Descrizione
La D-luciferina è un substrato comune per la luciferasi ed è ampiamente utilizzata in tutta la biotecnologia, in particolare nella tecnologia di imaging in vivo. Il meccanismo d'azione è che la luciferina (substrato) può essere ossidata per emettere luce in presenza di ATP e luciferasi. Quando la fluoresceina è in eccesso, il numero quantico di luce prodotta è uguale a Le concentrazioni di luciferasi erano correlate positivamente (vedere la figura sotto). I plasmidi che trasportano il gene codificante la luciferasi (Luc) sono stati trasfettati nelle cellule e introdotti negli animali da studio come ratti e topi.
La D-luciferina è anche comunemente usata negli studi in vitro, tra cui l'analisi dei livelli di luciferasi e ATP; analisi del gene reporter; sequenziamento ad alto rendimento e vari test di contaminazione. Esistono tre forme di prodotto: D-luciferina (acido libero), sale di D-luciferina (sale di sodio e sale di potassio). La differenza principale sta nella solubilità: solubilità in acqua del primo e solubilità del sistema tampone. Sono debolmente solubili tranne che in basi deboli come basse concentrazioni di soluzioni di NaOH e KOH. Solubile in metanolo e DMSO; quest'ultimo può essere facilmente sciolto in acqua o tampone, facile da usare.
Caratteristiche
- Nessuna radiazione, pressoché innocuo per gli organismi viventi.
- Bioluminescenza, nessuna fonte di luce di eccitazione.
- È così sensibile che è possibile rilevarlo in poche centinaia di cellule.
- Buona penetrazione, è ancora possibile rilevare 3-4 cm di profondità nei tessuti.
- Elevato rapporto segnale/rumore, forte segnale di fluorescenza e buona anti-interferenza.
Applicazioni
- Nell'esperimento di tumorigenesi su topi nudi, la crescita del tumore è stata osservata senza invasione in tempo reale, senza misurazione dello stripping del tumore.
- Per testare l'effetto della somministrazione sulla crescita del tumore o sulle metastasi, il substrato della fluoresceina può essere completamente eliminato entro 3 ore, senza interferire con l'esperimento sul farmaco.
- Sono state rilevate la localizzazione e la distribuzione di cellule estranee negli animali.
- Il gene bersaglio o il promotore del gene bersaglio viene fuso con il gene della luciferasi per rilevare cambiamenti nell'espressione genica durante il trattamento farmacologico o la progressione della malattia.
- Monitoraggio del trapianto, della sopravvivenza e della proliferazione delle cellule staminali; tracciamento della distribuzione e della migrazione delle cellule staminali in vivo.
Specifiche
| sinonimo inglese | Sale di potassio dell'acido (S)-4,5-diidro-2-(6-idrossi-2-benzotiazolil)-4-tiazolecarbossilico; D-Luciferina lucciola, sale di potassio |
| N. CAS | 115144-35-9 |
| Formula | C11H7N2O3S2K |
| Peso molecolare | 318,42 g/mol |
| Aspetto | Polvere giallo chiaro |
| Solubilità | Solubile in acqua (60 (mg/ml) |
Componenti
| Componenti n. | Nome | 40902ES01 | 40902ES02 | 40902ES03 | 40902ES08 |
| 40902 | D-Luciferina, Sale di Potassio | 100 mg | 500 mg | 1g | 5g |
Cifre
Citato da "Un nuovo inibitore allosterico della fosfoglicerato mutasi 1 sopprime la crescita e le metastasi del carcinoma polmonare non a piccole cellule, Cell Metab.2019;30(6):1107-1119
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