아조시메탄(AOM) 및 덱스트란 황산나트륨(DSS, 대장염 등급) 유도 대장염 관련 암 모델 확립

대장염 관련 암(CAC)은 전 세계에서 세 번째로 흔한 악성 종양으로, 이환율과 사망률은 위암과 간암에 이어 두 번째입니다 [1] . 염증성 장 질환(IBD)은 대장암 발병 가능성을 높일 수 있습니다. AOM과 DSS의 조합은 재현성, 효능, 저렴한 비용 및 사용 용이성으로 인해 인기를 얻고 있습니다. 이 기사에서는 CAC의 종양 발생을 연구하기 위한 DSS-AOM 모델 생성 프로토콜을 강조합니다.

동물 모델

BALB/c 마우스(7주령, 수컷)

재료

DSS(예센#60316ES, MW36000-50000)、AOM(예센#60751ES)

솔루션 준비

DSS가 보충된 음용수: 멸균수를 사용하여 1-3% DSS 용액을 준비하세요. 사용하기 전까지 4°C에서 보관하세요.

AOM 용액: AOM을 WFI에 녹여 10 mg/mL 스톡 용액을 얻습니다. 분주하여 -20 °C에서 동결합니다. 동결-해동 주기를 반복하지 마십시오. 사용 당일 분주물을 해동하고 멸균 식염수로 1/10 희석합니다.

규약

  • 1일차에 쥐의 무게를 재고 표시를 합니다. 10 mg/kg AOM 용액을 쥐의 복강내 주사합니다.
  • 마우스 케이지의 음수 공급을 물로 채웁니다. 하루에 마우스 한 마리당 7-10ml의 물을 계산합니다. 1주일 동안 먹이를 줍니다.
  • 1주일 동안 음용수를 2.5% DSS로 대체하십시오.
  • 2주 동안 일반 식수를 공급하세요.
  • 3~4단계를 3번 반복합니다.

그림 1. AOM/DSS 대장암 모델링 프로토콜

성공적인 CAC 모델의 결과

DSS 치료를 통한 체중 감량

그림 2. 생쥐의 체중 변화

2、설사점수 및 출혈점수

그림 3. 설사 점수 및 출혈 점수

3、마우스 대장의 종양 형성

그림 4. 대표적인 전체 대장과 대장암의 수

그림 5. 급성 대장염 및 아조시메탄(AOM)/DSS 유도 대장암 마우스 모델에서 COX-2, IL-6, β-catenin 및 snail의 단백질 발현 (A) 대장 절편은 H&E 및 표시된 항체로 염색되었습니다. (B) 각 군의 두 마리 마우스에서 대장 조직을 용해한 후 표시된 항체로 Western blot을 통해 단백질 발현을 검사했으며 β-tubulin을 로딩 대조군으로 사용했습니다 [2] .

이 리소스에 대한 링크

[1] Qun Wang, et al. 홍화 다당류는 대식세포 분극 조절을 통해 AOM/DSS로 유발된 마우스 대장암을 억제합니다[J]. Frontiers in Pharmacology.2021.761641

[2]Jia-Rong Huang, et al.Piperlongumine은 마우스 대장염 및 대장염 관련 대장직장암을 완화합니다[J].Frontiers in Pharmacology.2020.586885

Yeasen DSS를 사용한 모델링의 성공 사례

Yeasen은 고품질 DSS(Cat#60316ES)를 제공합니다: 순도(98%), 유황 함량 17-19%, 자유 유황 <0.2%, 다수의 문헌 자료에 의해 뒷받침됨.

표 1 DSS를 이용한 다양한 유형의 장염 모델 구축

모델

모델링 샘플

모델링 계획

모델링 결과

평가를 사용하세요

급성 대장염

BALB/c 마우스, 암컷, 6-8주, 25g

3%-5% DSS를 7일 연속 자유롭게 음용

5일차에 접어들면서 대장의 길이가 짧아지고 HE 염색이 나타나며 염증이 뚜렷하게 나타났다.

성형속도가 빠르고 시간이 짧습니다. 급성대장염모델의 특성과 일치합니다.

C57BL/6 마우스, 수컷, 8주, 20g

3%-5% DSS를 경구투여, 지속투여

5일차 발생, 대장 단축, 체중 감소, 대변에 혈액, 설사

높은 곰팡이 발생률과 짧은 지속 시간. 급성 대장염 모델의 특성과 일치

만성 대장염

C57BL/6 마우스, 수컷, 8주, 22g

1-2% DSS를 경구투여, 지속투여

Day40 발생, 대장 단축, 체중 감소, 대변에 혈액, 설사

높은 성형율. 만성대장염 모델의 특성과 일치

대장암

C57BL/6 마우스, 수컷, 8주, 21g

3주 동안 5일 동안 1%-2% DSS를 자유롭게 섭취

대장 길이가 단축되고 체중이 감소하고 HE 염색이 나타나고 염증이 뚜렷해진 14주

높은 성형율. 대장암 모델 특성과 일치

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제품명​​​

기사 번호​​

사양

덱스트란 황산나트륨염(DSS), 대장염 등급 MW:36000~50000

60316ES25/60/76/80

25g/100g/500g/1kg

아조시메탄(AOM)

