Hifair ™マルチプレックスワンステップRT-qPCRプローブキット（ UDG Plusは、RNA をテンプレートとするマルチプレックス定量 PCR キットです。実験の過程で、逆転写と定量 PCR を同じチューブ内で実行することで、実験操作が簡素化され、汚染のリスクが軽減されました。

このキットでは、耐熱性Hifair ^TM V逆転写酵素によって第一鎖cDNAが効率的に合成され、UNICON ™ HotStart Taq DNAポリメラーゼによって定量的に増幅されます。キットには主に、最適化されたMPバッファー、酵素ミックスなどが含まれています。バッファー溶液にはすでにMg ²⁺とdNTPが含まれています。さらに、非特異的PCR増幅を効果的に抑制し、複数のqPCR反応の増幅効率を向上させる因子が追加されており、増幅効率を確保し、最大複数の増幅反応を実行できます。dUTP / UDGシステムが追加され、エアロゾル汚染のリスクを効果的に防止します。

特徴

1. 優れた汎用性:病原微生物、ヒトゲノム、植物、その他の種の核酸のqPCR増幅および検出に適しています。

2. 高感度:慎重に最適化されたバッファー システムにより、最大 250 コピー/mL の低濃度テンプレートの検出感度が向上します。

3. dUP/UDG システム: dUTP/熱不安定性 UDG 汚染防止システムを導入し、製品のエアロゾル汚染を効率的に分解し、偽陽性を減らし、正確な結果を保証します。

4. 高速プログラムをサポート: 高速 40 分プログラムと互換性があります。

5. 優れた安定性： 37℃で14日間安定、凍結融解を10回繰り返しても安定。

コンポーネント

注: 1 ) 5 ×Hifair ^TM MP バッファー の略語です Hifair ^TM V マルチプレックス ワンステップ RT-qPCR プローブ バッファーには、 dNTP、dUTP、Mg ²⁺ 、安定剤、エンハンサーなどが含まれています。

2) Hifair 酵素ミックスには、主に耐熱性 Hifair ^TM V 逆転写酵素、UNICON ^TM HotStart Taq DNA ポリメラーゼ、 UDGase が含まれています。

3) GC エンハンサーはオプションです。GC エンハンサーの無料バージョンについては、カタログ番号: 16901ES をご覧ください。

4) 16630-A および 16630-B は、それぞれ 16901-A および 16901-B と同等です。

仕様

ストレージ

彼は 製品 すべき なれ 保存された で -25℃〜-15℃ のために 1 年。

数字

図1. 高い検出率

説明書

1.反応組成

注意：使用前に必ずよく混ぜ、激しい振動による過度の泡立ちを避けてください。

a) プライマー濃度:プライマー マルチプレックスプライマーを含むミックスの場合、状況に応じて最適なプライマー濃度は 0.1 ～ 1.0 μM になります。

b) プローブ濃度: 異なる蛍光基を標識したマルチプレックスプローブを含むプローブミックス。状況に応じて、最適なプローブ濃度は 0.05 ～ 0.5 μM になります。

c) テンプレートの希釈: qPCR は非常に感度が高いため、テンプレートを希釈することをお勧めします。コントロール Ct 値は 20 ～ 35 が適切です。

d)システムの準備: フィルターエレメント付きのヘッドを外します。相互汚染とエアロゾル汚染を避けてください。

2.最適化されたサイクリングプロトコル

注： a)逆転写：温度は42 ℃または50 ℃で10〜15分選択できます。

b) 増幅反応：設計されたプライマーのTm値に応じて温度を調整します。

c)蛍光信号の取得：機器マニュアルの要件に従って実験手順を設定してください。