Productintroductie

Collageenase is een klasse van endonucleasen die specifiek de Pro-X-Gly-Pro-sequentie (die veel voorkomt in collageen en zelden in andere eiwitten) kunnen herkennen en de peptidebinding tussen het neutrale aminozuur (X) en glycine (Gly) in deze sequentie kunnen verbreken. Bovendien kunnen ze collageen in bindweefsel hydrolyseren.

Veel proteasen zijn in staat enkelstrengs en gedenatureerde collageenpeptiden te hydrolyseren, maar collageenase is de enige protease die natuurlijke collageenvezels met een supergewonden structuur van drie strengen kan afbreken. Het wordt veel aangetroffen in bindweefsels, waarvan de krachtigste de 'ruwe' collageenase is die wordt afgescheiden door de anaërobe bacterie Clostridium histolyticum.

Yeasen Collageenase is afkomstig van Clostridium histolyticum, een 'grof' enzymextract dat niet alleen collageen bevat dat natuurlijk collageen en reticulaire vezels kan afbreken, maar ook enkele andere proteasen zoals polysacharidasen, lipasen, enz., die effectief andere eiwitten, polysachariden en lipiden in de extracellulaire matrix van bindweefsel en epitheelweefsel kunnen hydrolyseren, waardoor het geschikter is voor weefselvertering.

Momenteel wordt de bacteriële collageenase op de markt hoofdzakelijk onderverdeeld in vijf typen, afhankelijk van het verschil in de activiteit van collageenase: collageenase type I, type II, type III, type IV en type V.

Keuze van collageenase

Productnaam	Verschijning	Enzymactiviteit	Toepassingsgebied
Type I Collageenase)	Bruin of bruin kristallijn poeder	≥250 U/mg vaste stof	Bevat (collageenase, caseïnase, clostridia en trypsine) activiteit voor de isolatie van epitheel-, long-, vet- en bijnierweefselcellen.
Type II Collageenase)	Bruin of bruin kristallijn poeder	≥125 U/mg vast	Bevat meer clostridase-activiteit en is geschikt voor de isolatie van lever-, bot-, schildklier-, hart- en speekselklierweefselcellen
Type III Collageenase)	Bruin of bruin kristallijn poeder	≥100 U/mg vaste stof	Het bevat een lage proteolytische activiteit, wat effectief is voor het verbindingsdeel van het spijsverteringsweefsel, en wordt vaak gebruikt voor de dissociatie van zoogdierweefselcellen
Type IV Collageenase)	Bruin of bruin kristallijn poeder	≥125 CDU/mg vast*	Bevat een lage trypsine-activiteit en wordt vaak gebruikt bij celvoorbereiding voor eiland- en receptorintegriteit
Type V Collageenase)	Bruin of bruin kristallijn poeder	≥125 CDU/mg vast*	Bevat minstens 7 proteasecomponenten, die gebruikt kunnen worden voor de isolatie van pancreas-eilandweefsel en de scheiding van bindweefsel in afzonderlijke cellen

*CDU = collageenverteringseenheden

Producteigenschappen

1. Hoge verteringsefficiëntie: het ruwe enzymextract van Clostridium histolyticum heeft een hoge verteringsefficiëntie voor weefsels.
2. Afhankelijk van activatoren: collageenase moet vertrouwen op de activiteit van activerende enzymen zoals divalente kationen zoals Ca²⁺en Zn²⁺.
3. Beïnvloed door remmers: remmers van collageenase omvatten EDTA, EGTA, enz.; de tweede zijn zware metaalionen (Hg²⁺, Pb²⁺, cd²⁺); Er zijn ook enkele chemische stoffen zoals cysteïne, histidine, DTT, 2-mercaptoethanol, o-fenantroline, enz., die ook een remmende werking hebben op collageenase.
4. Sterke interferentieweerstand: collageen wordt niet aangetast door het serum dat wordt gebruikt om cellen te kweken.

Voorzorgsmaatregelen bij gebruik

1. Gebruik: Oplossen in Hank's, Earle's of andere uitgebalanceerde zoutoplossingen, de aanbevolen werkconcentratie is 0,05% ~0,5% (w/v)
2. Bewaartemperatuur: 2-8°C
3. Suggesties voor gebruik:

(1) Voor de studie van de collageenstructuur en -biosynthese worden vaak collageenasepreparaten met een hogere zuiverheid gebruikt en worden er geen andere proteolytische activiteiten gebruikt.

(2) Voor weefseldissociatie worden vaak ruwe collageenasepreparaten gebruikt, zoals elastase, trypsine of papaïne.

Veelgestelde vragen

1. Slechte spijsvertering tijdens het experiment

(1) Als het wordt veroorzaakt door een zwakke enzymactiviteit of onvoldoende calciumionen, moet collageenase worden bewaard bij lage temperaturen en droge omstandigheden, en moet de collageenaseoplossing worden ingevroren na aliquotering.

(2) Als het wordt veroorzaakt door een tekort aan calciumionen, moet de concentratie calciumionen in de collageenoplossing 5 mM zijn.

2. Celdood treedt op tijdens gebruik

(1) Als er sprake is van een overmaat aan protease, moet de contacttijd van het protease worden verkort of moet albumine of geïnactiveerd serum worden toegevoegd.

(2) Als de pH verandert, moet een buffer (bijv. HBSS) worden gebruikt; controleer en pas uw pH regelmatig aan

(3) Als er te weinig zuurstof is, moet de spijsverteringsoplossing worden geventileerd met steriele lucht.

3. Cellen raakten beschadigd tijdens het experiment

Als het wordt veroorzaakt door teveel protease, moet de hoeveelheid protease worden verminderd of moet albumine of geïnactiveerd serum worden toegevoegd

Bestellen

Catalogusnummer	Productnaam	Maat
40507ES60	Collageenase I	100 mg, 1 gram
40508ES60	Collageenase II	100 mg, 1 gram
40509ES60	Collageenase III	100 mg
40510ES60	Collageenase IV	100 mg, 1 gram
40511ES60	Collageenase V	100 mg

Gerelateerde productaanbevelingen

Catalogusnummer	Productnaam	Maat
40123ES60	PerfCel™l Trypsine-EDTA (0,25%), fenolrood	100 ml
40124ES60	PerfCell™ Trypsine-geen EDTA (0.25%), geen fenolrood	100 ml
40126ES60	PerfCell™ Trypsine (0,25%), fenolrood	100 ml
40127ES60	PerfCell™ Trypsine-EDTA (0,25%), fenolrood	100 ml
40101ES25	Trypsine 1:250 (poeder)	25 gram
40512ES10/60	PerfCell™ Recombinant Trypsine (poeder)	10mg/100mg
20416ES60	Recombinant trypsine (MS-SAFE)	100 µg
40134ES60	PerfCell Tryzyme™Express	100 ml
40135ES60	PerfCell Tryzyme™Express	100 ml
40506ES60	BESCHERMING	100 ml
40104ES60/80	Dispase II	100mg/1g