Descrizione
L'osteoprotegerina (OPG), detta anche OCIF (fattore inibitorio dell'osteoclastogenesi), è una proteina secreta da 55-60 kDa che regola la densità ossea. Come membro della superfamiglia di proteine del recettore del fattore di necrosi tumorale (TNFR), è denominata TNFRSF11B. Il cDNA OPG umano codifica 401 aminoacidi (aa) tra cui un peptide segnale da 21 aa e una proteina solubile matura da 380 aa con quattro domini TNFR, due domini di morte e una regione di legame all'eparina. I domini TNFR ricchi di cisteina sono essenziali per l'interazione del ligando, mentre una cisteina al C-terminale media l'omodimerizzazione. L'OPG umano maturo condivide l'86%, l'87%, il 92%, il 92% e l'88% di identità di sequenza aminoacidica con l'OPG di topo, ratto, equino, canino e bovino, rispettivamente. L'OPG è ampiamente espresso e rilasciato costitutivamente come omodimero da cellule staminali mesenchimali, fibroblasti e cellule endoteliali. La regolazione della sua espressione da parte di estrogeni, ormone paratiroideo e citochine è complessa e cambia con l'età. OPG è stato definito un recettore esca per i ligandi della superfamiglia TNF, TRANCE (tumor necrosis factor-related activation-induced cytokine), chiamato anche RANK L (receptor activator of NF kappa B ligando), e TRAIL (TNF-related apoptosis-inducing ligando), che legano anche i recettori della famiglia TNF RANK e i recettori TRAIL 1-4, rispettivamente. TRAIL riduce il rilascio di OPG dalle cellule che lo esprimono, mentre OPG inibisce l'apoptosi indotta da TRAIL. L'espressione di RANK L sulla superficie cellulare, e quindi la sua capacità di stimolare l'osteoclastogenesi, è regolata da OPG tramite meccanismi intracellulari ed extracellulari. All'interno degli osteoblasti, l'interazione del dominio di base di OPG con RANK L nel Golgi inibisce la secrezione di RANK L. Extracellularmente, il legame di OPG a RANK L determina l'internalizzazione e la degradazione mediate dalla clatrina di entrambe le proteine. Il legame dell'OPG da parte dei solfati di eparina sindecano-1 sulle cellule del mieloma multiplo determina anche l'internalizzazione e la degradazione dell'OPG, contribuendo alla perdita ossea.
Prodotto Proprietà
| Adesione | O00300 |
| GeneID | 4982 |
| Fonte | OPG-Fc umano derivato dal lievito, Glu22-Lys194. |
| Peso molecolare | Circa 109,6 kDa. |
| Sequenza AA | ETFPPKYLHY DEETSHQLLC DKCPPGTYLK QHCTAKWKTV CAPCPDHYYT DSWHTSDECL YCSPVCKELQ YVKQECNRTH NRVCECKEGR YLEIEFCLKH RSCPPGFGVV QAGTPERNTV CKRCPDGFFS NETSSKAPCR KHTNCSVFGL LLTQKGNATH DNICSGNSES TQKCGIDVTL EPKSSDKTHT CPPCPAPEFE GAPSVFLFPP KPKDTLMISR TPEVTCVVVD VSHEDPEVKF NWYVDGVEVH NAKTKPREEQ YNSTYRVVSV LTVLHQDWLN GKEYKCKVSN KALPTPIEKT ISKAKGQPRE PQVYTLPPSR DELTKNQVSL TCLVKGFYPS DIAVEWESNG QPENNYKTTP PVLDSDGSFF LYSKLTVDKS RWQQGNVFSC SVMHEALHNH YTQKSLSLSP GK |
| Etichetta | con un C-terminale Fc |
| Aspetto fisico | Polvere liofilizzata (congelata) bianca, filtrata sterile. |
| Purezza | > 95 % mediante analisi SDS-PAGE e HPLC. |
| Attività biologica | Il DE50 come determinato dalla neutralizzazione della stimolazione delle cellule U937 è inferiore a 10 ng/mL, corrispondente ad un'attività specifica di > 1,0 × 105 UI/mg in presenza di 10 ng/mL di rHuRANKL solubile (sRANKL). Completamente biologicamente attivo rispetto allo standard. |
| Endotossina | < 1,0 EU per 1μg di proteina con il metodo LAL. |
| Formulazione | Liofilizzato da una soluzione concentrata filtrata a 0,2 μm in 20 mM PB, pH 6,0, 150 mM NaCl, 0,02% Tween-80. |
| Ricostituzione | Si consiglia di centrifugare brevemente questa fiala prima dell'apertura per portare il contenuto sul fondo. Ricostituire in acqua distillata sterile o tampone acquoso contenente 0,1% BSA a una concentrazione di 0,1-1,0 mg/mL. Le soluzioni madre devono essere suddivise in aliquote di lavoro e conservate a ≤ -20℃Ulteriori diluizioni devono essere effettuate in soluzioni tamponate appropriate. |
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