- Modelo de colite
- Modelo animal de pancreatite aguda
- Modelo de Doença Diabética
- Modelo de artrite reumatóide
- Modelo de hipertensão
Modelagem de colite
EU. História de DSS moldagem
No presente, lá são vários animal modelos largamente usado para estudar o etiologia e patogênese de inflamatório intestino (DII) e para testar a eficácia de medicamentos recentemente desenvolvidos, etc. Em particular, o Sal de Sódio de Dextrano Sulfato (DSS MM:36000~50000) modelo de ulcerativo colite (UC) é o maioria largamente usado. Em especial, o Dextrano Sulfato Sódio Sal (DSS MW:36000~50000) modelo de colite ulcerativa (CU) é o mais amplamente utilizado.
II. Características de o UC modelo construído por DSS
Dois modelos de colite aguda e crônica podem ser feitos dando aos animais diferentes concentrações de DSS (MW:36.000~50.000) solução aquosa livremente, de acordo com o tempo de dosagem e o ciclo de dosagem. Os sintomas deste modelo eram muito semelhante para aqueles de humano UC, qual eram diarréia, semelhante a muco fezes, fecal oculto sangue, sangrento fezes com olhos nus, perda de peso, mobilidade reduzida e deterioração da cor da pelagem.
Mesa 1 Histológico características de DSS modelo de colite
DSS Colite Modelo Categorias | Agudo fase colite modelo | Crônico estágio colite modelo |
histológico mudar | Cólon congestionamento, edema, encurtamento, fragilidade, aumentou peso-para-comprimento razão | Significativo encurtamento de o cólon |
Desenvolvimento de variando graus de colônico úlceras | Mucosa espessamento, ampliado linfa nós | |
Mucosa edema, em concha célula perda, cripta inchaço perturbação | Ausência de em concha células, ausência de fossa da cripta | |
O mucosa e submucosa mostrar variando graus de inflamatório célula infiltração, dano celular epitelial | Pólipos adenomatosos, semelhantes a tumores mudanças em um pequeno percentagem de animais |
III. Vantagens de o DSS UC modelo
1, o sintomático manifestações são extremamente semelhante para humano UC, qual pode ser usado para estudar o mecanismo de ocorrência e desenvolvimento de colite aguda e crônica, bem como para o estudo da eficácia de medicamentos.
2.A modelagem método de livre bebendo DSS aquoso solução é simples e fácil, com alto modelagem avaliar e alto repetibilidade.
3. Com diferentes concentrações de DSS, tempos de dosagem e frequências de dosagem, dois modelos de colite, aguda e crônica, podem ser realizados. longo duração de o modelo reflete o dinâmico processo de agudo para crônico transformação e resolve o problema de cronificação e manutenção da CU, o que é incomparável a muitos modelos anteriores.
4, uma variedade de gêneros pode ser modelada: camundongos, ratos, peixes-zebra, porcos, moscas-das-frutas e assim por diante.
5. Combinado com azoximetano (AOM) (Cat# 60751ES), pode ser usado para induzir câncer associado à colite (CAC) em um modelo animal, que simula com sucesso o processo de CAC induzido por DII.
4. Exemplo de DSS UC construção de modelo
1. Modelagem de mouse1) BALB/c ratos, fêmea, 6-8 semanas, 25 g;
2)3% DSS bebendo água era configurado com estéril água e então filtrado através um 0,22 um membrana;
3) O ratos eram dado um bebida contínua para 7 dias e ELE manchado;
4) Experimental resultados: o tecidos do ratos eram edematoso e congestionado, e havia inflamação óbvia.
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Figo. 1 ELE coloração resultados de DSS agudo colite seção
2.Modelagem de peixe-zebra1) Peixe-zebra embriões eram cultivado em E3 meio de cultura embrionário contendo azul de metila no 28,5 ℃ até 1 dpf;
2) 0,5% DSS bebendo água era configurado com E3 médio e então filtrado através de um 0,22 um membrana filtrante;
3) Peixe-zebra eram tratado com 0,5% DSS de 3 dpf para 6 dpf.
4) Experimental resultados: todos 0,5% DSS tratamentos medicamentosos resultou em escurecimento de fígado de peixe-zebra cor e estresse inflamatório.
Figura 2 DSS causa uma resposta inflamatória no fígado do peixe-zebra
3. Moldagem de porco
1) Quatro para cinco dia velho Yorkshire leitões, experimental grupo: perfundido com DSS, controlar grupo: perfundido com salina
2) Diário ingestão de 1,25g DSS/kg por leitão, infundido para 5 dias
3) Experimental resultados: Depois instilação de DSS, o plasma D-manitol absorção avaliar de o experimental grupo era significativamente mais alto que que de o controlar grupo, indicando que o leitões mostrou sintomas de enterite visível para o nu olho.
