アゾキシメタン（AOM）とデキストラン硫酸ナトリウム（DSS、大腸炎グレード）誘発大腸炎関連癌モデルの確立

大腸炎関連癌（CAC）は世界で3番目に多い悪性腫瘍であり、罹患率と死亡率は胃癌と肝臓癌に次いで2番目に高い[1] 。炎症性腸疾患（IBD）は大腸癌を発症する可能性を高める可能性があります。AOMとDSSの組み合わせは、再現性、効力、低コスト、使いやすさから人気が高まっています。この記事では、CACの腫瘍形成を研究するためのDSS-AOMモデル作成プロトコルについて説明します。

動物モデル

BALB/cマウス（7週齢、オス）

材料

DSS（イェーセン#60316ES、MW36000-50000）、AOM（イェーセン#60751ES）

溶液の準備

DSS 添加飲料水:滅菌水を使用して 1 ～ 3% DSS 溶液を調製します。使用するまで 4 °C で保管します。

AOM 溶液: AOM を WFI に溶解して 10 mg/mL のストック溶液を作成します。小分けして -20 °C で凍結します。凍結融解を繰り返さないでください。使用当日に小分けして解凍し、滅菌生理食塩水で 1/10 に希釈します。

プロトコル

  • 1 日目に、マウスの体重を測定し、マークを付けます。マウスの腹腔内に 10 mg/kg の AOM 溶液を注射します。
  • マウスケージの飲用水タンクに水を入れます。マウス 1 匹あたり 1 日 7 ～ 10 mL の水を計算します。給餌は 1 週間です。
  • 飲料水を 2.5% DSS に 1 週​​間置き換えます。
  • 2週間、通常の飲料水を与えてください。
  • 手順3～4を3回繰り返します。

図1. AOM/DSS大腸癌モデリングプロトコル

成功したCACモデルの結果

DSS治療による減量

図2. マウスの体重の変化

2、下痢スコアと出血スコア

図3. 下痢スコアと出血スコア

3、マウス結腸における腫瘍形成

図4. 代表的な大腸全体と大腸がんの数

図5. 急性大腸炎およびアゾキシメタン（AOM）/ DSS誘発大腸癌マウスモデルにおけるCOX-2、IL-6、β-カテニン、およびsnailのタンパク質発現（A）結腸切片をH＆Eおよび示された抗体で染色した（B）各群のマウス2匹から結腸組織を溶解した後、示された抗体を用いたウェスタンブロットによりタンパク質発現を調べた。β-チューブリンはローディングコントロールとして使用した[2] 。

このリソースへのリンク

[1]Qun Wang、et al.ベニバナ多糖類はマクロファージ分極の制御を介してAOM / DSS誘発マウス大腸がんを抑制する[J].Frontiers in Pharmacology.2021.761641

[2]Jia-Rong Huang、et al.Piperlongumineはマウス大腸炎および大腸炎関連大腸癌を軽減する[J].Frontiers in Pharmacology.2020.586885

Yeasen DSS によるモデリングの成功事例

Yeasenは高品質のDSS（Cat#60316ES）を提供しています：純度（98％）、硫黄含有量17〜19％、遊離硫黄 多数の文献データによって裏付けられている0.2% 未満。

表1 DSSによる様々なタイプの腸炎モデルの構築

モデル

モデリングサンプル

モデリング計画

モデリング結果

使用評価

急性大腸炎

BALB/cマウス、メス、6～8週、25g

3%-5% DSSを7日間連続で自由に飲む

5日目に現れ、結腸の長さが短くなり、HE染色で炎症が明らかになった

成形速度が速く、時間が短い。急性大腸炎モデルの特性と一致している。

C57BL/6マウス、雄、8週、20g

経口投与による3%-5% DSS、継続投与

5日目に、結腸の短縮、体重減少、便中の血、下痢が起こります。

高いカビ率と短い持続期間。急性大腸炎モデルの特徴と一致している

慢性大腸炎

C57BL/6 マウス、オス、8 週、22 g

経口投与による1～2％DSS、持続投与

40日目、結腸短縮、体重減少、便に血が混じる、下痢

高い成形率。慢性大腸炎モデルの特性と一致している。

大腸がん

C57BL/6 マウス、オス、8 週、21 g

1%-2% DSSを3週間にわたり5日間自由に摂取

14週目、結腸の長さが短くなり、体重が減少し、HE染色が見られ、明らかな炎症がみられました。

高い成形率。大腸癌モデルの特性と一致している。

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製品名​​

記事番号​​

仕様

デキストラン硫酸ナトリウム塩（DSS）、大腸炎グレードMW：36000〜50000

60316ES25/60/76/80

25g/100g/500g/1kg

アゾキシメタン (AOM)

60751ES03/08/10

1mg/5mg/10mg

MolPure ®便DNAキット

18820ES08/50/70

5T/50T/200T

MolPure ® Mag48 土壌/便 DNA キット FA

18528ES48

48 トン

MolPure ® Mag 土壌/便 DNA キット

18526ES20/50/70

20T/50T/200T

ヘマトキシリン・エオシン染色キット

60524ES60

2×100mL

尿便潜血検査キット

60403ES60

100T

アルシアンブルー過ヨウ素酸シッフ（AB-PAS）染色液

60534ES50/60

6×50mL/6×100mL/

当社の試薬を使用した論文

  1. Zhong D、Jin K、Wang R、他「炎症性腸疾患とそれに伴う不安とうつ病に対する微細藻類ベースのハイドロゲル」Adv Mater. 2024年1月26日:e2312275. doi: 10.1002/adma.202312275. IF=29.4
  2. Zhang Y、Tu S、Ji X、Wu J、Meng J、Gao J、Shao X、Shi S、Wang G、Qiu J、Zhang Z、Hua C、Zhang Z、Chen S、Zhang L、Zhu SJ。Dubosiella newyorkensisは、L-リジン活性化AhR-IDO1-Kyn経路を介して大腸炎の免疫寛容を調節します。Nat Commun。2024年2月13日;15(1):1333。doi：10.1038/s41467-024-45636-x。 IF=16.6
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  5. Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. 腸内常在菌由来の吉草酸は放射線障害から保護する。腸内微生物、2020 .1–18。IF =10.245
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  11. Jia-Rong Huang、Sheng-Te Wang、Meng-Ning Wei、et al.Piperlongumineはマウス大腸炎および大腸炎関連大腸がんを軽減する[J]。Frontiers in Pharmacology.2020.586885. IF=7.561
  12. Gao X、Fan W、Tan L、et al。大豆イソフラボンはERα/NLRP3インフラマソーム経路を標的にして実験的大腸炎を改善する[J]。栄養生化学ジャーナル、2020年、83。IF =6.048
  13. Lujuan Xing、Lijuan Fu、Songmin Cao、et al.LPS誘導RAW264.7マクロファージ細胞およびデキストラン硫酸ナトリウム誘導C57BL/6マウスにおけるウシ骨ゼラチン由来ペプチドの抗炎症効果[J]。Nutrients 2022、14、1479。IF =5.717
  14. Wang S、Huang J、Tan KS、et al。イソステビオールナトリウムは、代謝プロファイリング、マクロファージ分極、およびNF-B経路の調節を介してデキストラン硫酸ナトリウム誘発性慢性大腸炎を軽減する[J]。酸化医学と細胞長寿命。2022、4636618。 IF=5.076

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