Het eerste bevestigde geval van monkeypox werd begin mei gemeld in het Verenigd Koninkrijk en brak snel uit in niet-endemische landen en regio's. Vanaf 21 september 2022 zijn er wereldwijd 106 landen/regio's bevestigd, met in totaal 63.117 gevallen. Op 16 september bevestigde Chongqing een geïmporteerd geval van monkeypox, het eerste geval op het vasteland van China, wat tot maatschappelijke bezorgdheid leidde.

Figuur 1. Wereldwijde kaart van de apenpokkenuitbraak in 2022 (van de CDC)

1. Wat is apenpokken?
2. De geschiedenis van apenpokken
3. Hoe het zich verspreidt
4. Tekenen en symptomen
5. Detectiemethode
6. Productmatch
7. Productbestelling

1. Wat is apenpokken?

Monkeypox-virus is een dubbelstrengs DNA-virus met een totale lengte van ongeveer 197 kb. Het behoort tot het geslacht Orthopoxvirus van de familie Poxviridae. Virus). Er zijn twee takken van het monkeypox-virus (West-Afrikaanse tak en Congo Basin-tak). Daaronder is het sterftecijfer van de West-Afrikaanse tak ongeveer 3,6% en het sterftecijfer van de Congo Basin-tak kan oplopen tot 10,6%. Monsters van monkeypox-gevallen die sinds mei 2022 in niet-endemische gebieden zijn gevonden, sequentieanalyse toonde aan dat de West-Afrikaanse clade^[1].

Figuur 2. Foto van apenpokken (foto van CCDC)

2. De geschiedenis van apenpokken

Monkeypox werd ontdekt in 1958 toen er twee uitbraken van een pokkenachtige ziekte plaatsvonden in kolonies apen die werden gehouden voor onderzoek. Ondanks dat de ziekte de naam "monkeypox" kreeg, is de bron ervan onbekend. Afrikaanse knaagdieren en niet-menselijke primaten (zoals apen) zouden het virus echter kunnen herbergen en mensen kunnen infecteren.^[2].
Het eerste menselijke geval van monkeypox werd geregistreerd in 1970. Vóór de uitbraak in 2022 werden monkeypox gemeld bij mensen in verschillende landen in Centraal- en West-Afrika. Voorheen waren bijna alle gevallen van monkeypox bij mensen buiten Afrika gelinkt aan internationale reizen naar landen waar de ziekte veel voorkomt of via geïmporteerde dieren. Deze gevallen deden zich voor op meerdere continenten^[2].

3. Hoe het zich verspreidt

Het kan van dieren op mensen worden overgedragen, van mensen op mensen en via de omgeving op mensen.
Het is nu duidelijk dat apenpokken mensen op 3 manieren kunnen infecteren: Eén is van geïnfecteerde dieren naar mensen. Het virus kan het lichaam binnendringen via een kapotte huid, luchtwegen of slijmvliezen (ogen, neus of mond). De tweede wordt overgedragen via nauw contact tussen mensen, waaronder geslachtsgemeenschap, kussen, knuffelen of het aanraken van lichaamsdelen van apenpokken, en contact met met het virus besmette kleding, beddengoed, handdoeken of servies en andere items die ook geïnfecteerd kunnen raken. De derde is de overdracht van ademhalingsdruppels^[3].

4. Tekenen en symptomen

De belangrijkste klinische verschijnselen zijn koorts, huiduitslag en lymfeklierzwelling.
De meest voorkomende symptomen in het vroege stadium zijn koorts, hoofdpijn, spierpijn en gezwollen lymfeklieren. De huiduitslag verschijnt 1 tot 3 dagen na het begin van de ziekte. De typische huiduitslag verschijnt eerst op het gezicht en verspreidt zich geleidelijk naar de ledematen en andere delen. De huiduitslag is meestal centrifugaal.Huiduitslag op het gezicht en de ledematen komt vaker voor dan op de romp. Huiduitslag kan ook voorkomen op de handpalmen en voetzolen en het aantal huiduitslagen varieert van enkele tot duizenden. Ook het mondslijmvlies, het spijsverteringskanaal, de geslachtsorganen, het bindvlies en het hoornvlies kunnen aangetast zijn.
Symptomen duren over het algemeen 14 tot 21 dagen en patiënten lossen ze meestal vanzelf op. Erytheem of hyperpigmentatie of zelfs littekens kunnen achterblijven nadat de korstjes eraf vallen. Het is vermeldenswaard dat de korst besmettelijk blijft totdat de korst eraf valt en er een nieuwe huidlaag onder ontstaat^[3].

