Afrikaanse varkenspest (ASF) is een acute, ernstige en zeer besmettelijke infectieziekte die wordt veroorzaakt door het Afrikaanse varkenspestvirus (ASFV) dat tamme varkens of wilde zwijnen infecteert. De morbiditeit en mortaliteit kunnen oplopen tot 100%, wat de wereldwijde varkensindustrie ernstig in gevaar brengt en onberekenbare economische verliezen veroorzaakt. De Wereldorganisatie voor diergezondheid (OIE) noemt het een meldplichtige dierziekte.

Momenteel is er geen vaccin of effectieve behandeling voor Afrikaanse varkenspest. Snelle en nauwkeurige diagnose van Afrikaanse varkenspest door middel van laboratoriumdiagnostische methoden is cruciaal om de verspreiding van de ziekte te voorkomen. qPCR als belangrijkste hulpmiddel voor routinematige diagnose van ASF wordt aanbevolen door de OIE.

Yeasen is een fabrikant met een rijke ervaring in IVD-grondstoffen R&D. In het licht van de Afrikaanse varkenspest, Yeasen reageert positief en werkt samen met klanten om drie volledige procesoplossingen te ontwikkelen van extractie tot detectie van het Afrikaanse varkenspestvirus. Dus wat zijn drie oplossingen? En wat zijn de toepassingen van deze oplossingen? Verder lezen...

Figuur 1. Yeasen Oplossingen voor detectie van Afrikaanse varkenspest

Oplossing I: TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (UDG plus)(navraag）

Producteigenschappen

👍UDG anti-vervuilingssysteem, voorkomt effectief het risico van aerosolverontreiniging

👍Langetermijnstabiliteit van voorgemengde PCR-oplossing (mastermix + primers + probes) bij kamertemperatuur, waardoor de detectiemoeilijkheden aanzienlijk worden vereenvoudigd

👍Hoge versterkingsefficiëntie en goede herhaalbaarheid

👍Geschikt voor multi-platform en multi-systeem

Casus tonen

👉Langetermijnstabiliteit van voorgemengde PCR-oplossing
Cat#13171 werd gebruikt om de voorgemengde PCR-oplossing te configureren die 7 dagen op 37°C kan worden geplaatst en 15 keer herhaald kan worden ingevroren en ontdooid in de amplificatie van het ASF-plasmidesysteem. De resultaten toonden aan dat de Ct-waarde en gevoeligheid van de PCR-oplossing niet significant verschilden na plaatsing gedurende 7 dagen op 37℃, en de Ct-waarde veranderde niet significant na herhaald invriezen en ontdooien 15 keer.

Figuur 2. Cat#13171 TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (UDG plus)(Vraag) gebruikt in voorgemengde PCR-oplossing met lange termijn stabiliteit bij amplificatie van ASF-plasmidesysteem. 2A-Ct-waarde bij 37℃ gedurende 0 dagen en 7 dagen 2B-Gevoeligheid bij 37℃ gedurende 0 dagen en 7 dagen 2C-Stabiliteit na 15 keer invriezen en ontdooien

👉Stabiele en reproduceerbare reagentia
Vier verschillende batches van Cat#13171 werden geselecteerd om het ASFV-plasmidesysteemamplificatie-experiment 20 keer te herhalen. Er waren geen significante verschillen in Ct-waarden, met een CV van minder dan 1%.

Figuur 3.Herhaalbaarheidstest van Yeasen Cat#13171

👉Multi-platform multi-systeem toepasbaar
Yeasen Cat#13171 werd gebruikt om Afrikaanse varkenspest ASFV/ACT duale plasmiden te versterken op respectievelijk Bio-Rad CFX96, ABI Q5 en Slan platforms. Het is te zien dat Yeasen Cat#13171 is geschikt voor verschillende soorten instrumenten en de gegevens zijn betrouwbaar en stabiel.

