1) La concentrazione di PE Adapter in questo kit è di 15 μM e la quantità di adattatori utilizzati per la costruzione di librerie individuali viene regolata in base alla quantità consigliata del kit di costruzione di librerie. Index Primer ha una concentrazione di 10 μM.

2) L'adattatore PE fornito con questo kit è un adattatore corto multiuso che richiede l'amplificazione PCR per ottenere una libreria completa. Index Primer fornisce tag di sequenza Barcode per distinguere i campioni durante il sequenziamento ad alto rendimento.

3) Ogni set di questo kit contiene 8 i5 Index Primers (RP 5xx) e 12 i7 Index Primers (RP 7xx), che possono essere combinati tra loro per costruire 96 diverse combinazioni di librerie con etichetta Index a doppia estremità. 2 set offrono un totale di 16 di i5 Index Primer e 24 di i7 Index Primer. Puoi usare i5 Index Primer (o i7 Index Primer) da Cat#12414 e i7 Index Primer (o i5 Index Primer) in Cat#12415 per creare fino a 384 diverse combinazioni di librerie con etichetta Index a doppia estremità.

4) Non riscaldare l'adattatore, lasciarlo sciogliere lentamente a temperatura ambiente e la temperatura del laboratorio è impostata al meglio su 20-25 °C. sono necessari adattatori per evitare ripetuti cicli di congelamento e scongelamento; si consiglia di conservarlo in aliquote e di conservarlo a 4°C per un breve periodo.

5) La struttura della libreria di sequenziamento costruita utilizzando il kit Hieff NGS® RNA 384 CDI Primer per Illumina® è la seguente:



6) Per la vostra sicurezza e salute, indossate un camice da laboratorio e guanti monouso.
7) Questo prodotto è destinato esclusivamente alla ricerca scientifica!

Istruzioni
1. Utilizzo degli adattatori: diluire fino a raggiungere la concentrazione appropriata, in base al dosaggio consigliato per le diverse quantità di input nel manuale di costruzione della libreria utilizzato.
2. Utilizzo dell'indice Primer: preparare il sistema di reazione secondo il manuale di costruzione della libreria cinese, il sistema di amplificazione della libreria (come mostrato nella tabella seguente) e la procedura di reazione è impostata secondo la procedura nel manuale di costruzione della libreria.

Informazioni sulla sequenza

Adattatore PE per Illumina:

5´-/5Phos/GATCGGAAGAGCACAGGTCTGAACTCCAGT*C -3´

5´-ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T-3´

Primer indice i5 per Illumina:

5´-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACAC[Indice i5]ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT -3´

Primer indice i7 per Illumina:

5'-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGAT[Indice i7]GTGACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-3´

[Indice i5]8 punti base di io5 Sequenza di indici,[Indice i7]8 punti base di Sequenza indice i7.

Nella tabella seguente sono riportati il ​​nome dell'indice corrispondente a ciascun primer, la sequenza dell'indice contenuta nel primer e le informazioni sulla sequenza dell'indice corrispondente durante il sequenziamento: