Producttoepassingsscenario's

1. Verwijdering van resterende nucleïnezuren in biologische producten: Tijdens de productie van biologische producten, zoals virussen, vaccins en eiwitten, kan UltraNuclease worden toegevoegd om resterende nucleïnezuren af ​​te breken. Deze stap verhoogt niet alleen de opbrengst van virussen, maar vermindert ook aanzienlijk het gehalte aan resterende nucleïnezuren, waardoor de veiligheid en werkzaamheid van de geneesmiddelen wordt gewaarborgd.
2. Viscositeitsreductie: Door nucleïnezuren af ​​te breken, wordt de viscositeit van cellysaten verlaagd, wat filtratie-/ultrafiltratieprocessen tijdens de zuivering van celafgeleide deeltjes zoals virussen, AAV-vectoren en insluitlichaampjes vergemakkelijkt.
3. Verbeterde resolutie en recovery: bij ELISA, tweedimensionale elektroforese en immunoblottinganalyses verbetert het de resolutie en recovery.
4. Voorkomen van celaggregatie: UltraNuclease kan effectief de aggregatie van menselijke perifere mononucleaire bloedcellen (PBMC's) voorkomen.

Het effect van verschillende reactieomstandigheden op enzymactiviteit

Om de optimale bedrijfsomstandigheden voor UltraNuclease te onderzoeken, hebben we de effecten van verschillende buffersystemen op de enzymactiviteit bestudeerd.

Vergelijkende analyse van concurrerende producten (van bedrijf A)

De prestaties van de UltraNuclease komen overeen met die van Bedrijf A en het kan een vervangingseffect bereiken.

De kwaliteitsinspectienorm is conform de GMP-productienorm

Detectie-items	Kwaliteitsnormen	Detectiemethode
Enzymactiviteit	250-300 eenheden/uL	Universele substraatmethode
Specifieke activiteit	≥1.5×106 Eenheden/mg	Universele substraatmethode
Zuiverheid van eiwitten	≥99%	SDS-PAGINA
Protease	Voldoet aan de eisen	Universele substraatmethode
Bacteriële endotoxine	Voldoet aan de eisen	Gelmethode
Gastheer-eiwit	Negatief	ELISA-methode
Gastheer-DNA	Negatief	qPCR-methode
Steriel testen	Steriele groei	Algemene regel 1101
Detectie van pathogenen	Negatief (niet gedetecteerd)	Raadpleeg de interne methode
Mycoplasma-test	Negatief (niet gedetecteerd)	Raadpleeg de interne methode
Zware metalen testen	Voldoet aan de eisen	Algemene regel 0821

Om het gebruik van UltraNuclease te evenaren, Yeasen heeft ook onafhankelijk een specifieke detectiekit voor de UltraNuclease ontwikkeld, die effectief restenzym kan detecteren en risico's kan verminderen. De Yeasen De UltraNuclease Residual Detection Kit is ontwikkeld met verwijzing naar de Chinese Farmacopee <9101> Analytical Method Validation Guidelines uit 2020 en voldoet strikt aan de belangrijkste vereisten voor testen met meerdere parameters (lineair bereik, specificiteit, nauwkeurigheid, precisie, gevoeligheid, versnelde stabiliteit, enz.).

Residu UltraNuclease Detectie

In normale zuiveringsstappen wordt UltraNuclease eenvoudig verwijderd als onzuiverheden. Om de specifieke resthoeveelheid van almachtige UltraNuclease te detecteren, wordt het vaak gebruikt als een standaardproduct in de industrie en wordt een bijpassende ELISA-kit ontwikkeld.

De UCF.ME® UltraNuclease ELISA Kit onafhankelijk ontwikkeld door Yeasen neemt het principe van double-antibody sandwich enzyme-linked immunoassay (sandwich ELISA) over, dat nauwkeurig de resterende hoeveelheid UltraNuclease in monsters kan detecteren. De kit is stabiel in lineariteit, herhaalbaarheid, herstelsnelheid en specificiteit.

