MolPure^TM Kit magnetico universale per DNA/RNA virale è adatto per estrarre l'acido nucleico virale da campioni di sangue intero o di fluidi corporei privi di cellule (come siero, plasma, liquido cerebrospinale, tampone nasale/faringeo, liquido di lavaggio alveolare, ecc.). Questo metodo adotta la tecnologia di purificazione con microsfere magnetiche, senza estrazione di cloroformio fenolo tossico, sicuro, non tossico e veloce. I prodotti risultanti possono essere utilizzati direttamente per PCR, qPCR, sequenziamento di seconda generazione e altri esperimenti. Con lo strumento di estrazione automatica del metodo con microsfere magnetiche, è possibile realizzare l'estrazione ad alto rendimento dell'acido nucleico.

Prodotto Iinformazione

Componenti

Bintagliato Versione

V preconfezionatoersione

Magazzinaggio

Parte I: Conservare a temperatura ambiente, trasportare a temperatura ambiente, con una durata di conservazione di 1 anno.

Parte II: Per il componente 18521-G (Proteasi K), conservare a 2~8℃, trasportare a temperatura ambiente.

Appunti

1.I vari buffer in questo kit contengono sali di guanidinio. Per la tua sicurezza e salute, indossa un camice da laboratorio

e guanti monouso durante l'operazione. Maneggiare secondo le precauzioni di sicurezza standard per evitare il contatto con la pelle, gli occhi e le mucose. In caso di contatto, sciacquare immediatamente e abbondantemente con acqua e consultare un medico.

2.Se si verifica una precipitazione nella soluzione, è necessario riscaldarla in un bagno d'acqua a 30°C fino a quando il precipitato non è

completamente sciolto prima dell'uso.

3．Se la sospensione di sfere magnetiche è congelata, non utilizzarla.

4．I vari tamponi in questo kit contengono sali di guanidinio. Non trattare con disinfettanti ossidanti come

come l'ipoclorito di sodio, poiché può rilasciare gas tossici. Devono essere trattati come rifiuti medici.

5.Durante l'eluizione, potrebbero esserci delle sfere magnetiche residue. Quando si aspirano i campioni, cercare di evitare di inalare il

perline magnetiche.

Istruzioni

1. Tipi di campione applicabili: sangue intero, siero, plasma, liquido cerebrospinale, tamponi nasali/faringei,

liquido di lavaggio broncoalveolare e altri campioni.

2. Conservazione e trasporto dei campioni: i campioni possono essere utilizzati immediatamente per i test o conservati a -70°C o

inferiore per test futuri con una durata di conservazione di 6 mesi. Evitare ripetuti congelamenti e scongelamenti. I campioni devono essere trasportati utilizzando la logistica della catena del freddo.

3. Requisiti di congelamento e scongelamento: congelamento e scongelamento rapidi per evitare cicli ripetuti.

Fasi operative

Prima degli esperimenti è stata controllata la precipitazione della soluzione e la possibilità di risospendere le sfere magnetiche.

Manuale Eestrazione

1. Trasferire 200-300 μL del campione in una provetta da centrifuga da 1,5 mL, aggiungere 600 μL di liquido legante la lisi,

20μL di proteasi K e 20μL di sospensione di sfere magnetiche, quindi miscelare con vortex per 30 secondi ad alta velocità. Incubare a 50°C con agitazione per 5-7 minuti; se l'incubatrice non ha una funzione di agitazione, agitare con vortex tre volte durante l'incubazione, ciascuna per 15 secondi.

2. Trasferire su un supporto magnetico da 1,5 ml per separazione magnetica fino a quando la soluzione non diventa limpida e trasparente, quindi aspirare e scartare la soluzione.

3. Aggiungere 700 μl di soluzione di lavaggio A, agitare per 10 secondi per disperdere le sfere magnetiche, quindi trasferire sul supporto magnetico per la separazione magnetica finché la soluzione non diventa limpida, quindi aspirare e scartare la soluzione.

4. Aggiungere 700 μl di soluzione di lavaggio B, agitare per 10 secondi per disperdere le sfere magnetiche, quindi trasferire sul supporto magnetico per la separazione magnetica finché la soluzione non diventa limpida, quindi aspirare e scartare la soluzione.

5. Ripetere il passaggio 4 con altri 700 μL di soluzione di lavaggio B.

6. Centrifugare brevemente per raccogliere le goccioline sulla parete della provetta, trasferire sul supporto magnetico finché non diventa trasparente, aspirare e scartare il liquido residuo. Lasciare asciugare all'aria per 3-5 minuti.

Nota: i residui di etanolo possono inibire le successive reazioni enzimatiche, quindi assicurarsi che l'etanolo evapori completamente durante l'essiccazione. Non essiccare per troppo tempo per evitare di compromettere l'eluizione successiva.

7. Aggiungere 50-100 μL di liquido di eluizione, agitare ad alta velocità per 2-3 minuti per disperdere le sfere magnetiche. Incubare a 60°C per 5 minuti, quindi agitare ad alta velocità per 60 secondi.

8. Centrifugare brevemente per raccogliere le goccioline dal tappo della provetta nella provetta, trasferire sul supporto magnetico fino a quando le sfere magnetiche non saranno completamente assorbite, quindi trasferire con attenzione il liquido in una nuova provetta da centrifuga per ottenere la soluzione di acido nucleico.

9. La soluzione di acido nucleico può essere conservata a -20°C per brevi periodi o a -80°C per lunghi periodi.

Automatizzato Eestrazione

Sììì Strumento automatico per l'estrazione e la purificazione degli acidi nucleici AP-96N (per altri tipi di strumenti, contattare il supporto tecnico)

1. Prima dell'esperimento, pre-confezionare il piastra a foro profondo con oscillazione di forza più volte per evitare residui di liquido sulla membrana di tenuta. La soluzione è stata controllata per la precipitazione e se le sfere magnetiche potevano essere risospese.

2. Posizionare ciascuna piastra da 96 pozzetti nello strumento di estrazione degli acidi nucleici in ordine e posizionare il manicotto magnetico a 96 fori.

Posizione 1: scindere la piastra di rilegatura

Posizione 2: tavola di risciacquo

Posizione 3: lavaggio + piastra a sfere magnetiche

Posizione 4: piastra di lavaggio

Posizione 6: piastra di eluizione

3. Aggiungere 200-300 µL di campione e 20 µL di proteasi K nei pozzetti della piastra di legame della lisi.

4. Eseguire la seguente procedura. Dopo la procedura, trasferire l'eluato dalla piastra di eluizione a una nuova provetta da centrifuga. La soluzione può essere posizionata a -20℃ per la conservazione a breve termine e a -80℃ per la conservazione a lungo termine.

Programma dello strumento di estrazione degli acidi nucleici del canale AP-96N