血管新生は、創傷治癒、炎症、関節リウマチ、糖尿病性網膜症、黄斑変性、腫瘍増殖と密接に関連しています。生物の成長中、血管新生は新しい組織の成長の重要な部分です。成人期には、特別な臓器で厳密に制御されている定期的なイベントを除いて、血管新生促進性および血管新生阻害性の内因性因子のバランスにより、ほぼすべての正常組織で生理的な血管新生が大量に欠如しています。血管新生を促進する方向にバランスが崩れると、微小血管内皮細胞 (EC) は血管新生表現型にシフトし、それによって血管新生反応が開始され、排除または加速される可能性があります。
この研究では、従来の生体内血管新生実験方法には、角膜マイクロポケット、腸間膜、スポンジ/マトリックスインプラント、ディスク分析（DAS）、ゼブラフィッシュなどが含まれます。ただし、これらの実験は技術的に要求が厳しく、コストと時間がかかるだけでなく、倫理的な問題も伴います。生体内血管新生実験と比較して、特別なマトリックスを使用してin vitroで細胞血管新生を維持する方が経済的で実用的です。最も一般的に使用される細胞成長維持マトリックスは、EHSマウス腫瘍から抽出された可溶性基底膜調製物であるマトリックスゲルです。
マトリックスゲルの主成分はラミニン、IV型コラーゲン、ヘパラン硫酸プロテオグリカン（HSPG）、ネスチンで、EHS腫瘍に含まれるTGF-β、EGF、IGF、FGF、組織プラスミノーゲン活性化因子などの成長因子も含まれています。組織や細胞に支持、引張強度、足場支持を提供し、細胞接着や移動のための3次元下部構造、成長因子、ケモカイン、サイトカインの貯蔵庫としても機能します。また、細胞の形態形成や分化のシグナルとしても機能します。
製品の特徴
高い安全性： LDEV（乳酸脱水素酵素増強ウイルス）フリー
濃度の多様性:濃度範囲8~20 mg/mL
優れたバッチ安定性：バッチ間の安定したパフォーマンスを確保するための厳格な生産および品質管理プロセス
低エンドトキシン：エンドトキシン含有量≤4 EU/mL
汚染物質の検出: マイコプラズマ、細菌、真菌の残留物は検出されませんでした。
血管新生実験
- マトリックスゲルの調製
1) 実験の 1 日前に、Ceturegel TMマトリックス ゲルを冷凍庫から取り出し、冷蔵庫で 4°C で一晩置いて溶かし、使用する消耗品を事前に冷却します。
2)実験前には必ずCeturegel TMマトリックス ゲルをアイスボックスに入れてください。
3) 血管新生スライドの滅菌パッケージを開け、スライドを取り出します。
4) Ceturegel TMマトリックス ゲルを各ウェルに 10 μl 加えます。Ceturegel TMマトリックス ゲルを加えるときは、ガンの先端が内側のウェルの上部に対して垂直になるように注意し、マトリックス ゲルが上部のウェルから流れ出てゲルが残らないようにします。
- ゲル
1) まず、スライドに蓋をして、10cmのペトリ皿に水に浸したペーパータオルを敷いてウェットボックスを作ります。
2) スライドをペトリ皿に置き、蓋をします。
3) ペトリ皿全体を CO2 インキュベーターに入れ、細胞懸濁液を準備しながらゲルが凝縮するのを待つために約 30 分間放置します。
- 細胞の拡散
1) 消化した細胞を2×10 5細胞/mlの密度の細胞懸濁液に調製し、よく混ぜます。
2) ゲル状に固まった血管が入った血管スライドを取り除きます。
3) ガンの先端が上部のウェルの上部に対して垂直になるようにし、下部のウェルのゲルに触れないように注意しながら、各ウェルに 50μl の細胞懸濁液を加えます。
4) 細胞培養培地を加え、蓋をして放置します。しばらくすると、すべての細胞が沈み、マトリックスゲルの表面に落ちます。
- 画像取得
細胞の成長速度に応じて定期的に観察し、写真を撮り、画像を保存します。
- 結果の発表
注記：血管新生と蛍光の結果
製品の推奨
|
シュードラル酸 |
アイテム番号 |
ノルム |
|
40183ES08/10 |
5/10mL |
|
|
40184ES08/10 |
5/10mL |
|
|
40185ES08/10 |
5/10mL |
|
|
40186ES08/10 |
5/10mL |
|
|
40187ES08/10 |
5/10mL |
|
|
40188ES08/10 |
5/10mL |
|
|
40190ES08/10 |
5/10mL |
|
|
40191ES08/10 |
5/10mL |