Isothermal Nucleic Acid Amplification Technology (INAAT) wordt voornamelijk gebruikt in de moleculaire biologie om nucleïnezuren te identificeren en analyseren. Het wordt voornamelijk gebruikt voor DNA, RNA, cellulaire eiwitten, ionen, moleculen, enz. INAAT biedt een snelle, gevoelige en nauwkeurige diagnose van genetische en infectieziekten. De versterkte producten kunnen worden gebruikt in biosensoren, bio-imaging en biomedische toepassingen. Daarnaast wordt INAAT gebruikt om verschillende ziekten te detecteren, zoals influenza, HIV, tuberculose, chlamydia, gonorroe (CT/NG), hepatitis A en hepatitis B, enz. Afhankelijk van de technologie kan isothermale amplificatie worden onderverdeeld in LAMP, RPA, CPA, SDA, RCA, HDA, enz. Dus wat is LAMP? Wat zijn de voordelen van RT-LAMP?

1. Wat is LAMP?
2. Wat zijn de voordelen van RT-LAMP?
3. Wat zijn de kenmerken van de "Cat#13762 RT-LAMP Kleurstofanalysekit (UDG plus)"?
4. Wat zijn de kenmerken van de "Cat#13906 RT-LAMP pH Sensitive Dyestuff Kit"?
5. Kan het gevriesdroogd worden tot gevriesdroogde kralen?
6. Welke producten kunnen wij aanbevelen?

1. Wat is LAMP?

LAMP is momenteel een veelgebruikte technologie op het gebied van isothermische amplificatie. Het gebruikt 4-6 primers die 6 specifieke regio's op het doelgen kunnen identificeren en vertrouwt op de sterke strand displacement-activiteit van Bst DNA-polymerase. De interne amplificatie van het doelproduct kan 10 bereiken⁹-10¹⁰ tijden. Er zijn veel LAMP-detectiemethoden, waaronder de kleurstofmethode, pH-colorimetrische methode, troebelheidsmethode, HNB, calceïne, enz. De nieuw ontwikkelde fluorescentiemethode en pH-detectiekits van ons bedrijf hebben een hoge gevoeligheid, goede primer-toepasbaarheid en uitstekende prestaties in specificiteit, tolerantie en stabiliteit. Vergeleken met soortgelijke producten heeft het duidelijke voordelen.

2. Wat zijn de voordelen van RT-LAMP?

Eenvoudig te bedienen: korte reactietijd, lage eisen aan de laboratoriumomgeving, kan worden gebruikt met microfluïdische chips of draagbare detectoren voor snelle detectie;
Gevoeligheid: 50 kopieën/T, 25 μL systeem;
Goede toepasbaarheid van primers: N-2 primer, E gen primer, interne referentie primer amplificatie, etc. hebben een goede toepasbaarheid;
Specificiteit: 48-wells NTC heeft helemaal geen pieken en de specificiteit is sterk;
Tolerantie: goede tolerantie voor sommige nucleïnezuurvrijmakende middelen;
Hoge stabiliteit: stabiel bij 37°C gedurende 5 dagen met een goede stabiliteit en kan meer dan 10 keer herhaald invriezen en ontdooien weerstaan;
Marktvoordeel: De prestaties zijn beter dan die van vergelijkbare binnenlandse en buitenlandse concurrerende producten en de kosteneffectiviteit is hoog.

3. Wat zijn de kenmerken van de "Cat#13762 RT-LAMP Dye Assay Kit (UDG plus)"?

3.1 Hoge gevoeligheid

Figuur 1. Gevoeligheidstest

Rood: 50 kopieën/T, reactie minder dan 15 minuten
Blauw: 25 kopieën/T, respons minder dan 15 minuten
De twee kopie-aantallen van 50 kopieën/T en 25 kopieën/T werden respectievelijk getest. De testresultaten lieten zien dat binnen 15 minuten de resultaten van 50 kopieën/T beter presteerden en de detectiegraad 100% bereikte.

3.2 Geschiktheid van primer

Figuur 2. Detectie van geschiktheid van N5-vergrendelde nucleïnezuurprimers

Paars: Yeasen Blauw: N Bedrijf

Figuur 3.N primer geschiktheidstest

Groente: Yeasen Rood: N-bedrijf

Figuur 2, Figuur 3: Bij de specifieke detectie van N5-vergrendelde nucleïnezuurprimers en N-primers, volgens 50 kopieën/T, werd de overeenkomstige detectie uitgevoerd met behulp van Yeasen en N-merken. De resultaten toonden aan dat de toepasbaarheid van N5-vergrendelde nucleïnezuurprimers beter was dan die van N-merken. De toepasbaarheid van N-primers is hetzelfde voor de twee producten.

Figuur 4. Detectie van geschiktheid van ACTIN-primers

Paars: Yeasen Blauw: N Bedrijf

15 ng van 293DNA werd getest op geschiktheid voor ACTIN-primers met behulp van Yeasen en N-merken. De resultaten toonden aan dat Yeasen was uitstekend toepasbaar.

3.3 Specificiteit

Figuur 5. 48-well NTC-specifieke test

Detectie met 48 wells NTC werd gebruikt voor de specifieke detectie van het product. Er werd geen piek gedetecteerd, wat aangeeft dat de specificiteit beter was.

3.4 Tolerantie

Figuur 6. Nucleïnezuur-releasertolerantietest

Rood: Matrix DEPC H₂O
Groen: 50% elk van nucleïnezuurvrijgavemiddel en DEPC H₂O
Blauw: 100% nucleïnezuurvrijgavemiddel
Matrix DEPC H gebruiken₂O, nucleïnezuurvrijgavemiddel en DEPC H₂O met 50% en 100% nucleïnezuurvrijgavemiddel werden respectievelijk getest. De resultaten tonen aan dat dit product een uitstekende tolerantie heeft voor nucleïnezuurvrijgavemiddelen.

3.5 Stabiliteit

Figuur 7. Stabiliteitstesten bij dezelfde temperatuur

Rood: 37℃ 0 dag Blauw: 37℃ 1 dag Groen: 37℃ 3 dagen Paars: 37℃ 5 dagen
0 dagen bij 37°C als controle en stabiliteitstesten werden uitgevoerd gedurende 1, 3 en 5 dagen bij dezelfde temperatuur, wat aangeeft dat het nog steeds een relatief stabiel effect kan behouden bij 37°C gedurende 5 dagen.

Figuur 8. -20℃ herhaalde vries-dooi stabiliteitstest

Rood: Herhaal vriezen-ontdooien 0 keer
Blauw: Herhaal 5 keer invriezen-ontdooien
Groen: Herhaal 10 keer invriezen-ontdooien

Figuur 9. Herhaalde vries-dooistabiliteitstest met droogijs

Rood: Herhaal vriezen-ontdooien 0 keer
Paars: Herhaal het invriezen-ontdooien 5 keer
Herhaalde vries-dooi stabiliteitstest bij -20°C en droogijs. Er werd vastgesteld dat de stabiliteit van de vries-dooi 10 keer werd herhaald bij -20°C en 5 keer op droogijs.

3.6 Vergelijking van vergelijkbare producten

Figuur 10. Vergelijking van de effecten van vergelijkbare producten

Rood: Yeasen Blauw: Merk N1  Groen: Merk N2
Met behulp van de primer N-genprimer, in het geval van 50 kopieën/T, met behulp van Yeasen, merk N1 en merk N2 voor productvergelijking verificatie, Yeasen producten presteerden goed.

6. Welke producten kunnen wij aanbevelen?

De producten die door Yeasen zijn als volgt.

Tabel 1.Productinformatie