Beginsel van Yeasen UltraNuclease ELISA Kit (twee-site immuno-enzymetrische test)

Producteigenschappen:

Naleving van regelgeving: volledig gevalideerd volgens de wettelijke vereisten, validatierapporten zijn beschikbaar; Kwaliteitsborging: alle grondstoffen voor de kit zijn onafhankelijk ontwikkeld, wat kwaliteitscontrole garandeert;

Hoge gevoeligheid: kwantitatieve limiet zo laag als 23.5 pg/ml;

Hoge precisie: hoge herhaalbaarheid binnen batches en lage variabiliteit tussen batches;

Sterke specificiteit: geen kruisreactiviteit met andere gemanipuleerde celproteïnen

Prestatieparameters:

Productparameters	inhoud
Tijd van de test	3,5 uur
Bepaling van het testprincipe	Immuno-enzymetrische test op twee locaties
Signaalversterking	Biotine-streptavidinesysteem
Detectiegolflengte	450nm en 630nm
Gevoeligheid	23,5 pg/ml
Detectiebereik	0,047~3 ng/ml
Detectie object	UltraNuclease
Toepasselijk instrument	Moleculaire apparaten: M- en i-serie
Sollicitatie	Detectie van resterend UltraNuclease in zuiveringsprocessen van cel- en gentherapie en recombinante adeno-geassocieerde virusvaccins

Productgegevens:

Standaardcurve van de reagenskit:

Werkelijk monsterwinningsexperiment:

UltraNuclease werd onafhankelijk toegevoegd aan 5 μg/ml cellyse-oplossingen (HEK293, E. coli, CHO en Vero) met een uiteindelijke toegevoegde concentratie van 1,5 ng/ml. De nauwkeurigheid in verschillende celmonsters was uitstekend dan bij andere leveranciers.

Specificiteitsdemonstratie

Conclusie: De testkit heeft een hoge specificiteit zonder kruisreactie; paargewijze vergelijkingen, “*” Significant verschil met negatieve steekproef; “NS” Geen significant verschil met negatief monster.

Precisie:

Herhaalbaarheid:

Concentratie ng/mL	6 gedupliceerde datums op dezelfde plaat						CV-waarde
3	2.412	2.390	2.323	2.367	2.476	2.291	2,53%
1.5	1.780	1.883	1.884	1.908	1.876	1.883	2,19%
0,75	1.123	1.215	1.166	1.183	1.140	1.109	3,12%
0,375	0,691	0,706	0,708	0,722	0.722	0,679	2,21%
0,1875	0,449	0,462	0,453	0,460	0,447	0,433	2,13%
0,094	0,306	0,308	0,304	0,311	0,295	0,302	1,65%
0,047	0,242	0,241	0,240	0,241	0,256	0,240	2,37%
0	0,183	0,192	0,189	0,187	0,189	0,189	1,43%

Conclusie: Er werden 6 duplicaten getest bij elke concentratie op de standaardcurve, en alle CV% waren lager dan 5%.

Tussenliggende precisie:

Tussenliggende precisie
Monsterconcentratie	1,5 ng/ml	0,375 ng/ml	0,094 ng/ml
Analist 1	1.388	0,382	0,079
Analist 2	1.458	0,363	0,068
Analist 3	1.318	0,37	0,063
Gemiddeld	1.388	0,372	0,07
SD	0,070	0,010	0,008
CV-waarde	5,04%	2,59%	11,69%

3 analisten voeren het UCF.ME™ UltraNuclease ELISA-experiment uit en de CV% was lager dan 15%

Productinformatie:

Productnaam	Product nummer	Productspecificaties
UCF.ME®UltraNuclease GMP-kwaliteit (Benzonase)	20157ES25/50/60/80/90	25KU/50KU/100KU/1MU/5MU
UCF-certificaat.ME® UltraNuclease ELISA-kit	36701ES59	96T

Andere gerelateerde producten

Productnaam	Product nummer	Productspecificaties
Zout Actieve UltraNuclease GMP-kwaliteit	20159ES25/50/60/80/90	25KU/50KU/100KU/1MU/5MU
Zout Actieve UltraNuclease ELISA-kit	36703ES96	96T