Descrizione
Negli eucarioti, l'mRNA subisce modifiche post-trascrizionali, formando una struttura speciale all'estremità 5' nota come struttura del cappuccio. Questa struttura svolge un ruolo importante nella stabilità, nel trasporto e nella traduzione dell'mRNA. L'enzima di capping del virus del vaccino è un enzima efficace che catalizza la formazione della struttura del cappuccio. È costituito da due subunità, D1 e D12, e ha attività di RNA trifosfatasi, attività di guanililtransferasi e attività di guanina N7-metiltransferasi. Può legare la struttura del cappuccio della 7-metilguanosina (m7Gppp) all'estremità 5' dell'RNA (m7Gppp5'N).
L'enzima di capping del virus vaccinico, in presenza di tampone di capping (tampone di capping), guanosina trifosfato (GTP), S-adenosilmetionina (SAM) e altri componenti a concentrazioni appropriate, è in grado di capping l'RNA entro un'ora, garantendo al contempo la corretta direzionalità.
Questo kit utilizza il principio di un saggio immunoenzimatico a sandwich a doppio anticorpo (ELISA) per rilevare la quantità residua di enzima di capping del virus del vaiolo vaccino. Lo standard dell'enzima di capping del virus del vaiolo vaccino e i campioni di prova vengono aggiunti a una piastra enzimatica pre-rivestita con anticorpi anti-enzima di capping del virus del vaiolo vaccino (36709-A), seguiti dall'aggiunta di un anticorpo di rilevamento dell'enzima di capping marcato con biotina diluito (36709-C) e infine Streptavidina-HRP (SA-HRP) (36709-D). Ciò forma il complesso anticorpo+antigene+anticorpo-Biotina+SA-HRP. Dopo il lavaggio, viene aggiunta la soluzione di substrato TMB (36709-H) per sviluppare il colore.
Sotto la catalisi dell'enzima HRP, il TMB si trasforma da incolore a blu e, sotto l'azione della soluzione di arresto (36709-I), viene infine convertito in giallo. L'intensità del colore giallo è correlata positivamente alla quantità di enzima di capping del virus del vaccino rilevata nel campione.
Componenti
NO. | Nome | 36709ES48 | 36709ES96 |
36709-A | Enzima di capping anti-vaccino rivestito strisce microtitolate | 48 T | 96 anni |
36709-B* | Standard: Enzima di capping del vaccino | 1 fiala | 2 fiala |
36709-C | Rilevamento Anticorpo: biotina-coniugato Anticorpi | 60 microlitro | 120 microlitro |
36709-D | Streptavidina-HRP | 20 microlitro | 40 microlitro |
36709-E | Tampone di diluizione 1 | 25 ml. | 45 ml. |
36709-F | Tampone di lavaggio concentratotasso (20×) | 25 ml. | 50 ml. |
36709-G | Tampone di diluizione 2 | 15 ml. | 30 ml. |
36709-H | Substrato TMB | 8 ml. | 15 ml. |
36709-I | Soluzione di arresto | 5 ml. | 10 ml. |
36709-J | Sigillante per piastre | 3 ciascuno | 5 ciascuno |
*Lo standard 36709-B è una polvere liofilizzata.
Spedizione e stoccaggio
Conservare a 2-8°C. La durata di conservazione è di 1 anno se non aperto e di 1 mese dopo l'apertura.
Al ricevimento del prodotto, controllare che tutti i componenti siano completi e conservarli immediatamente alla temperatura di conservazione corrispondente.
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