La proteina naturale A è una proteina di superficie della parete cellulare presente nello Staphylococcus aureus, è simile alla proteina G isolata dall' genere G O C Streptococco, legare maggior parte mammifero IgG di interagendo principalmente con IL Chi è regione di immunoglobulina (Ig), ma differiscono nella loro specificità di legame. Può essere utilizzato per la separazione e la purificazione di una varietà di anticorpi (anticorpo monoclonale e anticorpo policlonale). La proteina A e la proteina G differiscono nelle loro proprietà di legame a diverse sottoclassi di immunoglobuline (vedere Appendice 1 per i dettagli).
Questo prodotto utilizza la proteina A geneticamente modificata, che non solo mantiene le sue proprietà di affinità Ig, ma rimuove anche il dominio di legame non principale della proteina naturale stessa per ridurre il legame non specifico. La resina di agarosio SuRi rProtein A, che è un gel di agarosio altamente reticolato come matrice e una proteina A ricombinante resistente agli alcali modificata come ligando, ha un'elevata stabilità fisico-chimica. Un anticorpo ad alta purezza può essere ottenuto da campioni di ascite, siero e terreno di coltura mediante cromatografia di affinità in un unico passaggio con questo prodotto, che è comodo da usare e ampiamente utilizzato.

Componenti

Specifiche

Spedizione E Magazzinaggio

I prodotti vengono spediti con ghiaccio.   Può essere conservato stabilmente a 2~8℃ per 5 anni.

Istruzioni

1. Preparazione del tampone

Si raccomanda quanto segue i tamponi devono essere filtrati con una membrana filtrante da 0,22 μm o 0,45 μm prima dell'uso. Tampone di bilanciamento/legatura/lavaggio: 0,15 M NaCl, 20 mM Na2 HPO4, pH 7,0

Tampone di eluizione: glicina 0,1 M, pH 3,0

Tampone neutralizzante: 1 MTris-HCl, pH 8.5

2. Preparazione del campione

Garantire Quello IL campione soluzione ha IL appropriato ionico forza E pH Prima caricamento IL colonna, O di diluendo il campione di siero, l'ascite o la soluzione di coltura cellulare con un tampone di legame/lavaggio, o mediante dialisi del campione con un tampone di legame/lavaggio.

3. Riempimento della colonna

Caricare la proteina SuRi rProtein UN Resina di agarosio in una colonna cromatografica adatta, facendo attenzione a evitare bolle.

4. Purificazione del campione

1) Equilibrio: La colonna cromatografica È bilanciato con un legame Respingente di 5 volte IL colonna volume, COSÌ Quello l'imballaggio è nello stesso sistema tampone di la proteina bersaglio e svolge la funzione di protezione della proteina.

2) Campione caricamento: IL campione era caricato A IL ben bilanciato rProteina UN Agarosio Resina A garantire pieno contatto tra la proteina bersaglio e la resina, migliorare il recupero tasso della proteina bersaglio e raccogliere l'effluente per essere testato.

3) Lavaggio: Lavare con 10-15 volte il colonna volume del lavaggio Respingente, rimuovere IL impurità proteina salvo che specificamente adsorbito, raccogliere la soluzione di lavaggio.

4) Eluizione: Eluizione con 5-10 volte colonna volume del eluizione Respingente, raccogliere eluente, Quello È, IL bersaglio proteina componente.

5) Pulizia CIP E conservazione: Generalmente utilizzo 0,1-0,5 M NaOH maggiore di 3CV, e IL contatto tempo È 15 minimo; Poi risciacquare con soluzione di bilanciamento 5CV fino a ottenere una reazione neutra. Infine, è bilanciato con il 20% etanolo di 5 volte la colonna volume, E Poi immagazzinato  In 20%  etanolo  Di IL  Stesso  volume  A  4°C  A  impedire  IL  imballaggio  da  essendo contaminato da batteri.

5. Rilevamento SDS-PAGE

IL campioni ottenuto In IL purificazione processo (compreso originale campioni, effluente componenti, lavaggio E componenti di eluizione, ecc.) sono stati rilevati tramite SDS-PAGE per determinare l'effetto di purificazione.

Appunti

1. Non refrigerare il prodotto.
2. La resina di agarosio rProteinAAgarose deve essere completamente capovolta più volte prima dell'uso, in modo che la resina di agarosio si mescoli uniformemente.
3. Durante tutte le operazioni, il campione deve essere trattato a 4°C o su ghiaccio.
4. Per la vostra sicurezza e salute, vi preghiamo di indossare camici da laboratorio e guanti monouso durante il funzionamento.
5. Solo per uso di ricerca.

Tabella allegata 1: Riepilogo della capacità di legame of proteine ​​A e G a Ig in diverse specie

Proteina SuRi r A Agarosio Resina