Descrizione
Escherichia coli La DNA ligasi può catalizzare la formazione di legami fosfodiesterici tra le estremità 5'-PO4 e 3'-OH dei filamenti di DNA adiacenti. Non mostra quasi nessuna attività rilevabile per il substrato DNA a estremità smussata. Il pH ottimale per questa reazione è 7,5-8,0 (tampone Tris-HCl) e NAD è richiesto come coenzima. A differenza della T4 DNA ligasi, che può unire sia le estremità appiccicose che quelle smussate, questo enzima catalizza solo la legatura tra molecole di DNA a estremità coesiva. Tuttavia, in presenza di PEG e alte concentrazioni di cationi monovalenti, può anche legare DNA a estremità smussata. Inoltre, questo prodotto non può catalizzare le legature tra DNA e RNA o tra molecole di RNA. Questo enzima può essere utilizzato per reazioni di legatura nella libreria di metilazione NGS e può anche essere impiegato nel metodo Okayama-Berg per la clonazione del cDNA.
Specifiche
| Concentrazione | 60 unità/microlitro |
| Definizione di unità | In un 20 microlitro sistema di reazione di legatura, la quantità di enzima necessaria per legare oltre il 90% di of 6 μg di DNA λ- Frammenti di Hind III a 16°C per 30 minuti è definito come un'unità di attività (U) |
Componenti
| Nome | 14955ES82 | |
| 14955-A | Escherichia coli DNA ligasi (60 U/μL) | 20 microlitri |
| 14955-B | 10× Escherichia coli Tampone della DNA ligasi | 100 microlitri |
| 14955-C | 10×BSA (0,05%) | 100 microlitri |
Nota: la BSA deve essere protetta da ripetuti congelamenti e scongelamenti. Per una conservazione a breve termine, può essere tenuta a 4℃.
Spedizione e stoccaggio
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Documenti:
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Manuali
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