Descrizione
La proteasi SUMO riconosce la proteina etichettata SUMO (Small Ubiquitin-like Modifier) completa con 100 amminoacidi e taglia efficacemente la SUMO dalla proteina di fusione. Rispetto ai siti di riconoscimento di EK e TEV, la proteasi SUMO ha un'elevata specificità grazie alla sua lunga sequenza di riconoscimento e mantiene un'elevata attività in un'ampia gamma di sistemi ambientali di reazione, come temperatura (4-30℃), pH (5,5-9,5), ecc. La proteasi SUMO ha anche un'etichetta His polimerizzata, che è comoda per rimuovere la proteasi SUMO e purificare la proteina target mediante cromatografia di affinità.
Specifiche
| N. di cat. | 20410ES60 / 20410ES70 / 20410ES80 |
| Misurare | 100 unità / 500 unità / 1000 unità |
| Attività enzimatica | 1 Unità/μL |
| Unità Definizione | La quantità di enzima necessaria per taglio >85% del substrato da 3 μg in un tampone 1×rTEV (50 mM Tris, pH 8,0, 0,1 mM EDTA, 1 mM DTT) a 30℃ per 1 h è stato definito come unità di attività |
| Fonte | Espresso in Escherichia coli |
| Etichetta | Polimerizzato la sua etichetta |
| Purezza delle proteine | > 90% |
| Peso molecolare | 26,55 kDa |
| Magazzinaggio Respingente | 25 mM Tris-HCl, pH 8,0,0,1% Igepal (NP-40),250 mM di NaCl,500 μM di DTT,50% glicerina |
Componenti
Nota：La definizione dell'attività enzimatica utilizza il tampone proteasi 10× (-sale). La proteasi SUMO ha un'attività relativamente elevata In Tampone proteasi 10× (-sale), ma per substrati instabili, si dovrebbe selezionare il tampone proteasi 10× (+sale). Forniamo anche il tampone di reazione 20410-B2 con +sale.Scegli il buffer corretto per il tuo esperimento. 20410-B2：500 mM Tris-HCl, pH 8,0, 2% Igepal (NP-40), 1,5 M NaCl, 10 mM di DTT；20410-B1：500 mM Tris-HCl, pH 8,0, 2% Igepal (NP-40), 10 mM di DTT. | ||||||||||||||||||||
Magazzinaggio
Questo prodotto deve essere conservato a -85~-65℃ per 1 anno.
Istruzioni
- Nel tubo EP è formulato il seguente sistema di reazione:
- Incubare a 30℃, aspirare 20 μL della soluzione di reazione sopra indicata dopo 1, 2, 4 e 6 ore in una provetta EP separata rispettivamente.
- Aggiungere 20 μL Di 2×SDS caricare il tampone nella provetta EP e posizionarla a -20℃.
- Dopo che la reazione di tutti i campioni è stata completata, i campioni sono stati bolliti per 5 min e sono stati prelevati 30 μL per l'analisi SDS-PAGE. Determinare il tempo di risposta ottimale.
| Componenti | Volume (μL) (Il sistema di reazione può essere ridimensionato in modo uniforme) |
| Proteina di fusione | 50 μg |
| Tampone proteasi 10× | 20 microlitro |
| Proteasi SUMO (1U/μL) | 10 microlitri |
| ddH2Lo | fino a 200 μL |
Nota: Se la proteina di fusione richiede un trattamento a bassa temperatura, la soluzione di reazione può essere posizionata a 4℃ per prolungare il tempo di reazione e aumentare la quantità di enzima SUMO per garantire l'effetto della digestione enzimatica.
Tavolo 1. SUMO Proteasi attività di digestione a diverse temperature
| Incubazione Tempo(H） | Attività digestiva a diverse temperature (%) | |||
| 4℃ | 16℃ | 25℃ | 30℃ | |
| 0,5 | 48 | 73 | 83 | 88 |
| 1 | 60 | 87 | 90 | 93 |
| 2 | 71 | 94 | 94 | 95 |
| 3 | 74 | 95 | 95 | 95 |
Appunti
1. Si prega di indossare i DPI necessari, come camici e guanti, per garantire la propria salute e sicurezza.
2. Questo prodotto è destinato esclusivamente alla ricerca.
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Indagine
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