단백질 전기영동은 단백질 분석 기술입니다. 단백질은 완충액에서 음전하 또는 양전하를 띠고 전기영동이라는 전기장에서 양극으로 이동합니다. 단백질 분자마다 전기영동 이동도가 다릅니다. 단백질 전기영동의 매우 중요한 부분은 겔 제조입니다. 기존의 겔 제조는 종종 몇 시간이 걸리고 액체 누출, 겔 불균일, 기포와 같은 문제도 있습니다. 제조의 번거로움 외에도 원료 시약에는 일정한 독성이 있어 접착제 디스펜서 본체에 해를 끼치고, 조립식 접착제의 출현은 이러한 문제를 해결할 수 있습니다. 그렇다면 단백질 전기영동의 기본 원리는 무엇이며, 조립식 겔의 기능과 원리는 무엇입니까?

1. 단백질 전기영동의 기본 원리는 무엇입니까?
2. 조립식 접착제의 기능과 원리는 무엇입니까?
3. 예센이 제공하는 조립식 접착제 소개
4. 자주 묻는 질문
5. 제품 설명

1. 단백질 전기영동의 기본 원리는 무엇입니까?

단백질과 핵산과 같은 대부분의 생물학적 거대 분자는 양이온과 음이온 그룹을 가지고 있는데, 이를 쌍이온이라고 한다. 입자를 용액에 분산시키고 전분 겔, 아가 또는 아가로스 겔, 폴리아크릴아마이드 겔 등을 지지 매체로 사용하는 구역 전기영동법을 겔 전기영동이라고 한다. 폴리아크릴아마이드 겔 전기영동은 지지체가 폴리아크릴아마이드 겔인 전기영동법이다. 폴리아크릴아마이드 겔의 기공 크기를 조절하여 중합시키고, 유사한 분자체의 작용으로 단백질을 분리한다고 생각된다.

단백질 전기영동에는 네이티브 폴리아크릴아마이드 겔 전기영동(Native-PAGE)과 소듐 도데실 설페이트-폴리아크릴아마이드 겔 전기영동(SDS-PAGE)의 두 가지 형태가 있습니다. 네이티브-PAGE는 전기영동 중에 단백질을 그대로 유지하고 분자량, 모양 및 수반되는 전하에 따라 기울기로 분리합니다. 반면, SDS-PAGE는 단백질을 하위 단위의 분자량에 따라 분리합니다. SDS는 음이온성 세제입니다. 변성제 및 가용화제로서 분자 내 및 분자 간 수소 결합을 끊고, 분자를 접고, 단백질 분자의 2차 및 3차 구조를 파괴할 수 있습니다. 강력한 환원제인 머캅토에탄올, 디티오트레이톨은 시스테인 잔기 사이의 이황화물 결합을 끊을 수 있습니다. 환원제와 SDS를 샘플과 겔에 첨가한 후, 분자는 폴리펩타이드 사슬로 탈중합되고, 탈중합된 아미노산 측쇄와 SDS는 단백질-SDS 미셀로 결합된다. 단백질-SDS 미셀의 음전하는 단백질의 원래 전하를 초과하여, 다른 분자들 간의 전하 차이와 구조적 차이를 제거한다. 단백질의 이동성은 단백질의 분자량에만 의존하며, 단백질의 분자량은 알려진 분자량의 표준과 비교하여 결정할 수 있다.

2. 조립식 접착제의 기능과 원리는 무엇입니까?

기존의 핸드캐스트 젤과 비교했을 때, 프리캐스트 단백질 젤은 다량의 독성 시약과의 접촉을 피할 수 있어 많은 시간을 절약할 수 있으며, 핸드캐스트 젤의 현저한 차이 문제를 효과적으로 해결할 수 있습니다.

젤은 두 개의 다른 젤 층으로 구성되어 있으며, 위층은 스태킹 젤이고 아래층은 분리 젤입니다. 스태킹 젤은 스태킹 젤이라고도 합니다. 젤 농도는 비교적 작고 기공 크기는 비교적 큽니다. 샘플은 스태킹 젤에 추가되고 큰 기공 크기 젤의 이동을 통해 좁은 구역에서 농축됩니다. 전기영동 젤이라고도 하는 분리 젤은 일반적으로 기공 크기가 작으며 적절한 젤 농도를 선택하면 샘플 구성 요소를 잘 분리할 수 있습니다.

분리 젤은 고정 젤과 그래디언트 젤로 나눌 수 있습니다. 폴리아크릴아마이드의 농도는 8%, 10%, 12%, 15%, 4%~12%, 4%~20%입니다. 처음 네 가지는 고정 농도의 프리캐스트 젤이고 마지막 두 가지는 그래디언트 젤입니다. 농도는 분리된 단백질 분자량 범위를 나타냅니다. 젤 그래디언트는 그래디언트 믹서에 의해 형성됩니다. 고농도 아크릴아마이드 용액을 유리판에 첨가한 다음 용액의 농도가 그래디언트로 감소하고 젤의 기공 크기는 상단이 더 크고 하단이 더 작습니다. 고정 젤은 분리 범위 내에서만 단백질을 분리할 수 있으며 너무 크거나 작지 않습니다. 그래디언트 젤은 이러한 제한이 없으며 큰 분자는 상단에서 분리되고 작은 분자는 하단에서 분리됩니다. 그래디언트 젤의 기공 크기가 점차 작아지기 때문에 단백질이 침투할 수 없는 기공 크기 근처의 단백질에 농축 효과가 있어 전기영동 후 매우 좁은 구역이 형성됩니다. 분자량 차이가 작은 단백질은 고정 젤에서는 분리할 수 없지만 그래디언트 젤에서는 분리할 수 있습니다.

