등온 핵산 증폭 기술은 다양한 증폭 원리에 따라 여러 유형으로 분류할 수 있습니다. 가장 일반적이고 널리 적용되는 방법은 2000년 Notomi를 포함한 일본 학자들이 개발한 Loop-Mediated Isothermal Amplification(LAMP) 기술입니다. LAMP의 기술적 특징은 표적 유전자의 6개 영역을 타겟팅하는 4개의 프라이머를 설계하여 60~65°C의 일정한 온도에서 증폭 반응을 수행하는 스트랜드 치환형 Bst DNA 중합효소를 활용하는 것입니다. 이를 통해 15~60분 이내에 10 9 -10 10 배 증폭이 달성됩니다.
Bst DNA 중합효소는 LAMP 등온 증폭 기술의 핵심 효소입니다. 강력한 열 안정성, 스트랜드 변위 활성 및 중합효소 활성을 보유하고 있어 일정한 온도 조건에서 템플릿의 빠르고 효율적이며 특정적인 증폭이 가능합니다. 증폭을 위해 열 변성 사이클이 필요한 PCR과 달리, 전체 LAMP 실험은 이러한 사이클이 필요 없이 1시간 이내에 완료할 수 있습니다.
제품의 장점
글리세롤 무함유 효소, 동결건조에 적합
주변 온도 수송으로 비용 절감
강력한 스트랜드 변위 활동, 민감하고 안정적입니다.
빠른 재수화, 간편한 조작
성능 하이라이트
01 형광염료법 응용
1、감도도 높고 특이도도 좋음
RT-LAMP 형광 염료 증폭 시스템에서 동결건조 분말 케이크 14405ES의 증폭 성능은 액상 Bst 효소(글리세롤 및 글리세롤 무함유 포함)와 일치하며, 둘 다 50복사/T의 감도에서 100%를 검출할 수 있습니다. 특이성은 양호하며 NTC(음성 템플릿 대조군)의 48웰에서 검출되지 않았습니다.
2、열 가속 안정성이 우수함
RT-LAMP 형광 염료 증폭 시스템에서 동결건조 분말은 각각 45°C에서 7일, 45°C에서 15일, 실온에서 19일 동안 보관 처리되었습니다. 열 가속 후, 제품 성능은 글리세롤이 없는 Bst 효소의 액체 버전과 일관되게 유지되었으며, NTC(음성 템플릿 대조군)에서 피크가 관찰되지 않았습니다.
3、가속 후 재동결 지원
RT-LAMP 형광 염료 증폭 시스템에서 동결건조 분말은 각각 45°C에서 7일, 45°C에서 15일 동안 보관 처리되었습니다. 열 가속 처리 후 동결건조 분말은 두 번째 동결건조(단일 효소 및 RT-LAMP 시약 포함)에 적용되었습니다. 실험 결과 가속 처리 및 두 번째 동결건조 후 제품 성능은 글리세롤이 없는 Bst 효소의 액상 버전과 일관되게 유지되었으며 NTC(음성 템플릿 대조군)에서 피크가 관찰되지 않았습니다. 제품의 안정성이 양호하여 2차 동결건조 및 2차 동결건조 후 가속을 지원합니다.
02 pH 비색법 응용
1、감도도 높고 특이도도 좋음
RT-LAMP pH 비색 증폭 시스템에서 동결건조 분말 케이크 14405ES의 증폭 감도는 50복제/T(검출율 100%)에 도달할 수 있으며 특이성이 우수하며 NTC(음성 템플릿 대조군) 24웰에서는 검출되지 않았습니다.
2、열 가속 안정성이 우수함
RT-LAMP pH 비색 증폭 시스템에서 동결건조 분말 14405ES의 열 가속 안정성은 45°C에서 15일 동안 조사되었고, 가속 후 2차 동결건조 후의 안정성(45°C에서 7일 동안 가속 후 재수화)과 재수화 후 보관 안정성(재수화 후 -20°C에서 7일 동안 보관)이 조사되었습니다. 실험 결과 14405ES 제품은 안정성이 우수하고 열 가속 후 제품 성능에 영향을 미치지 않으며 가속 후 2차 동결건조를 지원합니다.
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제품 유형 |
제품 기능 |
제품 이름 |
품목 번호 |
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RT-LAMP 믹스 |
형광염료 |
RT-LAMP 염색 분석 키트(UDG Plus) |
13762ES |
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pH 지시약 |
RT-LAMP pH 민감 염료 키트 |
13906ES |
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동결건조 가능한 pH 지시약 |
RT-LAMP pH 민감 염료 크로모제닉 버전 동결 건조 가능 키트 |
13920ES |
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Bst 효소 |
글리세린 |
Hieff® Bst Plus DNA 중합효소(40 U/μL) |
14402ES |
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글리세롤 무첨가 |
동결건조 Bst Plus DNA 중합효소(60 U/μL，글리세롤 없음) |
14405ES |
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완충기 |
기본 완충액(염료 등이 포함되지 않음) |
10× Hieff® Bst Plus DNA 중합효소 완충액 |
15441ES |