1. 배경 소개
스트렙타비딘은 스트렙토마이세스 아비디니에서 유래한 비오틴 결합 단백질입니다. 비특이적 결합은 아비딘보다 훨씬 낮고, 중성 pH에서 순 양전하를 띠고 약 7%의 탄수화물을 함유하는 달걀 흰자 아비딘과 비교했을 때, 스트렙타비딘은 중성 pH에서 순전하가 거의 없고 탄수화물이 없는 등 더 유리한 화학적 특성을 가지고 있습니다. 따라서 아비딘의 대안으로 널리 사용되고 있습니다.
2.제품 특징
사중체 구조 : 스트렙타비딘은 66KDa 크기의 동종 사중체로 존재합니다.
높은 친화성 : 스트렙타비딘의 각 분자는 4개의 바이오틴 분자와 매우 특이적으로 결합할 수 있으며, 이들 사이의 친화성은 매우 강합니다.
광범위한 응용 분야: 스트렙타비딘-비오틴 복합체의 해리 상수는 나노몰 범위에 있으며, 이는 분자 생물학 응용 분야에서 일반적으로 사용되는 특성입니다. 대부분의 응용 분야에서 항체 단백질과 상호 교환하여 사용할 수 있습니다.
고품질 추출물 : Streptomyces avidinii 로부터 정제하여 얻음
그림 1. 스트렙타비딘
제품 응용 프로그램
응용분야 1: 스트렙타비딘을 첨가한 정제수지
1) 적용 원리스트렙타비딘과 비오틴의 상호작용을 기반으로, 스트렙타비딘은 6% 아가로스에 고도로 가교되어 있으며, 독특한 제조 공정으로 더 높은 물리화학적 특성을 가지므로 더 높은 압력을 견딜 수 있습니다. 비교적 높은 유속에서 표적 단백질을 정제할 수 있어 대규모 산업적 단백질 정제에 더 적합합니다.
그림 2. 스트렙타비딘 수지의 정제 원리
2)
그림 3. 스트렙타비딘 수지로 정제된 단백질
3) 자주 묻는 질문|
질문 |
가능한 이유 |
추천 솔루션 |
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컬럼의 역압이 너무 높습니다. |
포장이 막혔습니다 |
수지를 청소합니다. |
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용해 완충액에는 작은 고체 입자가 포함되어 있으므로, 로딩하기 전에 0.22μm 또는 0.45μm 필터 멤브레인으로 여과하거나 원심분리하여 제거하는 것이 좋습니다. |
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샘플이 너무 점성이 높습니다. |
샘플에 고농도의 핵산이 포함되어 있으므로 점도가 감소할 때까지 용해 시간을 늘리거나 DNase I(최종 농도 5 μg/ml), Mg 2+ (최종 농도 1 mM)를 첨가하고 얼음 위에서 10-15분간 배양합니다. |
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버퍼가 너무 점성이 높습니다 |
유기 시약이나 단백질 안정화 시약(글리세롤 등)은 역압을 증가시키고 작동 유량을 감소시킬 수 있습니다. |
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용출 성분에 목적이 없는 단백질이 있음 |
과도한 분열은 관심 단백질을 변성시킵니다. |
약한 용해 조건을 사용합니다. 실험 조건은 경험에 기초합니다. |
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목표 단백질이 응집되어 침전이 생성됩니다. |
최종 농도가 1-10 mM이 되도록 DTT를 세포 용해 전 용액에 첨가합니다. |
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목표 단백질이 완전히 용출되지 않았습니다 |
용출량이 너무 적습니다 |
용출액의 양을 늘리고 용출 유량을 줄입니다. |
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용출 완충액의 pH가 변화합니다. |
신선하게 준비된 용출액을 사용하세요 |
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용출액 배양시간이 충분하지 않습니다. |
겔과 용출 완충액의 배양 시간을 늘립니다. |
응용 2: 형광 그룹과 효소 결합체로 표지된 스트렙타비딘.
