Beschrijving
Hifair™ Multiplex One Step RT-qPCR-sondekit (UDG Plus) is een multiplex kwantitatieve PCR-kit op basis van RNA als template. Tijdens het experiment werden reverse transcriptie en kwantitatieve PCR in dezelfde buis uitgevoerd, wat de experimentele operatie vereenvoudigde en het risico op contaminatie verminderde.
In deze kit werd de eerste streng cDNA efficiënt gesynthetiseerd door hittebestendige HifairTM V Reverse Transcriptase en kwantitatief versterkt door UNICON™ HotStart Taq DNA Polymerase. De kit bevat voornamelijk geoptimaliseerde MP-buffer, enzymenmix, etc. De bufferoplossing bevat al Mg2+ en dNTP. Bovendien worden de factoren toegevoegd die effectief de niet-specifieke PCR-amplificatie kunnen remmen en de amplificatie-efficiëntie van meerdere qPCR-reacties kunnen verbeteren, wat de amplificatie-efficiëntie kan garanderen en tot meerdere amplificatiereacties kan uitvoeren. Het dUTP/UDG-systeem werd toegevoegd om het risico op aerosolverontreiniging effectief te voorkomen.
Functies
1. Ggrote veelzijdigheid: Het is geschikt voor qPCR-amplificatie en detectie van nucleïnezuren van pathogene micro-organismen, menselijke genomen, planten en andere soorten.
2. Hoge gevoeligheid: Het zorgvuldig geoptimaliseerde buffersysteem verbetert de detectiegevoeligheid van sjablonen met een lage concentratie tot 250 kopieën/ml.
3. dUP/UDG-systeem: dUTP/ Hitte-labiel UDG anti-vervuilingssysteem wordt geïntroduceerd om aerosolvervuiling van producten efficiënt af te breken, vals-positieve resultaten te verminderen en authentieke resultaten te garanderen.
4. Steuningaan snel programma: compatibel met snel 40 min programma.
5. Super stabiliteit: stabielen bij 37℃ gedurende 14 dagen, 10 keer herhaaldelijk invriezen en ontdooien.
Componenten
Componenten | Naam | 16630ES60 (100 ton) | 16630ES80 (1000 ton) | 16630ES92 (10000 ton) |
16630-A | 5×Hifair MP-buffer | 500 μL | 5 ml | 50 ml |
16630-B | Hifair-enzym Mengen | 100 μL | 1 ml | 10 ml |
16630-C | GC-Verbeteraar | 500 μL | 5 ml | 50 ml |
Opmerking: 1) 5×HifairTM MP-buffer is de afkorting van HifairTM V Multiplex Eén Stap RT-qPCR Probe Buffer, waaronder dNTP's, dUTP, Mg2+, stabilisatoren, versterkers en meer.
2) Hifair Enzymmix bevat voornamelijk hittebestendig HifairTM V-reverse transcriptase, UNICONTM HotStart Taq DNA-polymeren en UDGas.
3) GC enhancer is optioneel. Vind de GC enhancer gratis versie: Cat: 16901ES.
4) De 16630-A en 16630-B zijn gelijkwaardig aan 16901-A en 16901-B, respectievelijk.
Specificaties
PCR-methode | Eén-staps RT-qPCR |
Type monster | RNA |
Opslag
THij product zou moeten zijn opgeslagen bij -25°C~-15°C voor 1 jaar.
Cijfers
Figuur 1. Hoge detectiegraad
Instructies
1. Reactie Samenstelling
Componenten | Volume ((μL) | Eindconcentratie |
5×Hifair™ MP-buffer | 5 | 1 × |
Hifair Enzym Mix | 1 | - |
GC-Verbeteraar | 0-5 | - |
Primermix (10 μM) | 0,4 elk | 0,16 μM |
Sondemix (10 μM) | 0,2 elk | 0,08 μM |
RNA | 1-5 | - |
RNase-vrij H2O | tot 25 | - |
Opmerking:Zorg ervoor dat u het mengsel goed mengt voor gebruik. Voorkom dat er te veel luchtbellen ontstaan door hevige trillingen.
a) Primerconcentratie: Inleiding mix inclusief multiplex primer, Afhankelijk van de situatie kan de optimale primerconcentratie tussen 0,1 en 1,0 μM liggen.
b) Sondeconcentratie: Sondemix met multiplex-sondelabelverschillen in fluorescerende groepen. Afhankelijk van de situatie kan de optimale sondeconcentratie tussen 0,05 en 0 liggen.5 μM.
c) Templateverdunning: qPCR is zeer gevoelig en het wordt aanbevolen om de template te verdunnen. De controle-Ct-waarde is geschikt tussen 20 en 35.
D) Systeemvoorbereiding: un head met filterelement. Vermijd kruisbesmetting en aerosolbesmetting.
2. Geoptimaliseerd fietsprotocol
Reactiefase | Temperatuur | Tijd | Cyclus | |
1 | Omgekeerde transcriptie | 50°CA | 15 mijn | 1 |
2 | Initiële denaturatie | 95°C | 5 minuten | 1 |
3 | Versterkingsreactie | 95°C | 15 seconden | 45 cycli |
60°CB | 30 secondenC |
Opmerking:een) Romgekeerde transcriptie: De temperatuur kan 42 selecteren°C of 50°C gedurende 10-15 minuten.
b) Amplificatiereactie: De temperatuur wordt aangepast op basis van de Tm-waarde van de ontworpen primers.
C) Fluorescentie signaal acquisitie: Stel de experimentele procedure in volgens de vereisten in de handleiding van het instrument.
Betaling en beveiliging
Uw betalingsinformatie wordt veilig verwerkt. We slaan geen creditcardgegevens op en hebben geen toegang tot uw creditcardinformatie.
Navraag
Misschien vind je het ook leuk
FAQ
Het product is alleen bedoeld voor onderzoeksdoeleinden en is niet bedoeld voor therapeutisch of diagnostisch gebruik bij mensen of dieren. Producten en inhoud worden beschermd door patenten, handelsmerken en auteursrechten die eigendom zijn van
Voor bepaalde toepassingen zijn mogelijk aanvullende intellectuele eigendomsrechten van derden vereist.