분자 진단 기술은 뛰어난 민감도와 특이성으로 인해 다양한 검출 방법과 차별화됩니다. 그러나 기존의 액체 진단 시약은 높은 운송 비용과 제한된 유통 기한과 같은 단점으로 인해 유용성이 제한됩니다. 진화하는 시장 요구와 기술 발전에 대응하여 동결 건조 분자 진단 검사 시약이 등장했습니다. 동결 건조 제품은 다음을 포함하여 기존 액체 검사 시약에 비해 여러 가지 장점을 제공합니다.
- 실온에서 안정 - 3차원 구조가 고정되어 있어 실온에서 효소와 반응계의 안정성을 보장할 수 있습니다. 냉장 보관이나 냉장 보관이 필요 없어 제품의 유통기한을 연장할 수 있습니다.
- 사용이 간편합니다 - 반복적인 동결 및 해동, 액상 분사 등이 필요 없습니다.
- 비용 절감 - 냉장 운송 및 냉동 보관이 필요 없으므로 운송 및 보관 비용이 효과적으로 절감됩니다.
- 높은 정밀도 - 한 번의 반응에서 동결 건조 마이크로코어 하나를 사용하여 시약 조제 중의 구성 오류를 줄이고, 작업 시간을 단축하고, 액상 조제 중의 생물학적 활성 손실을 방지하며, 근본적으로 정밀도를 향상시킵니다.
- 유연한 사용 - 샘플 개수에 제한이 없으며, 하나의 샘플도 로드할 수 있습니다.
기존의 분자 효소 또는 프리믹스는 종종 동결 보호제 및 안정제로 고농도의 글리세린을 통합합니다. 그러나 시약에 글리세린이 존재하면 물의 구조적 무결성이 손상되어 물을 효과적으로 제거하기 어려울 수 있습니다. 이는 차례로 동결 건조 제품의 구조와 안정성에 부정적인 영향을 미칩니다. 따라서 동결 건조를 선택할 때는 글리세롤이 없는 시약을 선택하는 것이 좋습니다.
또한 디지털 PCR과 같이 시약 구성에 특히 민감한 응용 분야에서는 고농도 글리세린 무함유 효소를 활용하면 글리세롤이 디지털 PCR 반응에 미치는 영향을 더욱 완화할 수 있습니다. 이 접근 방식은 간섭을 최소화할 뿐만 아니라 디지털 PCR 검출 시약 시스템을 최적화할 수 있는 잠재력을 확대합니다.
YEASEN 글리세롤 프리 분자효소 용액
YEASEN은 포괄적인 비글리세린 분자 효소 연구개발 및 생산 플랫폼을 구축하였고, 재료 선택, 환경 제어, 공정 최적화 및 품질 보증을 통해 다수의 글리세린이 없는 분자 효소의 대량 생산을 달성하였습니다.
- 투석 과정의 시험
고정된 양의 글리세린 효소에 대한 투석 프로세스 최적화:
- 다양한 분자효소에 대한 최적의 투석 완충액을 스크리닝합니다.
- 다양한 분자효소에 대한 장기 보관을 위한 안정한 보관 용액을 스크리닝하여 4℃ 또는 -20℃에서 보관할 수 있는 방법을 모색합니다.
- 접선 유동 여과 공정 증폭
투석 공정 스크리닝을 기반으로 최적의 투석 완충액 성분과 이들의 최적의 보관 용액을 결정할 수 있습니다. 그 후, 접선 유동 여과 공정(UFDF라고도 함)을 용액 완충액 교체에 사용할 수 있습니다.
접선 유동 여과 공정 개발의 중요한 요소는 저장 용액 공식, 세척 및 여과 용액 공식의 선택, 여과 중에 적용되는 막 관통 압력 및 유량을 중심으로 합니다. YEASEN은 접선 유동 여과에 대한 표준화된 접근 방식을 확립하여 대상 분자 효소의 원하는 글리세린 함량에 따라 세척 및 여과 용량과 시간 매개변수를 신속하게 결정할 수 있도록 했습니다. 이 접근 방식은 재료와 시간을 모두 절약하는 데 도움이 됩니다.
- 품질 관리
위에 설명된 다양한 제조 공정은 다양한 양과 제품 유형에 대한 다양한 요구 사항을 수용하도록 설계되었습니다. 다양한 배치와 동일한 공정 내에서 제품 안정성을 평가하기 위해 YEASEN은 포괄적인 성능 매개변수 특성화 시스템을 개발했습니다. 이 시스템을 사용하면 여러 관점에서 글리세롤 없는 측정의 영향을 철저히 평가할 수 있습니다. 특성화 방법에는 단백질 정량화, 효소 활성 평가(회수율), 글리세린 함량 분석, 보호제 함량 평가 및 효소 성능 평가 등이 포함됩니다.
YEASEN 글리세롤 프리 분자효소 제품
YEASEN은 글리세린이 없는 분자 효소 제조 방법을 채택하여 원래 글리세린을 함유한 효소에서 글리세린이 없는 효소를 생산합니다. 현재, 우리는 qPCR/RT-qPCR 및 LAMP/RT-LAMP 응용 분야에 적합한 상당한 양의 글리세롤이 없는 효소 원료를 공급할 수 있습니다. 이러한 원료는 진단 검사에서 동결 건조하도록 설계되었으며, 액체 대응 제품과 동일한 수준의 품질과 성능을 유지합니다.
글리세롤 무첨가 분자효소 제품
qPCR 프리믹스는 각각 YEASEN 14316ES E-Taq DNA polymerase 와 해당 글리세롤 없는 효소를 사용하여 제조하였고, 10 5 , 10 4 및 10 3 사본/mL의 템플릿을 동시에 증폭시켰다. 그 결과, 글리세롤 없는 14316ES의 증폭 효과는 글리세린이 포함된 대응물의 증폭 효과와 일치함을 보였다. 14316ES의 가속 안정성 시험은 37℃에서 수행하였다. 그 결과, 14316ES의 팽창 성능은 37℃에서 54일간 가속 처리한 후에도 비가속 대조군과 일치함을 보였다. 위의 결과는 글리세롤 없는 효소와 글리세린이 포함된 대응물의 성능에 차이가 없으며 안정성이 양호함을 보여주었다.
- RT-qPCR 동결건조제품 : 50℃에서 25일간 가속건조한 동결건조제품은 형태와 성능이 안정적이다.
그림 4: RT-qPCR 동결건조제품의 가속안정성 시험 데이터- RT-LAMP 동결건조제품 : 45℃에서 30일간 가속건조한 동결건조제품은 형태와 성능이 안정적입니다.
RT-LAMP 프리믹스는 YEASEN 14405ES 와 11297ES로 제조하였고, 동결건조 후 성능 시험을 실시하였다. 양성 반응 구멍은 오렌지색이고 음성 반응 구멍은 자홍색으로, 대조도가 매우 강하여 결과를 명확하게 해석할 수 있었다. 또한 동결건조 제품의 형태는 45℃에서 30일 가속 후에도 크게 변하지 않았다. 그 결과 동결건조 제품은 형태와 성능이 안정적임을 보여주었다.
제품 정보
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분류 |
이름 |
카탈로그 번호 |
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qPCR/RT-qPCR용 글리세롤 무첨가 효소제품 |
Hifair™ Lyo Multiplex One Step RT-qPCR 키트 -11831ES |
11831ES |
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14316ES |
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11301ES |
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10707ES |
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10703ES |
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RT-LAMP용 글리세롤 프리 효소 제품 |
Hifair® III 역전사효소, 600U/μl, 글리세롤 무첨가 |
11297ES |
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14405ES |