Descrizione
L'endonucleasi VIII è un enzima di riparazione del DNA che possiede sia attività N-glicosilasi che attività AP-liasi. L'attività N-glicosilasi può rilasciare basi pirimidiniche danneggiate dal DNA a doppio filamento, creando un sito abasico (AP). L'attività AP-liasi scinde quindi il legame fosfodiesterico nel sito AP, creando un gap con un fosfato 5' e un fosfato 3'. Le basi danneggiate che l'endonucleasi VIII riconosce ed escinde includono: urea, 5,6-diidrossitimina, glicole timina, 5-idrossi-5-metossiidantoina, glicole uracile, 6-idrossi-5,6-diidrotimidina e metilidrossipropanone.
Caratteristiche
Nessun residuo di esonucleasi, endonucleasi o RNasi
Rimozione ad alta efficienza delle basi danneggiate
Applicazioni
Elettroforesi su gel a singola cellula (test della cometa)
Eluizione alcalina
Svolgimento alcalino
Specifiche
| Sfonte | Escherichia coli |
| Molecolare L'otto | 29 morteUN |
| Concentrazione | 10 unità/microlitro |
| Unità DDefinizione | Un'unità è definita come la quantità di enzima necessaria per scindere 1 pmol di un duplex di oligonucleotidi da 34 bp contenente un sito AP* in 10 µL sistema di reazione totale con 10 pmol di duplex di oligonucleotidi marcati con fluorescenza in 1X Endonucleasi VIII Rtampone di reazione a 37°C entro 1 ora |
| IOnattivazione Ccondizioni | IOincubare a 75°C per 10 minuti |
Componenti
| Componenti NO. | Nome | 14536ES80 | 14536ES90 |
| 14536-A | Endonucleasi VIII (10 U/μL) | 500 microlitro | |
| 14536-B | 10 × Tampone di reazione dell'endonucleasi VIII | 1.5 ml. | 1.5 ml. |
Spedizione e stoccaggio
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Cifre
Figura 1. Confronto degli effetti della riparazione dell'escissione di base
Nota: 20 pmol di oligonucleotidi sono stati catalizzati dall'endonucleasi VIII di Yeasen e SupplierA, rispettivamente, in un sistema di reazione da 20 µL con l'aggiunta di 5~40 U di endonucleasi VIII e attività enzimatica equivalente di UDG (Cat#10303ES) e incubati a 37℃ per 1 ora. I risultati dell'elettroforesi su gel di agarosio hanno mostrato che gli effetti di escissione delle basi dell'endonucleasi VIII di Yeasen e del Fornitore A erano coerenti.
Documenti:
Scheda di sicurezza
14536_Scheda di sicurezza_Versione EN20241210.pdf
Manuali
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