Figura 3 DSS induziu maior concentração de D-manitol em leitões do que em controles
4.Drosófila modelagem
1) Fêmeas de Drosophila de 5 a 10 dias de idade foram colocadas em um frasco vazio contendo frascos de 2,5 × 2,5 × 1 cm em cultura com meio de alimentação de papel cromatográfico (Fisher) de 3,75 cm umedecido com solução de sacarose a 5%;
2) Os meios de alimentação contendo diferentes componentes foram preparados separadamente com solução de sacarose a 5%, e as categorias incluíram 3% de DSS cada e 25 μg/ml de bleomicina;
3) As drosófilas foram colocadas em frascos contendo papel cromatográfico e incubadas a 29°C por três dias, período durante o qual as drosófilas sobreviventes foram transferidas diariamente para frascos vazios contendo meio fresco;
4) Resultados experimentais: DSS tem função letal e induz proliferação de células precursoras de ISC.
Figura 4 DSS induz proliferação de células precursoras de ISC em Drosophila
IV. Como para avaliar o sucesso de modelagem?
1.DoençaAtividade Índice (DAI pontuação)Três aspectos eram avaliado e pontuado: peso, fecal consistência, e fecal oculto sangue, e o DAI pontuação era o soma de os três indicadores.
Tabela 2 Regras de pontuação DAI
pontuação (do aluno trabalhar) | Percentagem de peso perda | fecal viscosidade | fecal sangue oculto |
0 | 0 | normalidade | negativos |
1 | 1-5% | macio banco | azul claro |
2 | 5-10% | semelhante a muco banco | azul (cor) |
3 | 10-20% | solto, fezes líquidas | Azul profundo |
4 | >20% | / | Fezes com sangue a olho nu |
2.Pontuação de histológico mudanças
Histológico mudanças eram marcou como o soma de o acima, e linfa nó formação era não marcou em o agudo colite modelo. O método padrão para análise histológica foi a coloração HE (Cat. NO: 60524ES60).
Tabela 3 Pontuações de alterações histológicas
pontuação (de estudar N.T. trabalhar ) | Úlceras (número) | Epitelial mudanças celulares | infiltrado inflamatório | Linfonodos (nºs.) |
0 | 0 | Normal | Nenhum | Nenhum |
1 | 1 | Ausência de em concha células | Pericriptal infiltração | 1 |
2 | 2 | Grande eliminação de células em concha | Infiltração de o muscular camada de o mucosa | 2 |
3 | 3 | fossa da cripta | Infiltração generalizada do muscular camada de o mucosa com espessamento da mucosa | 3 |
4 | >3 | Grande ausência ou polipoide regeneração da cripta fossa | submucosa infiltração | >3 |
3. Cólon comprimento
Colônico comprimento encurtamento era detectável sobre dia 8 em o agudo colite modelo; isto era mais pronunciado em o crônico colite modelo.
4.Resumo
DSS UC animal modelo construção deve ser precedido por pré-testes para sentir o modelagem condições, e isto é recomendado que os pré-testes sejam conduzidos com 8 a 10 amostras em cada grupo, e um grupo de controle deve ser criado. Normalmente, o aparecimento de perda de peso, fezes moles, diarreia, fezes com sangue ou sangue oculto nas fezes, ulceração podem ser consideradas como o medicamento DSS é eficaz e a modelagem é bem-sucedida.
VI.Yeasen DSS Modelagem Caso Estudar
DSS pode construir com sucesso modelos de UC com resultados comparáveis aos de marcas importadas.
Objetivo: Para comparar o extensão de mudar em corpo peso de ratos afetado por Induzido por DSS agudo colite de diferente fabricantes.
Rato tipo: camundongos BALB/c;
Modelagem protocolo: 2% DSS concentração, contínuo fluxo livre bebendo para 1 semana.
Conclusão: O tendência de corpo peso perda induzido por
E nós encontrado que o agudo colite modelagem tempo é principalmente concentrado em sobre 7 dias, o efeito é muito significativo. O A tabela a seguir contém os dados de feedback de alguns clientes.
Tabela 4 Modelagem de diferentes tipos de enterocolite com DSS
Mofo | Modelo | Moldagem Soluções | Moldagem resultados | Testemunhos |
colite aguda | BALB/c ratos, fêmea, 6-8 semanas, 25 g | 3%-5% DSS para 7 dias de contínuo de fluxo livre consumo | Dia 5 apresentação com encurtado cólon comprimento, coloração HE e marcado inflamação | Velocidade de modelagem rápida e curta tempo. Em conformidade com o características de o agudo colite modelo |
C57BL/6 ratos, macho, 8 semanas, 20 g | 3%-5% DSS por gavagem, administração contínua | Dia 5 presente, encurtado cólon comprimento, perda de peso, sangue nas fezes, diarreia | Alto modelagem avaliar e curto tempo. Consistente com agudo colite características do modelo | |
crônico colite | C57BL/6 rato, macho, 8 semanas, 22 g | 1-2% DSS por sonda gástrica, administração contínua | Dia 40 presente, encurtado cólon comprimento, peso perda, sangue em banco, diarréia | Alto modelagem avaliar. Consistente, com crônico colite modelo características |
Câncer de cólon | C57BL/6 rato, macho, 8 semanas, 21 g | 1%-2% DSS livremente disponível para 5 dias para 3 semanas | 14 semanas Presente, encurtado cólon comprimento, perda de peso, coloração HE, inflamação evidente | Alto modelagem avaliar. Consistente com modelo de câncer de cólon características |
Características do produto:
- Os sintomas são altamente semelhante para aqueles de humano UC: isto pode ser usado para estudar o mecanismo de colite e farmacodinâmica estudos.