3. 예센이 제공하는 조립식 접착제 소개

YEASEN Precast Protein Plus Gel은 농도 기울기와 고정 농도를 포함하고 있으며, 다양한 농도가 다양한 단백질 전기영동의 요구를 충족시킬 수 있습니다. 독특한 젤 제조 공정으로 제조되었으며 우수한 전기영동 효과가 있습니다. 시중의 모든 종류의 전기영동 탱크(Bio-RAD, Tanon, Life 등)와 호환되며 광범위한 적응성, 높은 분해능, 높은 안정성, 선명하고 균일한 밴드 등의 장점이 있습니다.

3.1 YEASEN 프리캐스트 단백질 플러스 겔이 플라스틱 보드로 업그레이드되어 품질이 더 좋아졌습니다!

사용이 간편합니다. 즉시 사용 가능합니다. 플라스틱 보드 바닥에서 접착 테이프를 떼어냅니다.

다양한 응용분야: 변성단백질 및 천연단백질과 호환 가능

투명밴드 : 플라스틱판의 특수처리로 단백질 흡착을 대폭 감소

시간 절약: 실험은 가장 빠른 경우 18분 안에 완료될 수 있습니다.

품질 보증: 엄격한 배치 간 안정성 보장

장기 보관 가능 : 4℃에서 12개월 보관 가능

3.2 다음 매개변수는 적절한 젤 시리즈를 선택하는 데 도움이 될 수 있습니다.

전기영동 완충액 시스템: 변성 단백질 러닝 완충액 또는 천연 단백질 러닝 완충액

웰 수 및 샘플 로딩: 10 또는 15 웰, 최대 샘플 크기는 각각 70 μL 및 40 μL입니다.

겔 농도 : 8%, 10%, 12%, 15%, 4%-12%, 4%-20%

표 1. 겔 농도 및 선형 분리 범위

3.3 데이터 표시

그림 1. 데이터 표시

그림 2. 데이터는 다음을 보여줍니다.

4. 자주 묻는 질문

Q1: 프리캐스트 젤은 4℃에 두어야 하나요? 잠시 실온에 두어도 괜찮나요?

A: 권장 4℃, 12개월 보관 가능. 0℃ 이하 보관 금지, 실온(25℃)에서 30일 보관 가능.

Q2: 기울기 농도와 고정 농도 중에서 어떻게 선택해야 하나요? 프리캐스트 겔로 분리된 단백질의 최소 분자량은 얼마입니까?

A: 프리캐스트 겔에 의한 단백질 분리의 크기는 농도와 관련이 있으며, 해당 분리 범위는 위 그림에 표시되어 있습니다.

고정 농도 프리캐스트 젤은 더 나은 분해능을 가지고 있습니다. 기울기 농도 프리캐스트 젤은 더 넓은 분리 범위와 더 광범위한 적용 범위를 가지고 있습니다. 고객은 자신의 필요에 따라 적절한 농도를 선택해야 합니다.

당사의 4%-20% 구배 프리캐스트 겔(Cat#36250, Cat#36256)은 최소 3.5kDa의 단백질에 대한 분리 범위가 넓습니다.

그림 3. 그래디언트 프리캐스트 겔 데이터

Q3: 프리캐스트 젤은 반드시 귀사의 특수 버퍼를 장착해야 합니까? 버퍼를 직접 만들 수 있습니까?

A: YEASEN 특수 버퍼(Cat#36236, Cat#36237)와 프리캐스트 겔 적용성이 더 좋습니다. 다른 버퍼와 혼합하지 마십시오. 버퍼는 시약을 구매하여 준비할 수 있지만 고객은 관련 프리캐스트 겔 지침에서 찾을 수 있는 당사의 공식을 사용해야 합니다.

Q4: 분리 젤과 농축 젤을 구별하는 방법은 무엇입니까? 단면 전압 전기영동에 필요한가요?

A: 두 성분은 같지만 농도가 다르므로 육안으로는 구별할 수 없습니다. 농축된 접착제의 높이는 1.5cm입니다.

아니요, 150V 전기영동을 권장하며, 실험을 완료하는 데 30~40분이 필요합니다.

Q5: 귀사의 프리캐스트 겔은 시중의 모든 종류의 전기영동 탱크에 적합합니까?

A: 네, 저희의 프리캐스트 젤은 시중의 모든 종류의 전기영동 탱크에 적합합니다.

Bio-rad Mini-Protean(II/3/Tetra 시스템) 및 Tanon VE180(밀봉 스트립의 역조립에 주의하세요)

Life Technology Novex 미니 셀(특수 배플과 함께 사용)

10cm 전기영동 탱크의 다른 겔 플레이트 폭.

5. 제품 설명

Yeasen에서 제공하는 제품은 다음과 같습니다.

표 2. 제품 세부 정보