Descrizione
L'endonucleasi IV può agire su una varietà di danni ossidativi nel DNA. L'enzima è un'endonucleasi apurinica/apirimidinica (AP) che idrolizzerà i siti AP intatti nel DNA. I siti AP vengono scissi al primo legame fosfodiesterico che è 5' alla lesione lasciando un gruppo idrossilico al termine 3' e un desossiribosio 5'-fosfato al termine 5'. L'enzima ha anche un'attività 3' -diesterasi e può rilasciare fosfoglicolaldeide, desossiribosio 5'-fosfato intatto e fosfato dall'estremità 3' del DNA.
Applicazioni
Elettroforesi su gel a singola cellula (test Comet)
Eluizione alcalina
Svolgimento alcalino
Specifiche
Fonte | Escherichia coli |
Peso molecolare | 32.5 morte |
Concentrazione | 10 Unità/μL |
Definizione di unità | Un'unità è definita come la quantità di enzima richiesta per scindere 1 pmol di un duplex di oligonucleotidi 34-mer contenente un singolo sito AP in un volume di reazione totale di 10 µl in 1 ora a 37°C. Un sito AP viene creato trattando 10 pmol di un duplex di oligonucleotidi 34-mer contenente un singolo residuo di uracile con 1 unità di Uracil-DNA Glicosilasi (UDG) per 2 minuti a 37°C. |
Componenti
Componenti n. | Nome | 14543ES80 | 14543ES90 |
14543-UN | Endonucleasi IV (10 U/μL) | 100 μL | 500 μL |
14543-B | 10 x Tampone endonucleasi IV | 0,8 ml. | 1,25 ml. |
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