Descrizione
La T4 RNA Ligase 2, nota anche come T4 RNA Ligase 2, è una RNA ligase a doppio filamento ATP-dipendente che esibisce attività di legatura sia inter- che intra-molecolare sui filamenti di RNA. Rispetto alla T4 RNA Ligase 1, questo enzima mostra un'attività significativamente più elevata nella legatura di nick nell'RNA a doppio filamento rispetto alla legatura di estremità di RNA a singolo filamento. La vicinanza di un gruppo 5'-fosfato e di un gruppo 3'-idrossile è richiesta per la legatura. Inoltre, ha la capacità unica di legare tra i 3´-gruppo idrossilico dell'RNA e il 5´-gruppo fosfato del DNA all'interno di una struttura a doppio filamento.
Caratteristiche
Forte attività di legatura: in grado di legare efficacemente i substrati dsRNA.
Nessuna nucleasi residua, enzima di nicking o RNasi.
Applicazioni
Collegamento del sito di scissione del dsRNA.
Collegamento dei 3´ gruppo idrossilico dell'RNA al 5´ gruppo fosfato di struttura del DNA a doppio filamento.
Preparazione dell'RNA circolare.
Specifiche
| Definizione di unità | Un'unità è definita come la quantità di enzima necessaria per legare 0,4 µg di una miscela equimolare di RNA 23-mer e 17-mer in un volume di reazione totale di 20 µl in 30 minuti a 37loC |
| Fonte | Proteina ricombinante espressa da E. coli è derivato dal Y10A gene del batteriofago T4 |
| Purezza | ≥95% |
| Condizioni di reazione | Reagire a 25loC per 1 ora |
| Condizioni di inattivazione | Reagire a 80loC per 5 minuti |
Componenti
| Componenti n. | Nome | 14652ES80 | 14652ES90 |
| 14652-Un | Ligasi dell'RNA T4 2 (10 unità/μl) | 100 microlitro | 500 microlitro |
| 14652-B | 10×T4 RL2 Tampone di reazione | 500 microlitri | 1.5 ML |
Spedizione e stoccaggio
Questo prodotto deve essere conservato a -25 ~ -15loC per 1 anni.
Cifre
Figura 1. Verifica dell'efficienza della legatura della T4 RNA ligasi 2.
Nota: il sistema di reazione da 20 μL contiene substrati di legatura dsRNA a una concentrazione finale di 20 μM.
Documenti:
Scheda di sicurezza
14652_Scheda di sicurezza_Versione EN20250121.pdf
Manuali
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Indagine
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