Trasmettitore Hieff™ Reagente di trasfezione liposomiale Domande frequenti

(1) D: Il siero può essere presente durante la preparazione del complesso reagente di trasfezione dell'acido nucleico?

A: La presenza di siero influirà sulla formazione dei liposomi. Si raccomanda di utilizzare un mezzo privo di siero (solitamente un mezzo MEM) quando si preparano complessi di reagenti di trasfezione di acidi nucleici.

(2) D: Il reagente di trasfezione può essere congelato?

R: No. Questo reagente deve essere conservato a una temperatura compresa tra 2 e 8 ℃ e bisogna fare attenzione a non aprire ripetutamente il tappo per un lungo periodo, poiché l'apertura prolungata del tappo causerà l'ossidazione dei liposomi e influenzerà l'efficienza della trasfezione.

(3) D: A cosa dovrei prestare attenzione quando utilizzo il reagente di trasfezione dell'acido nucleico liposomiale Hieff Trans™?

A: 1) Durante l'operazione di trasfezione, è meglio che la confluenza cellulare raggiunga l'80%-95% e la densità di placcatura specifica venga determinata in base alla situazione delle cellule;

2) L'utilizzo di DNA ad elevata purezza aiuta a ottenere una maggiore efficienza di trasfezione;

3) Durante la preparazione dei complessi di trasfezione, è necessario diluire il DNA e i reagenti di trasfezione con un mezzo privo di siero;

4) Non è possibile aggiungere antibiotici al terreno durante la trasfezione;

5) La concentrazione del DNA e la quantità di reagente liposomiale cationico devono essere ottimizzate per il primo utilizzo per ottenere la massima efficienza di trasfezione. Il rapporto tra DNA e reagente di trasfezione è in genere si consiglia un rapporto di 1:2-1:3.

(4) D: È necessario terminarlo dopo la trasfezione?

R: Non è necessario. I complessi liposomiali sono stabili per 6 ore. Se il mezzo cellulare non viene cambiato prima della trasfezione, per garantire i nutrienti richiesti per la normale crescita cellulare, è necessario cambiare mezzo dopo 4-6 ore. Tuttavia, se il mezzo è stato cambiato prima della trasfezione, non è necessario cambiare mezzo dopo la trasfezione dei liposomi.

(5) D: A cosa dovrei prestare attenzione se voglio migliorare l'efficienza della trasfezione?

A: a: La densità delle cellule al momento della trasfezione è del 90%-95%.

b: Durante la trasfezione, utilizzare un mezzo MEM privo di siero per le diluizioni di acidi nucleici e liposomi.

c: Il mezzo può essere cambiato 4-6 ore dopo la trasfezione.

(6) D: È possibile eseguire la co-trasfezione di DNA e siRNA? Qual è l'effetto?

R: È possibile eseguire la co-transfezione, ma si raccomanda di eseguire la transfezione separata e la transfezione del DNA dovrebbe essere eseguita 6 ore dopo l'siRNA. Se si opera insieme, l'efficienza della transfezione dell'siRNA sarà peggiore.

(7) D: Il reagente di trasfezione può essere utilizzato per la trasfezione del confezionamento lentivirale?

R: Il confezionamento lentivirale è possibile, ma la sua efficienza non è necessariamente correlata all'efficienza della trasfezione, bensì anche alla selezione dei plasmidi di confezionamento e al rapporto tra i plasmidi.

(8) D: Il reagente di trasfezione dell'acido nucleico liposomiale Hieff Trans™ può essere utilizzato per la trasfezione di cellule in sospensione?

A: Hieff Trans™ Liposome Nucleic Acid Transfection Reagent può essere utilizzato per la trasfezione di cellule in sospensione, vedere Protocollo per i dettagli. Inoltre, abbiamo anche lanciato un reagente di trasfezione specificamente per cellule in sospensione (Cat. n. 40805, Liposome nucleic acid transfection reagent for suspension cells).