5. Detectiemethode

Om de apenpokkenepidemie effectief te voorkomen en te beheersen en te voorkomen dat het virus wordt geïmporteerd en verspreid, hebben wereldwijde IVD-bedrijven actief gereageerd. Als leverancier van IVD-detectiereagensproductiegrondstoffen en reagensoplossingen, Yeasen biedt een complete oplossing om het monkeypox-virus efficiënt te detecteren. Van nucleïnezuurextractie tot reagenscomponenten (enzymreagentia en pseudovirussen) en half afgewerkte kits (primerprobes, enzymreagentia en plasmidecontroles), Yeasen kan u stabiel bevoorraden.

Figuur 3. Virusdetectiemethode

5.1 Methodevoordeel

• Efficiënte en handige bediening: een set kits, inclusief alle componenten, zonder omslachtige handelingen, toevoeging in één stap
• Hoge detectiegevoeligheid - Genetisch gemodificeerde antilichaammethode hot-start Taq-enzym, 1 kopieën/reactie kan ook worden gedetecteerd
• Sterke reagensstabiliteit: bewaar bij 37℃ gedurende 1 week, stabiele prestaties na herhaaldelijk invriezen en ontdooien
• UDG-vervuilingspreventie: het dUTP/UDG-systeem wordt aan het systeem toegevoegd om het risico op aerosolverontreiniging effectief te voorkomen.
• Toepasbaar op meerdere platforms: geschikt voor Bio-Rad CFX96, ABI Q5 en Slan

5.2 Productovereenkomst

• Reagentia voor extractie van nucleïnezuur: MolPure™ Magnetische swab virale DNA/RNA-kit (Cat.nr. 18300ES)
• Detectiereagens voor apenpokken: Monkeypox Virus Real Time qPCR Kit(Cat.nr. 13862ES/Cat.nr. 13863ES)
• Apenpokkenpseudovirus: Apenpokkenvirus Pseudovirus (Cat#12099ES/Cat#12100ES)

6. Aanbevolen producten

6.1 Monkeypox Virus Real Time qPCR Kit (Cat.nr. 13862ES)

Productvoordelen:
Efficiënte en comfortabele bediening
Hoge gevoeligheid en goede specificiteit
Super stabiliteit
Goede herhaalbaarheid

6.1.1 Gevalsweergave:

• Super thermische stabiliteit voor 37℃

De MPXV werd versterkt door Cat#13862ES 7 dagen lang op 37℃ te plaatsen. De resultaten lieten zien dat de Ct-waarde en fluorescentiewaarde niet significant werden beïnvloed door 7 dagen op 37℃, en de thermische stabiliteit was sterk.

Figuur 4. Yeasen (Cat#13862ES) 37℃ versnelde 7-daagse stabiliteitsverificatie

• Super Vries-Dooi Stabiliteit

De MPXV werd versterkt door Cat#13862ES respectievelijk 10 keer, 20 keer en 50 keer in te vriezen en te ontdooien bij -20℃.Uit de resultaten bleek dat 10 keer, 20 keer en 50 keer invriezen en ontdooien bij -20℃ geen significant effect had op de Ct-waarde en de fluorescentiewaarde. Bovendien was de stabiliteit bij invriezen en ontdooien sterk.

Figuur 5. Yeasen(Cat#13862ES) -20℃ vries-dooi stabiliteitsverificatie

• Ultrahoge gevoeligheid, 1 kopieën/μL kunnen ook worden gedetecteerd

Gebruik makend van Yeasen monkeypox-product (Cat#13862ESES), 1000 kopieën/μL, 100 kopieën/μL, 10 kopieën/μL, 1 kopie/μL en negatieve blanco (NTC) werden gebruikt om MPXV te detecteren. Het is te zien dat ook een enkele kopie kan worden gedetecteerd (Ct-waarde is ongeveer 38), en De 48-well NTC-test werd herhaald, met een stabiele basislijn, negatieve NTC-pieken en geen staartfenomeen, met een hoge gevoeligheid en hoge specificiteit.

Figuur 6. MPXV-gevoeligheidsdetectie

Figuur 7. Detectie van MPXV-specificiteit

• Reagentia zijn stabiel en reproduceerbaar

De Yeasen monkeypox detection kit (Cat#13862ESES) werd geselecteerd om 10 herhaalde tests uit te voeren voor lage, gemiddelde en hoge concentraties van positieve monsters. De resultaten toonden aan dat de CV van de positieve monsters in het FAM-kanaal minder dan of gelijk was aan 2%, en de blanco controle had geen piek- en geen staartfenomeen. , goede herhaalbaarheid.