- Alta formação de mofo taxa: grátis bebendo DSS aquoso solução, simples e fácil,
- pode construir variedade de colite modelos: agudo colite, crônico colite, pode também ser combinado com OMA para construir colite- modelo de câncer associado (CAC).
- É adequado para o modelagem de muitos tipos de animais: ratos, ratos, peixes-zebra, porcos, fruta moscas e então
- alta segurança:DSS pode ser degradado por o natural ecossistema, seguro para o ambiente; 6, alta pureza: alta pureza (98%), teor de enxofre 17-19%;
VII. Perguntas frequentes
Se agudo DSS colite modelo ou crônico DSS colite modelo, o gravidade e sucesso de enterite é relacionado para rato espécies (diferentes origens genéticas), concentração de DSS e ciclo de dosagem.
Tabela 5 Perguntas frequentes para modelagem de colite DSS
Possíveis problemas | Possíveis causas | Sugerido soluções |
Alto letalidade em ratos | DSS concentração também alto | Reduzido concentração de DSS administração |
Ratos com não ou baixo sinais de enterite | DSS concentração também baixo | Elevado DSS dosagem concentração; reduzido ciclo intervalo (10- 14 dias) |
Em o mesmo grupo de ratos, os sintomas de enterite variado muito | Tampa entupida | Verificar ratos bebem garrafas diariamente |
VIII.Produto Encomenda
Nome do produto | Número de catálogo | Especificação |
Sal de sódio de sulfato de dextrano (DSS) Dextran Sulfato de Sódio para Modelagem de Colite MW:36000~50000 |
60316ES25 |
25 g |
Sal de sódio de sulfato de dextrano (DSS) Dextran Sulfato de Sódio para Modelagem de Colite MW:36000~50000 |
60316ES60 |
100 g |
Sal de sódio de sulfato de dextrano (DSS) Dextran Sulfato de Sódio para Modelagem de Colite MW:36000~50000 |
60316ES76 |
500 g |
Sal de sódio de sulfato de dextrano (DSS) Dextran Sulfato de Sódio para Modelagem de Colite MW:36000~50000 |
60316ES80 |
1 kg |
Kit de coloração de hematoxilina e eosina Kit de coloração de hematoxilina eosina (H&E) |
60524ES60 |
2 x 100 mL |
Modelagem de pancreatite aguda em animais
Caeruleína é um gástrico regulatório molécula funcionalmente e composicionalmente semelhante para colecistocinina (CCK) que estimula secreção gástrica, biliar e pancreática. Rainfrogin pode ser usado para estudar vias de sinalização mediadas por NF-κB regulado positivamente proteínas como a Molécula de Adesão Intercelular (ICAM-1), fatores relacionados à inflamação como a NADPH oxidase e Janus quinase. E tem sido usado com sucesso no estabelecimento de modelos de pancreatite aguda (PA) em ratos, camundongos, cães e sírio hamsters.
Vantagem da moldagem:
- operação fácil
- menor custo
- prototipagem rápida
- vários modos de medicamento entrega
Mecanismos de modelagem:
- Regulação positiva de intercelular adesão molécula (ICAM-1) expressão em pancreático alveolar células por estimulante intracelular NF-KB. A superfície ICAM-1, por sua vez, promove a adesão de neutrófilos às células alveolares, aumentando assim a inflamação pancreática efeitos;
- Induzpancreatite por induzindo desregulação de digestivo enzima secreção e citoplasmático vacuolização principal para morte de células alveolares e edema pancreático;
- Ativação de promotor de inflamação fatores.
Relacionado Reagentes
Nome do produto | Número de catálogo | Especificação |
Caeruleína | 60321ES03 | 1 mg |
DMSO Dimetilsulfóxido (grau de cultura de células) | 60313ES60 | 100 mL |
Modelagem da doença diabética
Estreptozocina (STZ) é um antibiótico antitumoral produzido a partir de um certo tipo de fungo Streptomyces, Aureobasidium pullulans, e também pode ser sintetizado. É frequentemente usado no tratamento de câncer pancreático. Ao mesmo tempo, STZ tem um efeito destrutivo seletivo nas células β das ilhotas pancreáticas de certas espécies de animais, e pode induzir diabetes em muitos animais, geralmente usando ratos e camundongos para criar modelos animais. Tem sido amplamente estudado em anti-leucemia, metilação de DNA e anti-nefrite.
1. SOPs padrão para a construção de modelos de diabetes induzidos por STZ
1.1 Preparação dos animais
Tente usar animais machos, as fêmeas contêm hormônios que afetam a eficiência da modelagem. Alguns estudos mostraram que as fêmeas têm taxas de modelagem ruins e podem apresentar taxas de mortalidade mais altas do que os machos, especialmente para o tipo I.
O diabetes tipo I (diabetes tipo I) geralmente pode ser selecionado de acordo com o peso corporal, sendo recomendado 170-200 g para ratos e 17-22 g para camundongos, e a taxa de modelagem é relativamente ideal quando o STZ é injetado em jejum após 1 a 2 semanas de alimentação adaptativa.