[1] Liu R, Yang J, Yao J, Zhao Z, He W, Su N, Zhang Z, Zhang C, Zhang Z, Cai H, Zhu L, Zhao Y, Quan S, Chen X, Yang Y. Controllo optogenetico della funzione e del metabolismo dell'RNA utilizzando proteine ​​leganti l'RNA commutabili dalla luce ingegnerizzate. Nat Biotechnol. 3 gennaio 2022. doi: 10.1038/s41587-021-01112-1. Epub anticipato. PMID: 34980910. (IF:54.908)

[2] Zhou J, Chen P, Wang H, Liu H, Li Y, Zhang Y, Wu Y, Paek C, Sun Z, Lei J, Yin L. Varianti Cas12a progettate per un effetto off-target inferiore su tutto il genoma attraverso un rigoroso riconoscimento PAM. Mol Ther. 2022 5 gennaio;30(1):244-255. doi: 10.1016/j.ymthe.2021.10.010. Epub 20 ottobre 2021. PMID: 34687846; PMCID: PMC8753454. (IF:11.454)

[3] Chen S, Cao X, Zhang J, Wu W, Zhang B, Zhao F.circVAMP3 guida la separazione di fase di CAPRIN1 e inibisce il carcinoma epatocellulare sopprimendo la traduzione di c-Myc. Adv Sci (Weinh). 2022 marzo;9(8):e2103817. doi: 10.1002/advs.202103817. Epub 2022 24 gennaio. PMID: 35072355; PMCID: PMC8922094. (IF:16.808)

[4] Zhang Y, Yu X, Sun R, Min J, Tang X, Lin Z, Xie S, Li X, Lu S, Tian Z, Gu C, Teng L, Yang Y. Il fattore di splicing arginina/serina-ricco 8 promuove la malignità del mieloma multiplo e la lesione ossea attraverso lo splicing alternativo di CACYBP e la comunicazione cellulare basata sugli esosomi. Clin Transl Med. 2022 febbraio;12(2):e684. doi: 10.1002/ctm2.684. PMID: 35184390. (IF:11.492)

[5] Tang X, Deng Z, Ding P, Qiang W, Lu Y, Gao S, Hu Y, Yang Y, Du J, Gu C. Una nuova proteina codificata da circHNRNPU promuove la progressione del mieloma multiplo regolando il microambiente del midollo osseo e lo splicing alternativo. J Exp Clin Cancer Res. 2022 marzo 8;41(1):85. doi: 10.1186/s13046-022-02276-7. PMID: 35260179. (IF:11.161)

[6] Hua Z, Wei R, Guo M, Lin Z, Yu X, Li X, Gu C, Yang Y. YTHDF2 promuove la proliferazione delle cellule del mieloma multiplo tramite l'asse STAT5A/MAP2K2/p-ERK. Oncogene. 2022 marzo;41(10):1482-1491. doi: 10.1038/s41388-022-02191-3. Epub 2022 gennaio 24. PMID: 35075244. (IF:9.867)

[7] Liang Y, Lu Q, Li W, Zhang D, Zhang F, Zou Q, Chen L, Tong Y, Liu M, Wang S, Li W, Ren X, Xu P, Yang Z, Dong S, Zhang B, Huang Y, Li D, Wang H, Yu W. Riattivazione del soppressore tumorale nel cancro al seno mediante commutazione dell'enhancer attraverso la rete NamiRNA. Nucleic Acids Res. 2021 7 settembre;49(15):8556-8572. doi: 10.1093/nar/gkab626. PMID: 34329471; PMCID: PMC8421228. (SE:16.9)

[8] Dai L, Dai Y, Han J, Huang Y, Wang L, Huang J, Zhou Z. Approfondimenti strutturali sul reclutamento del complesso BRCA1-BARD1 nella cromatina danneggiata. Mol Cell. 2021 1 luglio;81(13):2765-2777.e6. doi: 10.1016/j.molcel.2021.05.010. Epub 2021 7 giugno. PMID: 34102105. (IF:17.97)