Figuur 8. Herhaalbaarheidstest

6.2 Monkeypox Virus Real Time qPCR Kit (UDG Plus)(Cat.nr. 13863ES)

Productvoordelen:

⑴ Efficiënte en comfortabele bediening
⑵ Hoge gevoeligheid en goede specificiteit
⑶ Super stabiliteit
⑷ Goede herhaalbaarheid
⑸ UDG Verontreinigingspreventie

6.2.1 Gevalsweergave:

• Super thermische stabiliteit voor 37℃

De MPXV werd versterkt door Cat#13863ES gedurende respectievelijk 7 en 14 dagen op 37℃ te plaatsen. De resultaten laten zien dat er na 7 en 14 dagen op 37℃ geen significant effect is op de Ct-waarde en fluorescentiewaarde, en de thermische stabiliteit is sterk.

Figuur 9. Yeasen(Cat#13863ES) 37℃ versnelde 7-daagse, 14-daagse stabiliteitsverificatie

• Super Vries-Dooi Stabiliteit

Cat#13863ES werd ingevroren en ontdooid bij -20℃ gedurende 50 keer om de MPXV te versterken. De resultaten toonden aan dat invriezen en ontdooien bij -20℃ gedurende 50 keer geen significant effect had op de Ct-waarde en fluorescentiewaarde, en de stabiliteit van invriezen en ontdooien was sterk.

Figuur 10. Yeasen(Cat#13863ES) -20℃ vries-dooi stabiliteitsverificatie

• Hoge gevoeligheid en specificiteit

5 kopieën/μL van MPXV en negatieve blanco (NTC) werden getest met behulp van Yeasen monkeypox-product (Cat#13863ESES). De resultaten toonden aan dat de basislijn stabiel was, de detectiegraad van FAM was 100%, de minimale detectielimiet was 5 kopieën/μL, en tijdens de 48-well herhaalde test van NTC, de basislijn van FAM- en VIC-kanalen stabiel was, de NTC-negatieve piek geen staartfenomeen had en een hoge gevoeligheid en hoge specificiteit had.

Figuur 11. MPXV-gevoeligheidsdetectie

Figuur 12. Detectie van MPXV-specificiteit

• Goede lineariteit van reagentia

Het positieve sjabloon werd 10 keer verdund vanaf de concentratie van 1×105 kopieën/μL, en de Yeasen qPCR monkeypox kit (Cat#13863ES) werd gebruikt om de detectie twee keer te herhalen. De logaritme van het initiële kopienummer is de abscis en de Ct-waarde is de ordinaat. De standaardcurve werd gemaakt en de resultaten lieten zien dat het FAM-kanaal van het monkeypox-gen een lineair bereik had van 10～1×105 kopieën/μL en R2>0,99, wat een goede lineaire relatie had.

Figuur 13. Lineariteitstest

• Stabiele en reproduceerbare reagentia

De Yeasen qPCR monkeypox kit (Cat#13863ES) werd geselecteerd om 10 herhaalde tests uit te voeren voor lage, gemiddelde en hoge concentraties van positief, en 20 herhaalde tests voor negatieve controle (NC) en blanco controle (NTC). De resultaten tonen aan dat: FAM-kanaal De CV van positieve monsters is minder dan 3%, en de negatieve controle en blanco controle hebben geen piek- en geen staartfenomeen; de Ct-waarden van VIC-kanaal NC zijn allemaal minder dan 35, CV is minder dan 0,3%, en NTC heeft geen piek- en geen staartfenomeen, en de herhaalbaarheid is goed.

Figuur 14. Herhaalbaarheidstest (FAM)

Figuur 15. Herhaalbaarheidstest (VIC)

7. Productbestelling

Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd., opgericht in 2014, is een hightechbedrijf dat zich bezighoudt met R&D en productie van grondstoffen voor enzymtools en antigeenantilichamen. De producten omvatten moleculaire diagnostische enzymen, eiwitten en antilichamen die worden gebruikt in farmaceutische producten, voedselveiligheidstesten, fokkerij, justitie en andere industrieën. Wij streven ernaar om klanten in de life sciences-sector te voorzien van hoogwaardige producten en diensten. De richtlijnen voor de aankoop van producten voor Monkeypox Virus zijn als volgt:

Tabel 1.Gerelateerde producten

Referenties

[1] Chinees Centrum voor ziektebestrijding en -preventie: Gezondheidstips voor apenpokken
[2] CDC:Over Monkeypox | Monkeypox | Pokkenvirus | CDC
[3] Yulin Evening News: De bron van het eerste geval van apenpokken op het vasteland van China is geïdentificeerd! Noodherinnering aan Guangxi Disease Control