세포 배양은 약물 개발에서 유전자 치료에 이르기까지 많은 연구 응용 분야의 초석입니다. 그러나 올바른 접근 방식과 도구 없이는 건강하고 증식하는 배양을 유지하는 것이 어려울 수 있습니다. 노련한 과학자이든 세포 배양을 처음 접하는 사람이든 프로세스의 모든 단계를 최적화하면 큰 차이를 만들 수 있습니다. 이 가이드에서는 소화에서 오염 방지에 이르기까지 세포 배양이 번창하도록 하는 데 필요한 5가지 필수 팁을 안내해 드리겠습니다.
1. 세포 소화를 완벽하게 하기
세포 소화는 세포 배양 실험에서 중요한 단계로, 세포를 배양 표면에서 분리하고, 세포 현탁액으로 분리하여 계대 배양 및 후속 분석을 용이하게 합니다. 적절한 소화 효소를 선택하면 세포 분리 효율을 높이고, 세포 손상을 줄이며, 원활한 실험 진행을 보장할 수 있습니다. 필요에 가장 적합한 소화 효소를 선택할 수 있도록, 일반적으로 사용되는 효소 제품과 그 특성에 대한 가이드를 편집했습니다. 세포 유형, 실험 요구 사항 및 다운스트림 애플리케이션에 따라 가장 적합한 제품을 선택할 수 있습니다.
일반적인 소화 효소
- 트립신(세포 간 단백질 가수분해에 사용됨)
- 재조합 트립신(동물 유래 오염 없음, 생물제약 응용 분야에 적합)
- 콜라게나제(콜라겐 섬유를 분해하는 데 사용되며 조직 소화에 이상적임)
- 복합 트립신(세포 표면 항원을 더 잘 보존하는 Accutase 등)
- 트립신 대체제(혈청이 없는 세포 배양에 적합한 TrypLE™ 등)
- 디스파제 II(다양한 조직 및 세포를 분리하기 위한)
각 효소는 고유한 응용 분야와 장점을 가지고 있으며, 올바른 효소를 선택하면 실험 효율성과 결과의 질을 크게 향상시킬 수 있습니다.
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제품 이름 |
고양이 번호 |
사양 |
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PerfCel ™ l 트립신-EDTA(0.25%), 페놀 레드 없음 |
40123ES60 |
100ml |
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PerfCell ™ 트립신-EDTA 없음(0.25%), 페놀 레드 없음 |
40124ES60 |
100ml |
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PerfCell ™ 트립신(0.25%), 페놀 레드 |
40126ES60 |
100ml |
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PerfCell ™ 트립신-EDTA(0.25%), 페놀 레드 |
40127ES60 |
100ml |
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트립신 1:250(분말) |
40101ES25 |
25g |
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PerfCell ™ 재조합 트립신 ( 파우더 ) |
40512ES10/60 |
10mg/100mg |
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20416ES60 |
100μg |
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PerfCel Tryzyme™ 익스프레스 효소(1X), 페놀 레드 |
40134ES60 |
100ml |
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PerfCel Tryzyme™ 익스프레스 효소(1X), 페놀 레드 없음 |
40135ES60 |
100ml |
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ACCUTASE 세포 분리 솔루션 |
40506ES60 |
100ml |
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디스파세 2 |
40104ES60/80 |
100mg/1g |
2. 이상적인 배양 환경 조성
건강한 배양은 적절한 환경에서 시작됩니다. 여기에는 적절한 온도, pH 및 세포 유형에 맞는 최적의 배지가 포함됩니다.
혈청 무첨가 세포 배양은 반복성, 일관성 및 윤리적 기준을 보장하는 생물학 연구의 핵심 기술로 부상했습니다. 전통적인 세포 배양은 태아 소 혈청(FBS)에 의존하는데, 이는 실험 결과의 다양성과 동물 유래의 윤리적 위험을 초래합니다. 이러한 과제를 해결하기 위해 많은 연구자들이 점점 더 혈청 무첨가 배양 배지를 선택하고 있습니다.
면역학 연구에서 림프구 배양 특히 면역 반응, 백신 개발 및 암 면역 요법 분야에서 중요한 역할을 합니다. 면역 체계의 중심 구성 요소인 림프구는 시험관 내에서 증식하고 활성화되기 위해 특정 배양 조건이 필요합니다.