Para diabetes tipo II, ratos (por exemplo, SD/Wistar) são selecionados com 4-5 semanas de idade, pesando 90-100g, e alimentados com dietas ricas em gordura (rico em açúcar) por 4-6 semanas para atingir um peso corporal de cerca de 240-280g. Para camundongos (por exemplo, camundongos C57/ICR/Kunming) são selecionados com 4-5 semanas de idade, pesando 16-20g, e alimentados com dietas ricas em gordura (rico em açúcar) por 4-6 semanas para atingir um peso corporal de cerca de 30-35g. Para animais recém-adquiridos ou aqueles que mudam de ambiente de alimentação, eles precisam ser alimentados com dietas regulares por uma semana antes de selecionar a idade/peso apropriado para mudar para ração rica em gordura (rico em açúcar). Para camundongos (por exemplo, camundongos C57/ICR/Kunming), selecione 4-5 semanas de idade, pesando 16-20g, e alimentados com dietas ricas em gordura (alto teor de açúcar) por 4-6 semanas para atingir um peso corporal de cerca de 30-35g. Para animais recém-adquiridos ou uma mudança de ambiente de alimentação, é necessário alimentar os animais de forma adaptativa com dietas normais por uma semana e, em seguida, selecionar os animais de idade/peso corporal semanais apropriados e mudar para dietas ricas em gordura e açúcar. Em termos de sucesso de modelagem, SD é recomendado para ratos e C57 para camundongos.
1.2 Alimentação antes da moldagem
Alimentação antes da modelagem, o modelo de diabetes tipo I é relativamente rápido, geralmente os ratos podem começar a modelagem após 2 semanas de alimentação adaptativa com ração normal; modelo de diabetes tipo II: indução de dieta rica em gordura mais uma pequena dose de STZ. Ração rica em gordura (rico em açúcar) foi fornecida antes da modelagem, o que induziu resistência à insulina.
1.3 Preparação de reagentes
①Alto teor de gordura (alto teor de açúcar) alimenta
Rico em gordura (alto teor de açúcar) alimentar ingredientes: contém 10% sacarose, 10% banha, 5% colesterol
Rico em gordura e alto teor de açúcar alimenta eram feito por combinando básico rato alimentar com sacarose, condensado banha e ovo gema em o seguinte proporção de massa: 18% de banha, 20% de sacarose, 3% de gema de ovo e 59% de ração básica.
② Preparação de STZ solvente - sódio citrato amortecedor
Preparação de Líquido UM e Líquido B: Pesar 2,1 g de cítrico ácido (FW:210.14) e adicionar isto para 100mL de bidestilado água fazer Líquido A. Pesar 2,94g de citrato de sódio (FW:294.10) e adicione-o a 100 mL de água bidestilada para fazer o Líquido B.
Preparação de sódio citrato tampão: Mistura UM e B líquido em um certo proporção (1:1.32 ou 1:1), pH metro para determinar o Valor de pH, ajuste o valor de pH para 4,2-4,5, ou seja, o tampão citrato de sódio necessário.
1.4 Preparação antes injeção
Antes preparando STZ injeção, STZ liofilizado pó era colocado em um seco esterilizado frasco, envolto externamente com alumínio frustrar ou papel alumínio, pré-resfriado em um gelo banho com sódio tampão citrato, e trouxe para o animal sala para backup.
Observação: Depois removendo o STZ liofilizado pó de os -20°C frigorífico, deixar isto seco e protegido de luz em sala temperatura por cerca de 10min para permitir para descongelar completamente (muito importante).
1.5 Preparação de solução de injeção
Ratos eram pesado e sangue glicose concentrações eram medido depois durante a noite jejum (não água). Ratos eram agrupado para preparar a injeção de STZ de acordo com o número de animais e a dose a ser injetada. Dissolver STZ a 1% concentração (p/V), filtrar e esterilizar, tendo em mente que o STZ esteja completamente dissolvido.
Atenção:
①STZ é instável e fácil para inativar, o restante reagente depois rápido pesagem ainda requer secagem e luz proteção, e recomenda-se embrulhá-lo com papel alumínio (ou papel alumínio) seco.
②Se você são não qualificado em injeção, fazer não dissolver o STZ no um tempo, e isto é recomendado que você dissolver o STZ em grupos, como 10 ou 15 ratos/grupo, dependendo do seu nível de habilidade.
③O STZ pode também seja pesado antecipadamente e dispensado em o quantidade necessária para agrupamento de animais.
1.6 Injeção
Injetar por via intraperitoneal ou na veia caudal de acordo com o peso corporal do animal em jejum.Se a operação de injeção técnica é não hábil, dois grupos deve ser injetado alternadamente, e o injeção deve ser concluído dentro de 30 minutos. Observação: a maioria das injeções requer injeção rápida.
Atenção:
Tipo Modelo de diabetes I: dose para ratos 70-65mg/kg
Tipo II diabético modelo: Ratos alimentado com alto açúcar e alto gordura para 1-2 meses eram tratado com STZ no um dose de 25-40mg/kg.
