(SE=11,4)

[6] Pan M, Luo M, Liu L, et al. EGR1 sopprime la crescita dell'HCC e la glicolisi aerobica regolando negativamente la trascrizione del PFKL. J Exp Clin Cancer Res. 2024;43(1):35. Pubblicato il 29 gennaio 2024. doi:10.1186/s13046-024-02957-5(SE=11,3)

[7] Hao X, Wang S, Fu Y, et al. Il modulo WRKY46-MYC2 svolge un ruolo critico nelle risposte anti-erbivore indotte da E-2-esenale promuovendo l'accumulo di flavonoidi. Plant Commun. 2024;5(2):100734. doi:10.1016/j.xplc.2023.100734(SE=10,5)

[8] Wu J, Li P, Li M, et al. Lo stress termico compromette la terminazione del meristema fiorale e lo sviluppo del frutto influenzando la cascata BR-SlCRCa nel pomodoro. Plant Commun. 2024;5(4):100790. doi:10.1016/j.xplc.2023.100790(SE=10,5)

[9] Chen L, Xia S, Wang F, et al. L'ablazione NR1D1 indotta dalla metilazione m6A interrompe l'orologio circadiano delle HSC e promuove la fibrosi epatica. Pharmacol Res. 2023;189:106704. doi:10.1016/j.phrs.2023.106704(SE=10,33)

[10] Niu MX, Feng CH, He F, et al. Il modulo miR6445-NAC029 regola la tolleranza alla siccità regolando l'espressione della glutatione S-transferasi U23 e lo scavenging delle specie reattive dell'ossigeno in Populus. New Phytol. 2024;242(5):2043-2058. doi:10.1111/nph.19703(SE=9,4)

[11]Huang T, You Q, Huang D, et al.Un feedback positivo tra PDIA3P1 e OCT4 promuove le proprietà delle cellule staminali cancerose del carcinoma squamocellulare esofageo. Cell Commun Signal. 2024;22(1):60. Pubblicato il 22 gennaio 2024. doi:10.1186/s12964-024-01475-3(SE=8,4)

[12]Wang S, Liu Y, Hao X, Chen Y, Wang Z, Shen Y. Miglioramento delle defensine vegetali in un arbusto del deserto: esplorazione di un percorso regolatorio di AnWRKY29. Int J Biol Macromol. 2024;270(Pt 1):132259. doi:10.1016/j.ijbiomac.2024.132259(SE=8,2)