Descrizione
La fibronectina (FN) è una glicoproteina extracellulare che esiste in forma solubile nei fluidi corporei o in forma insolubile nella matrice extracellulare. Come una delle principali molecole di adesione cellulare, la FN svolge un ruolo chiave in molti importanti processi fisiologici, come l'embriogenesi, la guarigione delle ferite, l'emostasi e la trombosi. I cambiamenti nell'espressione, nella degradazione e nella combinazione della fibronectina sono strettamente correlati a un gran numero di eventi patologici, tra cui cancro e fibrosi.
Applicazioni della fibronectina (FN):
1) Come matrice di coltura cellulare; la sua funzione è quella di promuovere la crescita cellulare, aumentare il tasso di adesione cellulare, migliorare il livello del metabolismo cellulare, ridurre il tempo di crescita cellulare; aumentare il tasso di fusione cellulare nella tecnologia degli ibridomi, ecc.
2) Diagnosi e cura delle malattie; la sua funzione è la riparazione e la guarigione delle ferite, la diagnosi e la cura del cancro, la cura del sistema vascolare e delle malattie cardiovascolari e cerebrovascolari, ecc.
Questo prodotto è una fibronectina umana ricombinante derivata da cellule endospermiche di riso, esistente in forma monomerica, e può essere utilizzata come matrice di coltura cellulare per sostituire Matrigel, collagene di coda di ratto, fibronectina derivata dal sangue, ecc., per aumentare il tasso di adesione cellulare, migliorare il livello di metabolismo cellulare e accorciare il ciclo di crescita cellulare. Può anche essere aggiunto direttamente al terreno di coltura per sostituire o ridurre la quantità di siero utilizzata, promuovere l'adesione cellulare, la migrazione, la crescita mobile e mantenere lo stato cellulare.
Questo prodotto è una polvere liofilizzata, di grado per coltura cellulare, che presenta piccole differenze da lotto a lotto e nessun potenziale rischio di infezione virale.
Prodotto Proprietà
Numero CAS | 86088-83-7 |
Fonte | Rghiaccio |
Peso molecolare | Da 200 a 210 kDa |
Aspetto fisico | Polvere liofilizzata (congelata) bianca, filtrata sterile. |
Purezza | > 95% tramite SDS-PAGE |
pH | 6.0~8.0 |
Attività biologica | L'ED50 come determinato da un test di adesione celI utilizzando cellule di melanoma del topo B16-F1 è inferiore a 1,1 μg/mL, corrispondente a un'attività specifica di > 1,17 X 107 UI/mg. |
Endotossina | < 0.5 UE/μg |
Spedizione e stoccaggio
Questo prodotto deve essere conservato a -25~-15℃ per 3 anni.
Ricostituzione
Sciogliere la fibronectina umana ricombinante (rFN) in 1×PBS per preparare una soluzione di conservazione con una concentrazione di 1 mg/mL. Conservare a -20°C in aliquote in base a dosi monouso per evitare ripetuti congelamenti e scongelamenti. È efficace per 3-6 mesi.
Istruzioni per l'uso
1. Esperimento di rivestimento (prendendo come esempio una piastra a 6 pozzetti, per altre piastre di coltura, fare riferimento alla Tabella 1)
1.1 Prelevare una quantità appropriata di fibronectina umana ricombinante (rFN) e diluirla alla concentrazione della soluzione di lavoro con 1×PBS sterile, pH 7,2~7,4, e l'intervallo di riferimento della concentrazione finale è 50~100 μg/mL. Dopo la miscelazione, aggiungerla alla piastra a 6 pozzetti, 800 μL/pozzetto, per assicurarsi che la soluzione di lavoro copra completamente il fondo della piastra a 6 pozzetti.
1.2 Posizionare la piastra a 6 pozzetti con la soluzione di lavoro rFN a 4 ℃ durante la notte o a 37 ℃ per il rivestimento per 1 ora.
1.3 Raccogliere la soluzione di lavoro nella piastra a 6 pozzetti e conservarla a 4 ℃. Può essere utilizzata per rivestire altre bottiglie/piastre di coltura entro una settimana.
1.4 Estrarre la piastra a 6 pozzetti rivestita con rFN, aggiungere il normale terreno di coltura cellulare e inoculare direttamente le cellule. rFN favorisce l'adesione e la crescita cellulare.
1.5 Se la piastra rivestita a 6 pozzetti non viene utilizzata per il momento, conservarla in un contenitore sigillato a 4℃. Si consiglia di utilizzarla entro una settimana.
Tabella 1. Quantità di aggiunta di rFN raccomandate per diverse bottiglie/piastre di coltura
Piastre/piatti per colture cellulari | Superficie inferiore (cm)2) | Dosaggio consigliato |
Piastra a 96 pozzetti | 0,32 | 50μL/pozzetto |
Piastra a 24 pozzetti | 2 | 200μL/pozzetto |
Piastra a 12 pozzetti | 4.5 | 400μL/pozzetto |
Piastra a 6 pozzetti | 9.6 | 800μL/pozzetto |
Piatto da 35 mm | 8 | 600μL/pozzetto |
Piatto da 60mm | 21 | 1.6 ml/piatto |
Bottiglia T-25 | 25-28 | 2 ml/bottiglia |
Nell'esperimento di rivestimento/placcatura, la quantità di soluzione di lavoro di fibronectina umana ricombinante (rFN) aggiunta deve essere regolata in base alle dimensioni della piastra/bottiglia di coltura, come mostrato nella Tabella 1 sottostante.
2. Esperimento di coltura cellulare
Durante la coltura cellulare, l'aggiunta di rFN direttamente al mezzo di coltura cellulare può promuovere l'adesione cellulare, la migrazione e mantenere lo stato cellulare. L'intervallo di riferimento della concentrazione finale è 5~50 μg/mL.
Appunti
1. Questo prodotto è destinato esclusivamente alla ricerca.
2. Si prega di operare con camici da laboratorio e guanti monouso,per la tua sicurezza.
AttenzioneS
1. Evitare ripetuti cicli di congelamento-scongelamento.
2. Per la vostra sicurezza e salute, vi preghiamo di indossare camici da laboratorio e guanti monouso durante il funzionamento.
3. Solo per uso di ricerca!
Pagamento e sicurezza
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