1.7 Depois injeção
Após a injeção de STZ, os animais devem receber água e comida suficientes (as características básicas de vida dos diabéticos). ratos), e o roupa de cama precisa para ser mudado diário para manter o jaula seco. Quando alimentação, pegar cuidado para evitar forte luz solar. Esterilizar sempre que possível.
Observação: Depois STZ modelagem, flutuações em aparente sangue glicose níveis mostrar 3 temporal fases, transitório hiperglicemia (1- 2h), hipoglicemia transitória (6-10h) e hiperglicemia persistente (>72h). A insulina e a glicose devem ser adequadamente suplementado.
2.Indicadores para avaliando o modelagem efeito de Induzido por STZ diabetes modelagem
O seguindo indicadores eram contado em comparação com o controlar grupo:
- Indicadores gerais: o fenómeno de excessivo bebendo, comendo e urinando, e peso perda;
- Outros indicadores: jejum sangue glicose, jejum sérum insulina nível, sérum insulina nível, insulina sensibilidade, glicose tolerância e assim por diante;
- Indicadores bioquímicos séricos: T-Cho, TG, HDL-C, LDL-C, CR, PÃO, Alt, etc.
- Lâminas patológicas: histopatológicas slides de o pâncreas
3. Explicação de o razões para o falha de o Induzido por STZ diabetes modelo
- 1. a qualidade da STZ é o chave, a pureza de STZ para modelagem deve não seja menos mais de 98% (teste HPLC).
- 2. Falha de STZ: deve ser armazenado seco, evitar umidade. Evite a colocação prolongada do pó em temperatura ambiente. STZs dissolvidos muito instável, com um meia-vida de 15 minutos no neutro Pagar atenção para dissolver STZ com ácido pH, de preferência em um gelo banho.
- Seja ou não o injeção intraperitoneal é injetado em os intestinos e outros órgãos.
Se o modelo é não acima para padrão, isto é recomendado que, se o modelo é não acima para padrão, isto deve ser reinjetado para outro 3 dias.
4. Explicação de o causas de Induzido por STZ alto mortalidade em ratos/camundongos
4.1.O rato peso é também baixo;
4.2. Suficiente bebendo a água deve ser garantido (insuficiente bebendo água pode facilmente levar a ratos mortos).
4.3. Alto nível de açúcar no sangue e baixo nível de açúcar no sangue causarão ratos mortos, evite ratos mortos podem ser injetados com insulina ou açúcar temporário suplementação, dois maneiras: ① Comumente alto sangue açúcar. Insulina suplementação método, suplemento alguns ação média insulina. Por exemplo, administre Novolin N ou NPH (insulina de zinco com proteína de peixe neutra), 2-3 unidades de cada vez, após 3-5 dias, o geral a taxa de mortalidade dos ratos será baixa; ②método de suplementação de açúcar, após ratos em jejum, a injeção foi em um hipoglicêmico estado, a moldagem de 4 horas após a injeção intraperitoneal de glicose a 20%, pode ser evitada devido à injeção de morte por hipoglicemia dos ratos;
4.4. Evitar animais de matando cada outro. Falta de comida e insuficiente água fornecer vai rasgar cada outro separado e mordidela sobre da sua própria espécie, portanto, comida e água devem ser fornecidas em quantidades suficientes, de preferência de duas maneiras.
4.5.Prevenir infecção. Diabético ratos urinar um muito, o roupa de cama é úmido e precisa para ser mudado frequentemente, então diabético ratos são mais propensos a infecções do que outros ratos, especialmente infecções do trato urinário e infecções abdominais. Antes e depois da invasão operações como injeção intraperitoneal, injeção subcutânea e coleta de glicose no sangue, deve-se prestar atenção esterilização. Para exemplo, tetraciclina (ou gentamicina oftálmico pomada) pode ser aplicado localmente para tratar o ferimento para evitar infecção após cada coleta de glicose no sangue.
5. Fatores afetando diabetes modelagem
Os fatores que influenciam a modelagem da doença do diabetes incluem a qualidade dos reagentes de modelagem STZ, a condição do animal e administração método. Entre eles, o principal Propriedades de o reagentes são pureza, estabilidade, solubilidade características, etc. O A condição animal inclui principalmente histórico genético, macho e fêmea, gênero, peso corporal, ambiente de alimentação, dieta estrutura, etc., e o modo de administração inclui tempo de administração, intervalo de administração e via de administração. Fatores diferenciados trazem efeitos de modelagem diferenciados.
6. O STZ modelagem metodologia ideias classificado fora
Padronização de o influenciando fatores é um garantia de alcançando o modelagem propósito e modelagem de estabilidade.Teoricamente, todos modelagem animal experimentos requer pré-experimentação.
No caso do modelo de diabetes induzido por STZ, a dosagem de STZ deve se referir aos resultados dos pré-testes e tentar não fazer medições cegas. seguir a dosagem na literatura ou outras para usar diretamente, como o peso médio dos ratos e jejum (estado de baixa glicose) resistência, a duração do jejum, o momento das injeções, bem como o processo de alimentação anterior, o tempo de glicose medição, e então sobre, são diferente, e isto é o maioria científico para determinar o dosagem Medidas em conformidade com deles próprios ratos experimentais através dos pré-testes. A maneira mais científica é determinar a dosagem do medicamento por pré-teste.
