Descrizione
Fas (Fibroblast COMEassociato; noto anche come APO-1 o CD95) è un membro della sottofamiglia del recettore della morte della superfamiglia del recettore del TNF ed è denominato TNFRSF6. Il precursore umano di Fas è lungo 335 aa e contiene un peptide segnale di 25 aa, un dominio extracellulare (ECD) di 148 aa, una sequenza transmembrana di 17 aa e una regione citoplasmatica di 145 aa. L'ECD possiede tre ripetizioni TNFR ricche di cisteina, mentre la regione citoplasmatica contiene un dominio della morte (DD) che è necessario per la trasduzione dei segnali apoptotici (4). L'ECD umano di Fas condivide il 55%, il 58%, il 62%, il 63% e il 64% di identità di sequenza aa con l'ECD di Fas di topo, ratto, felino, bovino e suino, rispettivamente. Un'isoforma umana di Fas di 314 aa che non ha la sequenza transmembrana è secreta dai linfociti a riposo, mentre le isoforme di 149, 132, 103 e 86 aa che non hanno anche la DD e mostrano sostituzioni per parti delle ripetizioni TNFR sono espresse in modo meno evidente. Tutte e cinque le isoforme bloccano il pathway dell'apoptosi estrinseca indotta dal legame del ligando Fas. Il ligando Fas (FasL; anche TNFSF6) è una proteina transmembrana di tipo II che appartiene alla famiglia del TNF ed è espressa su cellule T attivate, cellule NK e cellule trovate in siti immunitari privilegiati. In alternativa, FasL viene anche rilasciata come forma solubile. L'impegno di Fas induce l'oligomerizzazione dei trimeri di Fas preformati. Questo complesso recettoriale attivato recluta la molecola adattatrice FADD per formare il Death-Inducing Signaling Complex (DISC). Dopo l'attivazione, le caspasi nel DISC avviano la cascata di segnalazione apoptotica. Fas è prominente nelle cellule epiteliali, negli epatociti, nei linfociti maturi attivati, nei linfociti trasformati da virus e nelle cellule tumorali. È un mediatore essenziale nella morte indotta dall'attivazione dei linfociti T che termina la reazione immunitaria.
Specifiche
| Sinonimi | Recettore FASLG; CD95; APT1; FAS1; TNFRSF6; FAS; ALPS1A; APO1; FASTM; FasR |
| Numero Uniprot. | |
| Fonte | La proteina umana ricombinante Fas/TNFRSF6/CD95 è espressa da Cellule HEK293 con il suo tag al C-terminale. Contiene Gln26-Asn173. |
| Peso molecolare | La proteina ha un peso molecolare previsto di 13,7 kDa. A causa della glicosilazione, la proteina migra a 30-40 kDa in base al risultato Tris-Bis PAGE. |
| Aspetto fisico | Polvere liofilizzata (congelata) bianca, filtrata sterile. |
| Purezza | > 95% come determinato da SDS-PAGE |
| Attività | SPR Dati：Il Fas umano, il tag His immobilizzato sul chip CM5 può legare il ligando Fas umano, il tag His, con una costante di affinità di 19,45 nM, come determinato nel test SPR. |
| Endotossina | < 1.0 Unione Europea per 1μg di IL proteina di IL Metodo LAL. |
| Formulazione | Liofilizzato da 0,22 Soluzione filtrata a μm in PBS (pH 7,4). Normalmente Prima della liofilizzazione viene aggiunto il 5% di trealosio come agente protettivo. |
| Ricostituzione | Centrifugare le provette prima dell'apertura. Ricostituire a una concentrazione superiore a 100 μg/mL è consigliato (di solito si usa 1 mg/ml soluzione per liofilizzazione). Sciogliere la proteina liofilizzata in acqua distillata. |
Magazzinaggio
Trasportato con impacchi di ghiaccio. Conservare a -20℃ a -80℃, valido per un anno.
Dopo la ricostituzione, conservare chiuso a -20/-80°C per 3-6 mesi. Dopo la ricostituzione, conservare a 2/8°C per 2/7 giorni..
Si consiglia di conservare in aliquote e di congelare per il primo utilizzo, per evitare ripetuti congelamenti e scongelamenti.
Nota
1. Evitare ripetuti congelamenti e scongelamenti.
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