[9] Zhang K, Wang A, Zhong K, Qi S, Wei C, Shu X, Tu WY, Xu W, Xia C, Xiao Y, Chen A, Bai L, Zhang J, Luo B, Wang W, Shen C. L'asse UBQLN2-HSP70 riduce gli aggregati di poli-Gly-Ala e allevia i difetti comportamentali nel modello animale C9ORF72. Neuron. 2021 16 giugno;109(12):1949-1962.e6. doi: 10.1016/j.neuron.2021.04.023. Epub 2021 14 maggio. PMID: 33991504. (IF:17.17)

[10] Liang Y, Lu Q, Li W, Zhang D, Zhang F, Zou Q, Chen L, Tong Y, Liu M, Wang S, Li W, Ren X, Xu P, Yang Z, Dong S, Zhang B, Huang Y, Li D, Wang H, Yu W. Riattivazione del soppressore tumorale nel cancro al seno mediante commutazione dell'enhancer attraverso la rete NamiRNA. Nucleic Acids Res. 2021 7 settembre;49(15):8556-8572. doi: 10.1093/nar/gkab626. PMID: 34329471; PMCID: PMC8421228. (IF:16.9)

[11] Li T, Chen X, Qian Y, Shao J, Li X, Liu S, Zhu L, Zhao Y, Ye H, Yang Y. Un dispositivo optogenetico sintetico basato su BRET per l'espressione pulsatile del transgene che consente l'omeostasi del glucosio nei topi. Nat Commun. 27 gennaio 2021;12(1):615. doi: 10.1038/s41467-021-20913-1. PMID: 33504786; PMCID: PMC7840992. (IF:14.92)

[12] Pan Y, He X, Li C, Li Y, Li W, Zhang H, Wang Y, Zhou G, Yang J, Li J, Qu J, Wang H, Gao Z, Shen Y, Li T, Hu H, Ma H. L'attività neuronale recluta l'asse CRTC1/CREB per guidare l'autofagia dipendente dalla trascrizione per il mantenimento dell'LTD in fase tardiva. Cell Rep. 2021 20 luglio;36(3):109398. doi: 10.1016/j.celrep.2021.109398. PMID: 34289350. (IF:9.42)

[13] Liu H, Xing R, Ou Z, Zhao J, Hong G, Zhao TJ, Han Y, Chen Y. Il recettore accoppiato alla proteina G GPR17 inibisce lo sviluppo del glioma aumentando la produzione di ROS mediata dal complesso repressivo Polycomb 1. Cell Death Dis. 2021 12 giugno;12(6):610. doi: 10.1038/s41419-021-03897-0. PMID: 34120140; PMCID: PMC8197764. (IF:8.463)

[14] Fan Y, Wang J, Jin W, Sun Y, Xu Y, Wang Y, Liang X, Su D.CircNR3C2 promuove l'effetto soppressivo del tumore mediato da HRD1 tramite spugnatura di miR-513a-3p nel carcinoma mammario triplo negativo. Mol Cancer. 2 febbraio 2021;20(1):25. doi: 10.1186/s12943-021-01321-x. PMID: 33530981; PMCID: PMC7851937. (IF:27.403)

[15] Gu C, Wang Y, Zhang L, Qiao L, Sun S, Shao M, Tang X, Ding P, Tang C, Cao Y, Zhou Y, Guo M, Wei R, Li N, Xiao Y, Duan J, Yang Y. AHSA1 è un promettente bersaglio terapeutico per la proliferazione cellulare e la resistenza agli inibitori del proteasoma nel mieloma multiplo. J Exp Clin Cancer Res. 2022 6 gennaio;41(1):11. doi: 10.1186/s13046-021-02220-1. PMID: 34991674; PMCID: PMC8734095. (IF:11.161)

[16] Luo Q, Wu X, Zhao P, Nan Y, Chang W, Zhu X, Su D, Liu Z. OTUD1 attiva l'apoptosi indipendente dalla caspasi e dipendente dalla caspasi promuovendo la traslocazione nucleare dell'AIF e la degradazione di MCL1. Adv Sci (Weinh). 8 febbraio 2021; 8 (8): 2002874. doi: 10.1002/advs.202002874. PMID: 33898171; PMCID: PMC8061361. (IF: 15,84)