7.Alto Modelagem Sucesso Avaliar STZ Uso Diretrizes
STZ preservação, dissolução, dispensação e outros precauções para usar, ver o oficial site do reagentes relevantes.
8.Produtos
Alta taxa de sucesso: pureza ≥98% (CLAE determinação); estável qualidade, custo-efetivo, fornecimento pontual, pós-venda garantia.
Nome do produto | Número de catálogo | Especificação |
Estreptozocina | 60256ES60/76 | 100/500mg |
Estreptozocina | 60256ES80 | 1g |
Ácido Cítrico Monohidratado Ácido Cítrico Monohidratado | 60347ES25 | 25g |
Sal trissódico de ácido cítrico, di-hidratado | 60348ES25 | 25g |
(Para mais Informação sobre o usar de STZ moldagem, por favor verificar o especial artigo sobre site yeasen)
Produto Linha Publicado Artigos (parcial)- Li, , Dong, J., Pequeno, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fã, E. Intestino comensal derivado-valérico ácido protege contra radiação ferimentos. Intestino Micróbios,.2020 .1-18. SE=10,245
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Modelagem de artrite reumatóide
A artrite reumatoide (AR) é uma doença inflamatória crônica das articulações, caracterizada por sinovite persistente, inflamação sistêmica, acompanhada de erosão óssea e da cartilagem, que pode levar à anquilosação e deformidade das articulações.
O Adjuvante de Freund foi inventado por Jules Freund na década de 40 do século XX, que é uma emulsão de antígeno que mistura uma quantidade igual de solução aquosa de antígeno com um óleo e então adiciona um emulsificante para fazer água em óleo, que é o adjuvante mais comumente usado em experimentos com animais. O adjuvante de Freund é dividido em Adjuvante Completo de Freund (CFA) contendo Mycobacterium tuberculosis e Adjuvante Incompleto de Freund (IFA) sem Mycobacterium tuberculosis, que são usados principalmente para induzir o modelo de artrite CIA induzida por colágeno e o modelo de artrite AA induzida por adjuvante em camundongos.
1. Etapas de modelagem da artrite induzida por colágeno (CIA) (apenas para referência)1) Prepare os reagentes relevantes, preste atenção na configuração do grupo experimental e do grupo controle.
2) O colágeno bovino tipo 2 (CII.) foi dissolvido em solução de ácido acético glacial na concentração de 2 mg/mL a 4°C durante a noite.
3) O adjuvante incompleto de Freund foi suplementado com Mycobacterium tuberculosis inativado em uma concentração de 2-5 mg/mL para preparar o adjuvante completo de Freund. A concentração de Mycobacterium tuberculosis no adjuvante completo de Freund 60718ES fornecido pela Yisheng Biotech foi menor que 10 mg/mL.
4) A solução de ácido acético de colágeno bovino tipo 2 (CII.) é misturada com uma quantidade igual de adjuvante completo de Freund e emulsionada.
5) Injeção subcutânea de 0,1-0,2 mL no dorso de cada camundongo experimental.
6) Após 3 semanas, a mesma quantidade de adjuvante incompleto Fund foi misturada com solução de ácido acético de colágeno bovino tipo 2 (CII) e emulsionada, e cada camundongo foi injetado subcutaneamente na base da cauda para um total de 0,1-0,2 mL.
7) Exame patológico: camundongos do grupo experimental e do grupo controle foram removidos, 4% de formaldeído foi fixado por mais de 48 h, 5% de nitrato descalcificado por 2 h, infiltrado com xileno e embebido em parafina. Seções foram feitas, coloração HE e observadas com microscopia de luz convencional.
2.Etapas de modelagem de artrite induzida por adjuvante (AA) (apenas para referência)1) Prepare os reagentes relevantes, preste atenção na configuração do grupo experimental e do grupo controle.
2) Registro de observação: Geralmente, 7-12 dias após a segunda imunização, mais de 80% dos camundongos apresentam sintomas de artrite. De acordo com a vermelhidão, inchaço e atividade das partes articulares dos camundongos, os sintomas clínicos foram classificados, e os registros de observação foram observados antes do experimento e no 3º, 5º, 7º e 12º dias após o experimento, respectivamente, e a referência de classificação de grau é a seguinte:
Índice de notas | Sintoma |
0 | A atividade é normal, sem sinais de eritema e inchaço |
1 | Atividade normal, vermelhidão da pele, mas sem inchaço significativo |
2 | A atividade é ligeiramente afetada e há vermelhidão e inchaço nas patas e pés ou articulações dos joelhos |
3 | A atividade é afetada e as patas, dedos ou joelhos ficam levemente deformados, vermelhos e inchados |
4 | Movimento prejudicado, vermelhidão intensa e inchaço dos dedos dos pés ou joelhos, garras, dedos dos pés ou joelhos e rigidez ou deformidade |
3) Medição em camundongos: O volume das articulações dos membros posteriores dos camundongos antes e depois do experimento foi medido usando um medidor de volume de garra de camundongo, e o volume das articulações dos joelhos das patas traseiras de cada camundongo foi medido abaixo de cerca de 5 mm, repetido três vezes, o valor médio foi registrado e o teste foi realizado uma vez a cada três dias.