게다가, 오르가노이드 배양 세포 배양 기술의 또 다른 중요한 발전을 나타냅니다. 오르가노이드는 인체 조직과 장기 기능을 체외에서 시뮬레이션할 수 있는 3차원 세포 구조로, 질병 모델링, 약물 스크리닝 및 재생 의학을 위한 새로운 연구 플랫폼을 제공합니다. 오르가노이드의 3차원 구조는 인체 장기의 복잡성과 생리적 기능을 더 잘 재현하며 장기 발달, 질병 메커니즘 및 치료 반응을 연구하는 데 중요한 도구가 되었습니다.
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제품 이름 |
고양이 번호 |
사양 |
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CelCulSF™ 곤충세포 배양배지 ( 혈청 무첨가 ) |
40140ES |
1000ml(1000ml) |
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CelCulSF™ 293 세포 배양 배지 ( 혈청 무첨가 ) |
40141ES |
1000ml(1000ml) |
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CelCulSF™ 림프구 배양 배지 ( 혈청 무첨가 ) |
40142ES |
1000ml(1000ml) |
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CelCulSF™ 하이브리도마 세포 배양 배지 ( 혈청 무첨가 ) |
40143ES |
1000ml(1000ml) |
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CelCulSF 중간엽줄기세포 ( MSC ) 배양배지 ( 혈청 무첨가 ) |
40144ES |
500ml (500ml) |
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CelCulSF™ 부착 세포 배양 배지 ( 혈청 감소 ) |
40145ES |
1000ml(1000ml) |
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Cebrary® 장내 기관체 성장 배지(마우스) |
41426ES60/76 |
100/500ml |
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Cebrary® 장암 오르가노이드 성장 배지(인간) |
41427ES50/60/76 |
50/100/500ml |
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Cebrary® 위암 오르가노이드 성장 배지(인간) |
41428ES50/60/76 |
50/100/500ml |
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Cebrary® 간암 오르가노이드 성장 배지(인간) |
41429ES50/60/76 |
50/100/500ml |
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Cebrary® 유방암 오르가노이드 성장 배지(인간) |
41430ES50/60/76 |
50/100/500ml |
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Cebrary® 폐암 오르가노이드 성장 배지(인간) |
41431ES50/60/76 |
50/100/500ml |
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Cebrary® 식도암 오르가노이드 성장 배지(인간) |
41432ES50/60/76 |
50/100/500ml |
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Cebrary® 난소암 오르가노이드 성장 배지(인간) |
41433ES50/60/76 |
50/100/500ml |
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Cebrary® 췌장암 오르가노이드 성장 배지(인간) |
41434ES50/60/76 |
50/100/500ml |
3. 고품질 유전자 발현을 위한 효율적인 형질 전환
세포 형질감염은 생물의학 연구에서 중요한 기술로, 유전자 발현, 침묵 또는 기능 연구를 위해 외인성 핵산(예: DNA, mRNA, siRNA 및 miRNA)을 세포에 도입할 수 있습니다. 다양한 세포 유형과 핵산을 사용하면 성공적인 실험을 위해 올바른 형질감염 시약을 선택하는 것이 필수적입니다.
리포좀, PEI 및 인산칼슘 기반 제형을 포함한 화학적 형질감염 시약은 각각 고유한 장점을 제공합니다.
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고양이 번호 |
제품 이름 |
핵산 |
애플리케이션 |
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40802ES |
DNA |
고성능 리포좀 형질감염 시약 |
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40804ES |
루이지애나 |
렌티바이러스 감염 능력을 향상시킵니다. |
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40806ES |
siRNA, miRNA, ASO |
높은 노크다운 효율을 가진 siRNA 및 miRNA 특이적 형질전환 시약입니다. |
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40808ES |
DNA, siRNA, miRNA |
다양한 세포 유형에서 DNA 및 RNA 형질감염을 수행할 수 있는 업그레이드된 리포좀 형질감염 시약으로, 형질감염이 어려운 세포에도 좋은 효과를 보입니다. |
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40809ES |
mRNA |
다양한 세포 유형에서 높은 형질감염 효율을 보이는 mRNA 특이적 형질감염 시약입니다. |
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40815ES |
DNA |
단백질 발현 및 바이러스 포장(분말 형태)에 폭넓게 적용 가능합니다. |
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40816ES |
DNA |
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40820ES |
DNA |
AAV 및 LV 바이러스 패키징에 대해 더 높은 수율을 달성할 수 있는 바이러스 패키징을 위한 전용 형질감염 시약 |
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40821ES |
DNA |
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40823ES |
DNA |
가장 높은 트랜스펙션 효율. 특히 현탁 배양에서 AAV를 생산하는 데 적합하여 더 높은 산출량을 산출합니다. |
4. 장기 사용을 위한 세포 냉동보관
세포 동결은 오염 방지, 실험적 일관성 유지, 운송 용이성, 세포 은행 구축 등의 목적을 위해 세포를 장기적으로 보존하는 데 중요한 기술입니다. 동결 중 주요 위험에는 얼음 결정 형성 및 용액 손상이 있습니다. 이러한 위험을 완화하려면 느린 동결 및 빠른 해동 프로토콜을 사용하는 것이 필수적입니다. 글리세롤 또는 디메틸 설폭사이드(DMSO)와 같은 냉동 보호제는 얼음 결정 형성 및 삼투 스트레스를 줄이는 데 일반적으로 사용됩니다.