[17] Luo Q, Wu X, Nan Y, Chang W, Zhao P, Zhang Y, Su D, Liu Z. TRIM32/USP11 bilancia la stabilità di ARID1A e lo stato oncogenico/soppressivo del tumore del carcinoma a cellule squamose. Cell Rep. 2020 7 gennaio;30(1):98-111.e5. doi: 10.1016/j.celrep.2019.12.017. PMID: 31914402. (IF:9.42)

[18] Sun X, Peng X, Cao Y, Zhou Y, Sun Y. L'ADNP promuove la differenziazione neurale modulando la segnalazione Wnt/β-catenina. Nat Comune. 2020 12 giugno;11(1):2984. doi: 10.1038/s41467-020-16799-0. PMID: 32533114; ID PMC: PMC7293280. (IF:14.911)

[19] Yang X, Wang H, Xie E, Tang B, Mu Q, Song Z, Chen J, Wang F, Min J. Il ricollegamento della segnalazione ERBB3 ed ERK conferisce resistenza all'inibizione di FGFR1 nel cancro gastrointestinale che ospita una mutazione ERBB3-E928G. Protein Cell. 2020 dicembre; 11 (12): 915-920. doi: 10.1007/s13238-020-00749-z. PMID: 32632529; PMCID: PMC7719122. (IF: 14.872)

[20] Chen, T., Chen, Y., Chen, H. et al. Nanomacchina a doppio enzima che cammina senza vincoli sul DNA per l'imaging intracellulare di microRNA poco espressi. Nano Res. 12, 1055–1060 (2019). https://doi.org/10.1007/s12274-019-2344-5 (SE:8.21)

[21] Zhang X, Qi Z, Yin H, Yang G. L'interazione tra la segnalazione p53 e Ras controlla la resistenza al cisplatino tramite la regolazione dell'apoptosi e dell'autofagia mediata da HDAC4 e HIF-1α. Teranostics. 30 gennaio 2019;9(4):1096-1114. doi: 10.7150/thno.29673. PMID: 30867818; PMCID: PMC6401400. (IF:8.12)

[22] Zou Y, Wang A, Shi M, Chen X, Liu R, Li T, Zhang C, Zhang Z, Zhu L, Ju Z, Loscalzo J, Yang Y, Zhao Y. Analisi di paesaggi redox e dinamiche in cellule viventi e in vivo utilizzando sensori fluorescenti codificati geneticamente. Nat Protoc. 2018 ottobre;13(10):2362-2386. doi: 10.1038/s41596-018-0042-5. PMID: 30258175; PMCID: PMC6714056. (IF:13.49)

[23] Zhang K, Zhao X, Chen X, Wei Y, Du W, Wang Y, Liu L, Zhao W, Han Z, Kong D, Zhao Q, Guo Z, Han Z, Liu N, Ma F, Li Z. Effetti terapeutici migliorati degli esosomi derivati ​​da cellule staminali mesenchimali con un idrogel iniettabile per il trattamento dell'ischemia degli arti posteriori. Interfacce ACS Appl Mater. 12 settembre 2018; 10 (36): 30081-30091. doi: 10.1021/acsami.8b08449. Epub 29 agosto 2018. PMID: 30118197. (IF: 8.09)

[24] Hao H, Hu S, Chen H, Bu D, Zhu L, Xu C, Chu F, Huo X, Tang Y, Sun X, Ding BS, Liu DP, Hu S, Wang M. La perdita di CXCR7 endoteliale compromette l'omeostasi vascolare e il rimodellamento cardiaco dopo infarto miocardico: implicazioni per la scoperta di farmaci cardiovascolari. Circolazione. 28 marzo 2017;135(13):1253-1264. doi: 10.1161/CIRCULATIONAHA.116.023027. Epub 2 febbraio 2017. PMID: 28154007. (IF:18.881)