4) Exame patológico: camundongos do grupo experimental e do grupo controle foram removidos, 4% de formaldeído foi fixado por mais de 48 h, 5% de nitrato foi descalcificado por 2 h, xileno foi infiltrado e parafina foi embebida. Seções foram feitas, coloração HE e observadas com microscopia de luz convencional.
3.Perguntas frequentes
Problemas que podem surgir | Responder |
Qual é a diferença entre 60718ES Freund's Complete Adjuvant (CFA) e 60719ES Freund's Incomplete Adjuvant (IFA)? | O adjuvante completo de Freund (CFA) contém bacilos Mycobacterium tuberculosis inativados e mortos pelo calor, que estimulam uma forte resposta imunológica; o adjuvante incompleto de Freund (IFA) não contém Mycobacterium tuberculosis e estimula uma resposta imunológica mais fraca. |
Qual é a quantidade específica de BCG no 60718ES Freund's Complete Adjuvant (CFA)? | O conteúdo de BCG é inferior a 10 mg/mL. |
Quando usado para modelagem animal de artrite reumatoide, como escolher o adjuvante completo de Freund (CFA) e o adjuvante incompleto de Freund (IFA)? | Como os ratos são geralmente mais sensíveis que os camundongos, os camundongos geralmente são tratados com CFA, e os ratos também podem ser tratados com IFA, mas o CFA será melhor utilizado. |
Recomendações de produtos relacionados
Classificar | Nome do produto | Número de catálogo | Especificação |
Modelo de artrite reumatóide | Adjuvante Completo de Freund (CFA) | 60718ES | 10 mL/5x10 mL |
Adjuvante de Freund incompleto (IFA) | 60719ES | 10 mL/5x10 mL |
Modelagem hipertensiva
A hipertensão é caracterizada pelo aumento da pressão arterial sistêmica (pressão arterial sistólica e/ou diastólica), que se manifesta na pressão arterial sistêmica (pressão arterial sistólica ≥ 140 mmHg e/ou pressão arterial diastólica ≥90 mmHg), que é a doença crônica mais comum e o fator de risco mais importante para doenças cardiovasculares e cerebrovasculares, e é frequentemente acompanhada por síndromes clínicas com danos funcionais ou orgânicos ao coração, rins, cérebro e outros órgãos. O estudo da prevenção e tratamento da hipertensão é de grande importância prática, e o estabelecimento do modelo de hipertensão animal é uma parte importante do estudo da hipertensão.
Modelos de hipertensão animal podem ser divididos em modelos geneticamente relacionados e modelos não geneticamente relacionados. Modelos geneticamente relacionados incluem modelos animais hereditários e geneticamente modificados, enquanto modelos não geneticamente relacionados geralmente se referem a modelos induzidos por fatores ambientais, cirúrgicos e medicamentosos. Os sujeitos de pesquisa da modelagem geralmente incluem porcos, ovelhas, coelhos, cães, camundongos e ratos, etc., mas a maioria dos experimentos é modelada em camundongos e ratos, e os modelos de hipertensão animal comumente usados são o modelo SHR de ratos hipertensos espontâneos e o modelo de hipertensão induzida por medicamentos.
- Modelo de hipertensão hereditária animal
1.1 Modelo SHR de ratos espontaneamente hipertensos
Ratos hipertensivos espontâneos, também conhecidos como ratos SHR, têm uma incidência de hipertensão de quase 100% e são os modelos animais mais amplamente usados. A pressão arterial sistólica de ratos normais é de 110-120 mmHg, e a pressão arterial de ratos SHR começa a aumentar após 4-6 semanas de idade, e a pressão arterial é tão alta quanto mais de 200 mmHg após a reprodução.
Vantagens: A incidência de hipertensão é alta, o curso da doença é curto e as alterações patológicas dos órgãos-alvo durante o início podem ser observadas.
Desvantagens: O ciclo de reprodução é longo, as condições de alimentação têm certas exigências e o preço é um pouco mais caro do que o dos ratos comuns.
1.2 Modelo SHRsp de ratos com hipertensão espontânea propensos a acidente vascular cerebral
Ratos com hipertensão espontânea propensos a derrame, também conhecidos como ratos SHRsp, têm uma incidência de hipertensão de quase 100% e derrame de quase 80%. A pressão arterial em ratos SHRsp começou a aumentar após 4-6 semanas de idade, e pode atingir 200 mm Hg após 10-15 semanas de idade.
Vantagens: A incidência de hipertensão é próxima de 100%, e a incidência de acidente vascular cerebral é de 80%, o que é um modelo animal ideal para pesquisa de acidente vascular cerebral.
Desvantagens: longo ciclo de cultivo, melhoramento genético problemático, fácil mutação, quebra.
