최근 몇 년 동안 분자 생물학 기술의 급속한 발전으로 핵산 기반 진단 방법이 광범위하게 확립되어 인간 질병의 실험실 테스트에 널리 적용되었습니다. 다른 핵산 증폭 기술과 비교할 때 등온 증폭은 빠르고 효율적이며 특정하며 특수 장비가 필요하지 않다는 장점을 제공합니다. 따라서 등장한 이래로 많은 학자들이 잠재적으로 PCR과 경쟁할 수 있는 검출 방법으로 간주해 왔습니다.

결과적으로 등온 증폭 기술을 기반으로 한 진단 기기 및 키트의 개발과 응용은 분자 진단 분야에서 현장진단(POCT)의 새로운 방향을 제시할 것으로 믿어집니다.

주류 등온 증폭 기술의 원리 소개

1、루프 매개 등온 증폭

(램프) 기술

원리: 루프 매개 등온 증폭(LAMP)은 스트랜드 치환 활성을 가진 Bst DNA 중합효소를 활용합니다. 표적 유전자의 6개 영역을 표적으로 하는 4가지 유형의 특정 프라이머를 설계하여 등온 조건에서 표적 서열을 효율적이고 빠르고 특정하게 증폭할 수 있습니다. 증폭은 60~65°C의 일정한 온도에서 수행할 수 있으며, 15~60분 이내에 ¹⁰⁹ ~ ¹⁰¹⁰ 배의 핵산 증폭을 달성할 수 있습니다.

장점 및 응용 분야: 빠른 반응, 높은 특이성, 간단하고 조작하기 쉬운 장비, 해석하기 쉬운 결과로 인해 등온 증폭은 병원성 박테리아, 기생충, 바이러스, 질병 및 유전자 변형 제품 의 검출에 적용되었습니다. 또한 임상 감염성 질병 진단, 환경 모니터링, 식품 안전 및 기타 분야에서 널리 사용될 것으로 예상됩니다. 분자적 Point-of-Care Testing( POCT ) 플랫폼에 적합한 이상적인 방법이 되었습니다.

분류： LAMP 검출 방법은 탁도법, pH 지시약법, 형광염료법(NHB, 칼세인, SYBR Green, Syto 등), 형광탐침법 등 여러 유형으로 분류됩니다.

2、Recombinase Polymerase Amplification (RPA) 기술

원리: 재조합효소는 프라이머에 결합되면 단백질-DNA 복합체를 형성하여 이중 가닥 DNA 내에서 상동 서열을 검색할 수 있습니다. 프라이머가 상동 서열을 찾으면 가닥 교환 반응이 발생하여 DNA 합성이 형성되고 시작되어 템플릿의 표적 영역이 기하급수적으로 증폭됩니다. 변위된 DNA 가닥은 단일 가닥 결합(SSB) 단백질에 결합하여 추가 변위를 방지합니다. 이 시스템에서 합성 이벤트는 주로 재조합효소, Bsu 효소 및 SSB 단백질의 활동에 의존하는 두 개의 반대 프라이머에 의해 시작됩니다. 이 기술은 37~42°C의 온도 범위에서 10~30분 이내에 관심 표적을 빠르게 감지할 수 있습니다.

장점 및 응용 분야: RPA는 높은 민감도, 강력한 특이성, 전문 장비에 대한 낮은 의존도 , 다양한 검출 형식을 통합하는 능력을 자랑합니다. 특히 기초 수준과 현장 설정에서 진료 시점 테스트에 적합합니다. RPA는 체외 진단, 동물 질병, 식품 안전, 생물 안전, 농업 및 기타 분야에 널리 적용될 수 있습니다.

분류： RPA 검출 방법은 겔 전기영동, EXO 프로브 방법, Fpg 프로브 방법, 측면 흐름 딥스틱(LF-RPA), 응집 분석 등 여러 유형으로 분류됩니다.

제품 성능 쇼케이스

01 pH 민감 염료 RT-LAMP 시약

pH 민감성 염료 RT-LAMP는 60-65℃의 등온 조건에서 시각 염료를 민감한 지표로 사용하여 일정한 온도의 수조 또는 표준 PCR 기계를 사용하여 1단계 RNA 핵산 증폭을 완료합니다. 단 30분 만에 반응 후 색상 변화를 사용하여 병원균 감염이 있는지 여부를 확인할 수 있으며, 더 직관적인 결과(양성은 주황색-노란색, 음성은 자홍색)를 얻을 수 있습니다. 이 방법은 대규모 집단의 신속한 검사에 적합합니다.

추천 상품：

RT-LAMP pH 민감 염료 키트（13906ES）
RT-LAMP pH 민감염료 크로모제닉 버전 동결건조 가능 키트（13920ES）

공연 쇼케이스：

1.RT-LAMP/RPA 혼합 선택 가이드

제품 분류	RT-LAMP 믹스			RPA 믹스
제품 이름	RT-LAMP 염색 분석 키트(UDG plus)	RT-LAMP pH 민감 염료 키트	RT-LAMP pH 민감 염료 크로모제닉 버전 동결 건조 가능 키트	퀵 퓨즈 앰프
제품 품목 번호	13762ES	13906ES	13920ES	16702ES
제품 카테고리	형광염료	pH 민감 염료	pH 민감 염료	조사
제품 구성 요소	2개의 구성요소 버퍼、효소 혼합물	3가지 구성요소 버퍼、RT효소、Bst효소	4가지 구성요소 버퍼、RT효소、Bst효소、Lyoprotectant	4가지 구성요소 버퍼、효소 혼합물、아세트산 마그네슘
동결 건조 지원	아니요	네, 라이오프로텍턴트 없이요	네, 동결보호제 함유	아니요

2.LAMP/RT-LAMP 효소 선택 가이드

제품 분류	Bst 효소		역전사효소		UDG 효소
제품 이름	비에스트 플러스	동결건조 Bst Plus	Ⅲ 역전사효소	III 역전사효소, 글리세롤 무첨가	우드지(UDG)	UDG,글리세롤 무첨가
제품 품목 번호	14402ES	14405ES	11111ES	11297ES	14455ES	14001ES
효소 활성	40유로/μL	60유로/μL	200유로/μL	600유로/μL	1유로/μL	1유로/μL
제품 구성 요소	3가지 구성요소	2개의 구성요소	2개의 구성요소	단일 성분	하나의- 요소	단일 성분
동결 건조 지원	아니요	예	아니요	예	아니요	예

3、RPA 효소 선택 가이드

제품 분류	비수	T4 엑스	T4 예	에스비에스(SSB)	씨씨씨	엑소
제품 이름	비수	T4 유브스엑스	T4 유브스Y	지피 32	크레아틴 키나제	엑소뉴클레아제 III
제품 품목 번호	11078ES	11079ES	11080ES	11081ES	14502ES	14525ES
효소 활성	5유로/μL	2μg/μL	2μg/μL	5μg/μL	2μg/μL	100유로/μL
제품 구성 요소	단일 성분	단일 성분	단일 성분	단일 성분	단일 성분	2개의 구성요소
동결 건조 지원	아니요	아니요	아니요	아니요	아니요	아니요