60751ES03/08/10

1mg/5mg/10mg

MolPure ® 대변 DNA 키트

18820ES08/50/70

5톤/50톤/200톤

MolPure ® Mag48 토양/대변 DNA 키트 FA

18528ES48

48 티

MolPure ® Mag 토양/대변 DNA 키트

18526ES20/50/70

20톤/50톤/200톤

헤마톡실린 및 에오신 염색 키트

60524ES60

2×100ml

소변 대변 잠혈 검사 키트

60403ES60

100톤

알시안 블루 주기산-쉬프(AB-PAS) 염색 용액

60534ES50/60

6×50ml/6×100ml/

우리 시약으로 출판된 기사

  1. Zhong D, Jin K, Wang R, et al. 염증성 장 질환 및 이와 관련된 불안과 우울증에 대한 미세조류 기반 하이드로젤. Adv Mater. 2024년 1월 26일:e2312275. doi: 10.1002/adma.202312275. IF=29.4
  2. Zhang Y, Tu S, Ji X, Wu J, Meng J, Gao J, Shao X, Shi S, Wang G, Qiu J, Zhang Z, Hua C, Zhang Z, Chen S, Zhang L, Zhu SJ. Dubosiella newyorkensis는 L-lysine-activated AhR-IDO1-Kyn 경로를 통해 대장염에서 면역 내성을 조절합니다. Nat Commun. 2024년 2월 13일;15(1):1333. doi: 10.1038/s41467-024-45636-x. 만약 = 16.6
  3. Li Zhao, Fei Wang, Zhengwei Cai, et al. 궤양성 대장염 치료를 위한 주입형 점막 접착 하이드로젤을 이용한 약물 활용 플랫폼 개선[J]. 화학공학 저널. 424(2021)130464. IF=16.744
  4. Lingjun Tong, Haining Hao, Zhe Zhang, et al. 우유 유래 세포외 소포는 장 면역을 조절하고 장내 미생물 군집을 재형성하여 궤양성 대장염을 완화합니다[J].Theranostics.2021; 11(17): 8570-8586 IF=11.556
  5. Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. 장내 공생체 유래 발레르산은 방사선 손상으로부터 보호합니다. Gut Microbes,.2020.1–18. IF=10.245
  6. Jingjing Gan, Yuxiao Liu, Lingyu Sun, et al. 염증성 장 질환 치료를 위한 미세유체학으로부터 경구 투여되는 뉴클레오티드 전달 입자[J]. Applied Materials Today. 2021년 12월; 25:101231 IF=10.041
  7. Mengmeng Xu, Ying Kong, Nannan Chen, et al. 활성 궤양성 대장염에서 면역 관련 유전자 시그니처 식별 및 CeRNA 네트워크 예측[J]. Frontiers in Immunology. 2022; 13: 855645. IF=7.561
  8. JialiDong, YuanLi, HuiwenXiao, et al. 구강 미생물군은 마우스 모델에서 대장암 방사선 치료의 효능 및 예후에 영향을 미칩니다[J]. Cell reports. 2021, 109886. IF=9.423
  9. Hao H, Zhang X, Tong L, Liu Q, et al.Lactobacillus plantarumQ7에서 유래한 세포외소포가 마우스의 장내 미생물군과 궤양성 대장염에 미치는 영향[J].Frontiers in Immunology.2021.777147 .IF =7.561
  10. Yaohua Fan, Yanqun Fan, Kunfeng Liu, et al. 식용 새 둥지는 Th17/Treg 세포 균형을 회복하여 C57BL/6J 마우스에서 덱스트란 황산나트륨으로 유발된 궤양성 대장염을 개선합니다[J]. 약리학의 최전선. 2021.632602. IF=7.561
  11. Jia-Rong Huang, Sheng-Te Wang, Meng-Ning Wei, et al.Piperlongumine은 마우스 대장염 및 대장염 관련 대장직장암을 완화합니다[J].Frontiers in Pharmacology.2020.586885. IF=7.561
  12. Gao X, Fan W, Tan L, et al. 대두 이소플라본은 ERα/NLRP3 인플라마좀 경로를 표적으로 삼아 실험적 대장염을 개선합니다[J]. 영양생화학 저널, 2020, 83. IF=6.048
  13. Lujuan Xing, Lijuan Fu, Songmin Cao, et al. LPS 유도 RAW264.7 대식세포와 덱스트란 황산나트륨 유도 C57BL/6 마우스에서 소 뼈 젤라틴 유래 펩타이드의 항염 효과[J]. Nutrients 2022, 14, 1479. IF=5.717
  14. Wang S, Huang J, Tan KS 외.Isosteviol Sodium은 대사 프로파일링, 대식세포 분극 및 NF-B 경로 조절을 통해 덱스트란 황산나트륨으로 유발된 만성 대장염을 개선합니다[J].산화 의학 및 세포 장수. 2022, 4636618. 만약 = 5.076

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