Descrizione
Le neurotossine botulinica e tetanica (BoNT e TeNT) sono metalloproteasi di zinco che idrolizzano e inattivano le proteine necessarie per la neurotrasmissione. Il dominio proteasico è localizzato nella catena leggera della neurotossina. Tra i substrati noti di BoNT e TeNT vi sono la proteina sinaptosomiale-25 (SNAP25) e la proteina di membrana associata alle vescicole (VAMP). Questo substrato incorpora una proteina fluorescente verde (GFPuv) e porzioni di SNAP25B e VAMP2 umane che contengono i siti di scissione di tutte le BoNT e TeNT note. Le catene leggere di BoNT -A, -C e -E scindono la sequenza SNAP25B, mentre BoNT -B, -D, -F, -G e TeNT scindono all'interno della sequenza VAMP2. Il substrato può essere utilizzato in un test di gel-shift SDSPAGE per rilevare la scissione da parte delle proteasi della neurotossina. In alternativa, il substrato può essere accoppiato a piastre per micropozzetti attivate con maleimide attraverso il residuo di cisteina C-terminale per generare un formato di analisi ad alta produttività. Un substrato e un formato di analisi simili sono stati utilizzati per lo screening di inibitori di queste proteasi neurotossiche.
Prodotto Proprietà
| Sinonimi | Proteina fluorescente verde, GFP/SNAP25B/VAMP-2 |
| Adesione | P42212 |
| GeneID | 7011691 |
| Fonte | Derivato da E.coli per esempioFP, con Met N-terminale. |
| Peso molecolare | Circa 26.9 unità di misura. |
| Sequenza AA | MVSKGEELFT GVVPILVELD GDVNGHKFSV SGEGEGDATY GKLTLKFICT TGKLPVPWPT LVTTLTYGVQ CFSRYPDHMK QHDFFKSAMP EGYVQERTIF FKDDGNYKTR AEVKFEGDTL VNRIELKGID FKEDGNILGH KLEYNYNSHN VYIMADKQKN GIKVNFKIRH NIEDGSVQLA DHYQQNTPIG DGPVLLPDNH YLSTQSALSK DPNEKRDHMV LLEFVTAAGI TLGMDELYK |
| Etichetta | Nessuno |
| Aspetto fisico | Polvere liofilizzata (congelata) bianca, filtrata sterile. |
| Purezza | > 95% mediante analisi SDS-PAGE e HPLC. |
| Endotossina | < 1,0 EU per 1μg di proteina con il metodo LAL. |
| Formulazione | Liofilizzato da una soluzione concentrata filtrata a 0,2 μm in PBS, pH 7,4. |
| Ricostituzione | Si consiglia di centrifugare brevemente questa fiala prima dell'apertura per portare il contenuto sul fondo. Ricostituire in acqua distillata sterile o tampone acquoso contenente 0,1% BSA a una concentrazione di 0,1-1,0 mg/mL. Le soluzioni madre devono essere suddivise in aliquote di lavoro e conservate a ≤ -20℃.Ulteriori diluizioni devono essere effettuate in soluzioni tamponate appropriate. |
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AttenzioneS
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