5月初旬に英国で初めてサル痘の確認例が報告され、その後、非流行国・地域でも急速に流行が広がり、2022年9月21日現在、世界106カ国・地域で確認され、症例数は計63,117例に上る。9月16日には重慶で中国本土初の輸入症例が確認され、社会的な関心が高まった。

図1. 2022年サル痘流行世界地図（CDCより）

1. サル痘とは何ですか?
2. サル痘の歴史
3. どのように広がるか
4. 兆候と症状
5. 検出方法
6. 製品のマッチング
7. 製品の注文

1. サル痘とは何ですか?

サル痘ウイルスは、全長約197kbの二本鎖DNAウイルスで、ポックスウイルス科オルトポックスウイルス属に属します。サル痘ウイルスには2つの枝（西アフリカ枝とコンゴ盆地枝）があり、そのうち西アフリカ枝の症例致死率は約3.6％、コンゴ盆地枝の症例致死率は10.6％に達することがあります。2022年5月以降に非流行地域で発見されたサル痘症例のサンプルでは、​​配列解析により西アフリカ系統であることが示されました^[1] 。

図2. サル痘の写真（CCDCより提供）

2. サル痘の歴史

サル痘は、1958年に研究用に飼育されていたサルの群れで水痘のような病気が2回発生したときに発見されました。「サル痘」と名付けられているにもかかわらず、この病気の原因は不明のままです。しかし、アフリカのげっ歯類や非ヒト霊長類（サルなど）がウイルスを保有し、人に感染させる可能性があります^[2] 。
サル痘の最初のヒト症例は1970年に記録されました。2022年の発生以前には、中央アフリカと西アフリカのいくつかの国でサル痘が報告されていました。以前は、アフリカ以外の人々のサル痘症例のほぼすべては、病気が一般的に発生する国への国際旅行または輸入動物に関連していました。これらの症例は複数の大陸で発生しました^[2] 。

3. どのように広がるか

動物から人間へ、人間から人間へ、そして環境から人間へと感染する可能性があります。
サル痘は3つの経路でヒトに感染することが明らかになっています。1つは感染した動物からヒトへです。ウイルスは皮膚の傷、呼吸器、粘膜（目、鼻、口）から体内に入り込みます。2つ目は、性交、キス、抱擁、サル痘患者の体の部分に触れること、ウイルスに汚染された衣類、寝具、タオル、食器など、感染する可能性のある他の物品との接触など、人と人の間の密接な接触によって伝染します。3つ目は呼吸器からの飛沫感染です^[3] 。

4. 兆候と症状

主な臨床症状は発熱、発疹、リンパ節腫脹です。
初期段階で最も一般的な症状は、発熱、頭痛、筋肉痛、リンパ節の腫れなどです。発疹は発症後1〜3日で現れます。典型的な発疹は最初に顔に現れ、徐々に手足やその他の部位に広がります。発疹はほとんどが遠心性です。顔と手足の発疹は体幹よりも一般的であり、発疹は手のひらと足の裏に現れることがあり、発疹の数は数個から数千個までさまざまです。口腔粘膜、消化管、性器、結膜、角膜にも発生することがあります。
症状は通常14～21日間続き、通常は自然に治ります。かさぶたが剥がれた後も、紅斑や色素沈着、さらには瘢痕が残る場合があります。かさぶたが剥がれてその下に新しい皮膚層が形成されるまで、かさぶたは伝染性を維持することに注意してください^[3] 。

5. 検出方法

サル痘の流行を効果的に予防・抑制し、ウイルスの輸入と拡散を防ぐために、世界中のIVD企業が積極的に対応しています。IVD検出試薬製造原材料および試薬ソリューションのサプライヤーとして、YEASENはサル痘ウイルスの効率的な検出に役立つ完全なソリューションを提供しています。核酸抽出から試薬コンポーネント（酵素試薬および擬似ウイルス）、半完成キット（プライマープローブ、酵素試薬、プラスミドコントロール）まで、YEASENは安定的に供給できます。

図3. ウイルス検出方法

5.1 方法の利点

• 効率的で便利な操作 - すべてのコンポーネントを含むキットセットで、面倒な操作は不要で、ワンステップで追加できます。
• 高い検出感度 - 遺伝子組み換え抗体法ホットスタートTaq酵素、1コピー/反応も検出可能
• 試薬の安定性が強い - 37℃で1週間保存可能、凍結融解を繰り返しても安定した性能
• UDG 汚染防止 - エアロゾル汚染のリスクを効果的に防止するために、dUTP/UDG システムがシステムに追加されます。
• 複数のプラットフォームに適用可能 - Bio-Rad CFX96、ABI Q5、Slanに適しています

5.2 製品のマッチング

• 核酸抽出試薬: MolPure™ 磁気スワブウイルス DNA/RNA キット (カタログ番号 18300ES)
• サル痘検出試薬: サル痘ウイルスリアルタイムqPCRキット(カタログ番号13862ES/カタログ番号13863ES)
• モンキー痘疑似ウイルス: 猿痘ウイルス疑似ウイルス(カタログ番号 12099ES/カタログ番号 12100ES)

6. 推奨製品

6.1 サル痘ウイルスリアルタイムqPCRキット(カタログ番号13862ES)

製品の利点:
効率的で便利な操作
高い感度と優れた特異性
超安定性
優れた再現性

6.1.1 ケースショー:

• 37℃の超耐熱性

MPXVは、Cat#13862ESを37℃で7日間置いて増幅されました。結果は、Ct値と蛍光値は37℃で7日間放置しても大きな影響を受けず、熱安定性が強いことを示しました。

図4. Yeasen（Cat#13862ES）37℃加速7日間安定性検証

• 超凍結融解安定性

MPXVは、Cat#13862ESを-20℃でそれぞれ10回、20回、50回凍結・解凍することで増幅されました。結果は、-20℃で10回、20回、50回凍結・解凍してもCt値と蛍光値に大きな影響はなく、凍結・解凍安定性が強いことを示しました。

図5. Yeasen(Cat#13862ES)-20℃凍結融解安定性検証

• 超高感度、1コピー/μLも検出可能

Yeasenサル痘製品（カタログ番号13862ESES）を使用して、1000コピー/μL、100コピー/μL、10コピー/μL、1コピー/μL、および陰性ブランク（NTC）を使用してMPXVを検出しました。単一コピーも検出できることがわかり（Ct値は約38）、48ウェルNTCテストを繰り返し、ベースラインは安定し、NTCピークは陰性で、テーリング現象はなく、高感度と高特異性を示しました。

図6. MPXV感度検出

図7. MPXV特異性検出

• 試薬は安定しており、再現性があります

Yeasenサル痘検出キット（カタログ番号13862ESES）を選択し、低濃度、中濃度、高濃度の陽性サンプルに対して10回の繰り返しテストを実施しました。結果は、FAMチャネルの陽性サンプルのCVが2％以下であり、ブランクコントロールにピーキングやテーリング現象が見られなかったことを示しました。、良好な再現性。

図8. 再現性テスト

6.2 サル痘ウイルスリアルタイムqPCRキット（UDG Plus） （カタログ番号13863ES）

製品の利点:

⑴ 効率的で便利な操作
⑵ 高い感度と優れた特異性
⑶ 超安定性
⑷ 再現性が良い
⑸ UDG汚染防止

6.2.1 ケースショー:

• 37℃の超耐熱性

MPXVは、Cat#13863ESを37℃でそれぞれ7日間と14日間置いて増幅されました。結果は、37℃で7日間と14日間後、Ct値と蛍光値に大きな影響はなく、熱安定性が強いことを示しています。

図9. Yeasen(Cat#13863ES) 37℃加速試験7日間、14日間安定性検証

• 超凍結融解安定性

Cat#13863ESを-20℃で50回凍結融解してMPXVを増幅しました。結果は、-20℃で50回凍結融解してもCt値と蛍光値に大きな影響はなく、凍結融解安定性が強いことを示しました。

図10. Yeasen(Cat#13863ES) -20℃凍結融解安定性検証

• 高い感度と特異性

Yeasenサル痘製品（カタログ番号13863ESES）を使用して、5コピー/μLのMPXVと陰性ブランク（NTC）をテストしました。結果は、ベースラインが安定しており、FAMの検出率が100％、最小検出限界が5コピー/μLであり、NTCの48ウェル繰り返しテスト中に、FAMとVICチャネルのベースラインが安定しており、NTC陰性ピークにテーリング現象がなく、高感度と高特異性を示しました。

図11.MPXV感度検出

     

図12. MPXV特異性検出

• 試薬の直線性が良好

陽性テンプレートを1×105コピー/μLの濃度から10倍に希釈し、Yeasen qPCRサル痘キット（Cat#13863ES）を使用して2回繰り返し検出しました。横軸は初期コピー数の対数、縦軸はCt値です。標準曲線を作成し、その結果、サル痘遺伝子のFAMチャネルの線形範囲は10～1×105コピー/μLで、R2>0.99であり、良好な線形関係があることが示されました。

図13. 直線性テスト

• 安定性と再現性のある試薬

Yeasen qPCR サル痘キット (Cat#13863ES) を選択し、低、中、高濃度の陽性サンプルについて 10 回の繰り返しテスト、および陰性対照 (NC) とブランク対照 (NTC) について 20 回の繰り返しテストを実行しました。結果は、FAM チャネル陽性サンプルの CV が 3% 未満であり、陰性対照とブランク対照にはピーキングとテーリング現象が見られなかったこと、VIC チャネル NC の Ct 値がすべて 35 未満であり、CV が 0.3% 未満であり、NTC にはピーキングとテーリング現象が見られなかったこと、再現性が良好であることを示しています。

図14. 再現性テスト(FAM)

   

図15. 再現性テスト(VIC)

7. 製品の注文

2014年に設立されたYeasen Biotechnology（上海）Co., Ltd.は、ツール酵素原料と抗原抗体の研究開発と生産に従事するハイテク企業です。その製品には、医薬品、食品安全検査、育種、司法などの業界で使用される分子診断酵素、タンパク質、抗体が含まれます。私たちは、生命科学分野の顧客に高品質の製品とサービスを提供することに尽力しています。サル痘ウイルスの製品購入ガイドラインは次のとおりです。

表1. 関連製品

参考文献

[1] 中国疾病予防管理センター：サル痘の健康のヒント
[2] CDC:サル痘について | サル痘 | 痘ウイルス | CDC
[3] 楡林晩報：中国本土初のサル痘症例の発生源が特定された！広西疾病管理緊急注意喚起