그림 4. 다양한 접합 스트렙타비딘
1) 효소결합 스트렙타비딘- 양파 과산화효소(HRP) 결합 스트렙타비딘
Ⅰ.고순도 스트렙타비딘과 호스래디시 퍼옥시다제를 특수한 접합기술을 통해 생산함
Ⅱ.퍼옥시다제의 높은 특정 활성을 유지합니다. 응용 분야: 면역조직화학(IHC), 면역세포화학(ICC), 현장하이브리디제이션(ISH) 등
권장 농도: WB(화학 발광법)의 경우 0.01-0.1µg/mL, ELISA, HC/ICC, WB(기질 발색법)의 경우 1-2µg/mL
- 알칼리성 인산가수분해효소(AP) 접합 스트렙타비딘
Ⅰ.특정 공유 결합을 통해 고체상 분석, 조직/세포 염색 시스템 및 블롯 응용 분야에 적합합니다.
Ⅱ.결합체는 안정하고 활성이 높다.
응용 분야: 면역조직화학(IHC), 면역세포화학(ICC), 효소연결면역점 분석법(ELISPOT), 효소연결면역흡착 분석법(ELISA), 현장교잡법(ISH) 및 블롯 응용 분야.
권장 농도: ELISA, IHC/ICC의 경우 1-2µg/mL, WB의 경우 0.1-1µg/mL
2）형광체 접합 스트렙타비딘- Fluor® 플루오레세인 접합 스트렙타비딘
Ⅰ.일상적인 면역형광 검사에 권장됨
Ⅱ. 매우 낮은 비특이적 결합 특성을 지닌 고도로 정제된 물질입니다.
III. 바이오틴에 대한 높은 친화성
응용 분야: 면역 형광 분석(IF), 현장 교잡 분석(ISH), 유세포 분석(Flow Cyt).
추천 농도 : 0.5-2 µg/mL (IF)
- DyLight™ 염료 접합 스트렙타비딘
Ⅰ. 면역 형광, 현장 교잡 또는 유세포 분석 응용 분야에서 바이오틴화된 2차 항체 및 기타 대형 분자를 검출하는 데 사용할 수 있습니다.
Ⅱ. 매우 낮은 비특이적 결합 특성을 지닌 고도로 정제된 물질입니다.
III. 매우 높은 바이오틴 친화성
4. 높은 광안정성, pH에 민감하지 않음, 더 밝은 형광
응용 분야: 면역 형광 분석(IF), 현장 교잡 분석(ISH), 유세포 분석(Flow Cyt).
추천 농도 : 0.5-2 µg/mL (IF)
제품 정보
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제품 시리즈 |
제품 번호 |
제품 이름 |
사양 |
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스트렙타비딘 |
35099ES |
스트렙타비딘(분말) |
100mg/1g |
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35101ES |
스트렙타비딘(5mg/ml) |
1mg/5mg/10mg/100mg/1g |
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효소 결합 스트렙타비딘 |
35105ES |
HRP 스트렙타비딘 |
100 μL |
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35106ES |
AP 스트렙타비딘 |
100 μL |
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형광 표지된 스트렙타비딘 |
35102ES |
DyLight 405™ 스트렙타비딘 |
100 μL |
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35103ES |
YSFluor TM 488-접합 스트렙타비딘 |
100 μL |
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35104ES |
YSFluor TM 647-접합 스트렙타비딘 |
100 μL |
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35107ES |
YSFluor TM 584-접합 스트렙타비딘 |
100 μL |
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35108ES |
Cy3-접합 스트렙타비딘 |
1mg(밀리그램) |
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스트렙타비딘 정제 시리즈 |
20512ES |
스트렙타비딘 아가로스 수지 6FF |
5ml/5ml×5/100ml |
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20513ES |
BiotSep Streptavidin 6FF 크로마토그래피 컬럼, 1ML |
1ml/1ml×5 |
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20514ES |
BiotSep Streptavidin 6FF 크로마토그래피 컬럼, 5ML |
5ml/5ml×5 |