Figuur 4. Bio-Rad CFX96 Real-Time PCR-systeem

Figuur 5. ABI Q5 Real-Time PCR-systeem

Figuur 6. Slan Real-Time PCR-systeem

Oplossing II:Universele TaqMan multiplex qPCR mastermix

Yeasen's Universal TaqMan multiplex qPCR master mix (Cat#11211) is diepgaand geoptimaliseerd voor efficiënte amplificatie van lage-concentratie templates met behulp van antilichaam-gemodificeerde Hot-Start Taq DNA polymerase en bijpassende multiple-plex buffer. Dit product ondersteunt tot 4-plex PCR reacties in een enkele buis en is ideaal voor genotypering en multiplex qPCR analyse.

Producteigenschappen

👍Sterke tolerantie voor bloedverontreinigingen, kan worden gebruikt met Yeasen Nucleïnezuurextractiereagens Cat#13720 Nucleïnezuurvrijgavereagens V2, ideaal voor directe qPCR
👍Zeer hoge gevoeligheid voor 3 kopieën/reactie, verbetert de detectienauwkeurigheid aanzienlijk
👍Langetermijnstabiliteit van voorgemengde PCR-oplossing (mastermix + primers + probes) bij kamertemperatuur, waardoor de detectiemoeilijkheden aanzienlijk worden vereenvoudigd

Casus tonen

👉Sterke tolerantie voor bloedverontreinigingen
Vergeleken met soortgelijke producten van andere merken, Yeasen Cat#11211 heeft een hogere tolerantie voor remmers in bloedmonsters. De resultaten toonden aan dat Yeasen Cat#11211 heeft een hoge tolerantie voor EDTA en natriumcitraat en kan 0,5% volbloed verdragen.

Figuur 7. Cat#11211 Universele TaqMan multiplex qPCR mastermix en mastermix van verschillende merken worden gebruikt voor ASF qPCR-oplossingen aangevuld met respectievelijk 3 mM EDTA (3A), 6 mM natriumcitraat (3B) en 0,5% bloed (3C).

👉Ultrahoge gevoeligheid voor 3 kopieën/reactie

De amplificatie van het ASFV-plasmide met 20 replicaten werd uitgevoerd op basis van de producten van verschillende merken. De resultaten van experimenten tonen aan dat de detectiesnelheid van Yeasen producten is hoger.

Figuur 8. Vergelijking van detectiepercentages tussen vergelijkbare producten van verschillende merken (3 exemplaren in het uiteindelijke systeem)

👉Lange termijn stabiliteit, stabiel gedurende 7 dagen bij kamertemperatuur

De PCR-oplossing van het ASFV/ACT dual plasmid-systeem kan stabiele prestaties behouden na 7 dagen bij 4℃, 25℃ en 37℃. Er is te zien dat de Ct-waarde en de fluorescentiewaarde niet significant veranderden.

Figuur 9. Stabiliteit van PCR-oplossing

Oplossing III: Isotherme versterking

YeasenDe producten van ondersteunen de isothermische versterkingstechnologie, waarmee ASF-detectie sneller en efficiënter kan worden uitgevoerd. Cat# 14402 Hieff™ Bst Plus DNA-polymerase (40 U/μL) is afgeleid van Thermophilic Geobacillus sp DNA Polymerase I, waarbij de 5'-3' exonuclease-activiteit ontbreekt.Dit product heeft een sterkere 5'-3' DNA-polymerase-activiteit, strengverplaatsingsactiviteit en dUTP-tolerantie, wat geschikter is voor isotherme amplificatiereacties tegen vervuiling, zoals LAMP, CPA, enz.

Producteigenschappen

👍Hoge versterkingsefficiëntie

👍Hoge opbrengstversterking

👍dUTP-tolerantie, kan worden gebruikt in combinatie met Cat#10303 Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG)(Vraag), hittelabiel, 1 U/μL om het risico op aerosolverontreiniging te voorkomen

Casus tonen

👉Superieur alternatief voor geïmporteerde merk N*-producten

Het amplificatieproces werd uitgevoerd met behulp van Bst DNA-polymerase van Yeasen en N* Company, respectievelijk. Er was geen significant verschil in Ct-waarde en fluorescentie-intensiteit tussen verschillende merken.

Figuur 10. Versterkingscurven van verschillende merken

Producten bestellen