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제품 이름 |
고양이 번호 |
사양 |
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포유류 세포 저장소 냉동 |
40128ES50 |
5×10ml(5×10ml) |
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포유류 세포 저장소 냉동 |
40128ES60 |
100ml |
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곤충세포 저장 냉동 |
40129ES50 |
5×10ml(5×10ml) |
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곤충세포 저장 냉동 |
40129ES60 |
100ml |
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혈청 무함유 세포 동결 매체 |
40151ES |
50ml/100ml |
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혈청 무첨가 세포 동결 배지(DMSO 무첨가) |
40152ES |
100ml |
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혈청 무함유 세포 동결 배지(줄기세포용) |
40153ES |
100ml |
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혈청 무첨가 세포 동결 배지(줄기세포용, DMSO 무첨가) |
40154ES |
100ml |
5. 건강한 배양을 위한 오염 방지
오염은 세포 배양에서 흔히 발생하는 문제로, 종종 손상된 결과와 낭비되는 연구 시간으로 이어집니다. 다양한 유형의 오염을 인식하는 것은 효과적인 예방 및 구제에 필수적입니다.
일반적인 세포 오염 물질
- 박테리아
- 진균류
- 마이코플라스마
- 원생 동물문
- 검은 반점
- 바이러스
- 종간
예방 조치에는 항생제 사용, 장비 정기 소독, 무균 기술 준수, 깨끗한 작업 공간 유지가 포함됩니다. 오염이 감지되면 일반적으로 드물거나 귀중한 경우가 아니면 영향을 받은 배양물을 폐기하는 것이 좋습니다. 그러한 경우 오염 물질을 제거하기 위한 조치를 취해야 합니다. 백업 세포주를 구축하거나 새로운 배양물을 확보하는 것이 좋습니다. 특정 상황에서는 특정 오염 물질을 표적으로 하는 특수 처리가 세포 배양을 복원하는 데 도움이 될 수 있습니다. 적절한 위생을 유지하고, 장비를 엄격히 분리하고, 무균 환경을 유지하는 것은 오염을 방지하고 세포 배양 실험의 성공을 보장하는 데 중요합니다.
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유형 |
제품 이름 |
고양이 번호 |
사양 |
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항균 |
페니실린-스트렙토마이신(100 × ), 세포배양에 적합 |
60162ES76 |
100ml |
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60230ES07/60 |
3.2/100g |
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젠타마이신 황산염 |
60214ES03/08/25 |
1/5/25g |
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메트로니다졸 |
60223ES25/60 |
25/100mg |
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항진균제 |
암포테리신 B |
60238ES01/03 |
100mg/1g |
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니스타틴 |
60219ES08 |
5g(5g) |
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60231ES03/08 |
1/5 밀리그램 |
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마이코플라스마 검출 |
40601ES10/20 |
10 / 20 분석 |
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40612ES25/60 |
25/100톤 |
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마이코플라스마 제거 |
MycAway ™ 스프레이(바로 사용 가능) |
40605ES02/03/08 |
1/2/10 × 500ml |
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40607ES03/08 |
1/5ml(1/5ml) |
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40608ES03/08 |
1/5ml(1/5ml) |
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40609ES60 |
100ml |
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40610ES60 |
100ml |
결론
세포 배양 프로세스를 최적화하는 것은 신뢰할 수 있고 재현 가능한 결과를 생성하는 데 중요합니다. 소화를 위한 올바른 효소 선택부터 오염 방지까지 워크플로의 각 단계가 중요합니다.
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