Descrizione
HifairTM Kit Lyo Multiplex RT-qPCR in un unico passaggio è un kit di PCR quantitativa multiplex basato su RNA come stampo. Nel corso dell'esperimento, la trascrizione inversa e la PCR quantitativa sono state eseguite nella stessa provetta, il che ha semplificato l'operazione sperimentale e ridotto il rischio di contaminazione. Il design esclusivo del tampone e dell'enzima garantisce che possa essere utilizzato nella preparazione e nella progettazione del prodotto di sistemi di reazione liofilizzata RT-qPCR in un unico passaggio.
In questo kit, il primo filamento di cDNA è stato sintetizzato in modo efficiente da Hifair resistente al caloreTM V Trascrittasi inversa e amplificata quantitativamente da UniconTM HotStart Taq DNA Polimerasi. Il kit contiene principalmente ottimizzato liofilizzato tampone, miscela di enzimi, ecc. Inoltre, vengono aggiunti i fattori che possono inibire efficacemente l'amplificazione PCR non specifica e migliorare l'efficienza di amplificazione di più reazioni qPCR, il che può garantire l'efficienza di amplificazione e portare a termine fino a più reazioni di amplificazione.
Questo kit è dotato di lioprotettore che può essere utilizzato per la liofilizzazione.
Specifiche
| Avvio a caldo | Avvio a caldo integrato |
| Metodo di rilevamento | Rilevamento primer-sonda |
| Metodo PCR | RT-qPCR in un unico passaggio |
| Tipo di campione | RNA |
| Attrezzatura per l'applicazione | Attrezzatura con Rox：ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Veloce, StepOne™, StepOne Plus™ Attrezzatura con Low Rox：ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 e 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex Stratagemmi Modelli MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™ Attrezzatura senza Rox: Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Otticone® 2, Cromo4™ Eppendorf Maestro del ciclo® ep realplex, realplex 2 s; Qiagen Rotore Corbett-Gene® Q, Rotore Gene® 3000, Rotore Gene® 6000 Scienza applicata Roche Ciclista di luce® 480, Ciclista leggero® 2.0, Ciclista di luce® 96 Termo Scientifico Ciclista PikoReal; Cefeide Ciclista intelligente®; Illumina Eco qPCR |
Componenti
| Componenti n. | Nome | 11831ES60 (100 tonnellate) | 11831ES80 (1.000 tonnellate) | 11831ES92 (10.000 tonnellate) |
| 11831-A | 4×Alta qualitàTM V Lyo-Buffer | 600 microlitri | 6 ml. | 60 ml. |
| 11831-B | HifairTM Miscela di liofilizzatori | 100 microlitri | 1 ml. | 10 ml |
| 11831-C | Lioprotettore | 800 microlitri | 8 ml. | 80 ml |
Magazzinaggio
Parte 1: 11831-A【4×Hifair V Lyo-Buffer】deve essere conservato a -25℃ ~ -15℃ per 1 anno.
Parte 2: 11831-B【HifairTM Miscela di liofilizzatori dovrebbe essere conservato a 2℃ ~ 8℃ per 6 mesi.
11831-C【Lioprotettore】deve essere conservato a -25℃ ~ -15℃ per 1 anno.
Figura
Prestazioni delle perle
PCR multiplex
Richiesta di informazioni sul prodotto Perline
Istruzioni
- Reazione Composizione
| Componenti | Volume (milioni di litro) | Concentrazione finale |
| 4×Alta qualitàTM V Lyo-Buffer | 6 | 1× |
| HifairTM Miscela di liofilizzatori | 1 | - |
| Lioprotettore | 8 | - |
| Miscela di primer (10 μM) | 1 | 0,1-1 μM |
| Miscela di sonda (10 μM) | 0,5 | 0,05-0,5 μM |
| Modello RNA | 5 | - |
| DEPC H2Lo | a 25 | - |
Nota: assicurarsi di mescolare bene prima dell'uso, evitare la formazione di bolle eccessive causate da vibrazioni violente.
- Protocollo di ciclismo ottimizzato
|
| Fase di reazione | Temperatura | Tempo | Ciclo |
| 1 | Trascrizione inversa | 50°CUN | 10 minuti | 1 |
| 2 | Denaturazione iniziale | 95°C | 2 secondo | 1 |
| 3 | Reazione di amplificazione | 95°C |
| 45 cicli |
| 60°CB | 13 secondoC |
Appunti
a) Trascrizione inversa: La temperatura può essere selezionata a 42°C o 50°C per 10-15 minuti.
b) Reazione di amplificazione: la temperatura viene regolata in base al valore Tm dei primer progettati.
C) Acquisizione del segnale di fluorescenza: impostare la procedura sperimentale in base ai requisiti del manuale dello strumento.
Pagamento e sicurezza
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Indagine
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