D -luciferina, sale di sodio d -40901es

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Descrizione


La D-luciferina è un substrato comune per la luciferasi ed è ampiamente utilizzata in ambito biotecnologico, in particolare nella tecnologia di imaging in vivo.  Il meccanismo d'azione è che la luciferina (il substrato) viene ossidata per emettere luce in risposta all'ATP e alla luciferasi (vedere la figura sotto). Viene prodotto quando c'è troppa luciferina. Il numero quantico della luce è risultato correlato positivamente con la concentrazione di luciferasi. I plasmidi che trasportano il gene che codifica la luciferasi (Luc) sono stati trasfettati nelle cellule e introdotti negli animali da studio, come ratti e topi. In vivo, la fluoresceina viene quindi iniettata e le variazioni di intensità luminosa vengono rilevate utilizzando l'imaging a bioluminescenza (BLI) per monitorare la progressione della malattia o l'efficacia del farmaco in tempo reale e così via. L'influenza dell'ATP sul sistema di reazione può essere utilizzata anche per indicare energia o segni vitali in base alle variazioni dell'intensità della bioluminescenza.

La D-luciferina è anche comunemente usata negli studi in vitro, tra cui l'analisi dei livelli di luciferasi e ATP; analisi del gene reporter; sequenziamento ad alto rendimento e vari test di contaminazione. Attualmente ci sono tre forme di prodotto: D-luciferina (acido libero), sali di D-luciferina (sali di sodio e potassio). La differenza principale sta nella solubilità: la prima è solubile in acqua e la solubilità del sistema tampone è debole, tranne che solubile in basi deboli come soluzioni di NaOH e KOH a bassa concentrazione, solubile in metanolo e DMSO; la seconda è facilmente solubile in acqua o tampone, facile da usare, solvente non tossico, particolarmente adatto per esperimenti in vivo. Come soluzione, non c'è una differenza sostanziale tra i tre prodotti nella stragrande maggioranza delle applicazioni.

Caratteristiche

  • Nessuna radiazione, pressoché innocuo per gli organismi viventi.
  • Bioluminescenza, nessuna fonte di luce di eccitazione.
  • È così sensibile che è possibile rilevarlo in poche centinaia di cellule.
  • Buona penetrazione, è ancora possibile rilevare 3-4 cm di profondità nei tessuti.
  • Elevato rapporto segnale/rumore, forte segnale di fluorescenza e buona anti-interferenza.

Applicazione

  • Nell'esperimento di tumorigenesi su topi nudi, la crescita del tumore è stata osservata senza invasione in tempo reale, senza misurazione dello stripping del tumore.
  • Per testare l'effetto della somministrazione sulla crescita del tumore o sulle metastasi, il substrato della fluoresceina può essere completamente eliminato entro 3 ore, senza interferire con l'esperimento sul farmaco.
  • Sono state rilevate la localizzazione e la distribuzione di cellule estranee negli animali.
  • Il gene bersaglio o il promotore del gene bersaglio viene fuso con il gene della luciferasi per rilevare cambiamenti nell'espressione genica durante il trattamento farmacologico o la progressione della malattia.
  • Monitoraggio del trapianto, della sopravvivenza e della proliferazione delle cellule staminali; tracciamento della distribuzione e della migrazione delle cellule staminali in vivo.

Specifiche

sinonimo inglese (S)-4,5-diidro-2-(6-idrossi-2-benzotiazolil)-4-tiazolecarbossilico acido sodio sale; D-Luciferina lucciola, sale sodico monoidrato;
N. CAS 103404-75-7
Formula NaC11H7N2O3S2·H2O
Peso molecolare 320,32 g/mol
Aspetto Polvere giallo chiaro
Solubilità Solubile in acqua (100 mg/mL)
Purezza (analisi HPLC) ≥95%

Componenti

Componenti n. Nome 40901ES01 40901ES02 40901ES03 40901ES08 40901ES10
40901 D-Luciferina, sale di sodio 100 mg 500 mg 1g 5g 10g

Magazzinaggio

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Citazioni e riferimenti:

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