- Modelo de hipertensão induzida por drogas
2.1 Indução da angiotensina II (AngII.)
2.1.1 Métodos experimentais (apenas para referência)
Camundongos machos com idades entre 8 e 12 semanas foram injetados com angiotensina II e solução salina normal por injeção subcutânea com bomba osmótica, e a dose de AngII foi geralmente de 100 ng/(kg·min) por 2 a 4 semanas. O tempo de administração pode ser encurtado ou estendido de acordo com a situação real.
2.1.2 Imagens experimentais (trechos da literatura)
Aplicação 1: Angiotensina II. Em camundongos alimentados com solução de NaCl por 28 dias, o grupo experimental comparado ao grupo controle, a pressão arterial aumentou significativamente.
Figura 5 Alterações na pressão arterial e na frequência cardíaca em ratos (A é pressão arterial sistólica, B é pressão arterial média, C é pressão arterial diastólica, D é frequência cardíaca)
2.2 Indução de acetato de desoxicorticosterona (DOCA)
O acetato de desoxicorticosterona (DOCA) pode inibir o sistema renina-angiotensina, resultando em baixa atividade da renina plasmática, mediando assim um aumento na pressão arterial, geralmente por meio da implantação de uma bomba subcutânea de liberação prolongada de DOCA ou injeção de DOCA e adição de solução de NaCl para induzir a formação de hipertensão.
É principalmente aplicável à pesquisa do sistema renina-angiotensina (SRA) e do metabolismo da água e do sódio na hipertensão, e o modelo pode fazer a pressão arterial aumentar de forma estável e o método é simples.
2.2.1 Métodos experimentais (apenas para referência)
O rim esquerdo de ratos machos normais de 250-275 g foi ressecado, e o meio de borracha feito de DOCA e gel de sílica foi colocado sob a pele entre as escápulas em ambos os lados do rato, ou após o rim esquerdo ser removido, o DOCA foi injetado subcutaneamente a 50 mg/(kg·d) por dia, e deve-se observar que os ratos DOCA precisaram beber solução de NaCl a 1% durante o processo de alimentação, e a pressão arterial dos ratos foi medida após 3-5 semanas de operação.
2.2.2 Imagens experimentais (trechos da literatura)
Aplicação 1: Após a remoção do rim unilateral, foi adicionado DOCA, e os resultados mostraram que a pressão arterial dos camundongos no grupo controle foi relativamente constante, mas a pressão arterial dos camundongos no grupo experimental aumentou significativamente.
Figura 6 Diagrama das alterações da pressão arterial em ratos
2.3 Modelo animal de hipertensão induzido por éster metílico de N-nitro-L-arginina (L-NAME)
L-NAME é um inibidor competitivo da óxido nítrico sintase, uma substância ativa que promove a função endotelial e diminui a pressão arterial quando o óxido nítrico aumenta. L-NAME, um inibidor competitivo da óxido nítrico sintase, pode enfraquecer o efeito vasodilatador do óxido nítrico e levar à ocorrência de hipertensão. Portanto, um modelo animal de hipertensão causada por deficiência de NO de longo prazo pode ser estabelecido, e os objetos de pesquisa experimental do modelo são vistos principalmente em ratos.
É principalmente adequado para o estudo do sistema de óxido nítrico e do sistema cardiovascular na hipertensão, e o modelo pode fazer a pressão arterial aumentar de forma estável e contínua, e o método é simples.
2.3.1 Métodos experimentais (apenas para referência)
Ratos machos com idades entre 3 e 4 semanas foram injetados intraperitonealmente (ou administrados) com L-NAME na dose de 20 a 50 mg/(kg·d) e administrado uma vez ao dia durante 4 semanas, e o grupo controle foi injetado intraperitonealmente (ou administrado) apenas com água destilada, e as alterações dos ratos foram monitoradas diariamente.
Após o experimento, foram medidos o peso corporal, a pressão arterial, a frequência cardíaca, os índices bioquímicos séricos e outros índices bioquímicos do grupo experimental e do grupo controle.
2.3.2 Tabelas e imagens experimentais (trechos da literatura)
Aplicação 1: Após a inscrição, a pressão arterial do grupo modelo aumentou gradualmente com a extensão do tempo de ingestão de L-NAME e atingiu o padrão de hipertensão na 4ª semana, que foi significativamente maior do que a do grupo de controle correspondente.
Aplicação 2: A hipertensão foi formada após 4 semanas de irrigação em ratos, que foi significativamente maior do que a dos ratos no grupo de controle correspondente, e o extrato aquoso da semente de cássia pode reduzir a pressão e melhorar as lesões renais.
2.4 Comparação de modelos de hipertensão induzida por medicamentos
Modelo de hipertensão induzida por drogas | Angiotensina II. (O anjoII) | Acetato de desoxicorticosterona (DOCA) | Éster metílico de N-Nitro-L-Arginina (L-NAME) |
Descrição do método | Injeção subcutânea com bomba osmótica, AngII.a dose é geralmente 100 ng/(kg·min) | Primeiramente, o rim unilateral foi ressecado, e 50 mg/(kg·d) de DOCA foi injetado por via subcutânea, e solução de NaCl a 1% foi ingerida ao mesmo tempo. | A injeção intraperitoneal (ou gavagem) de 20-50 mg/(kg·d) de L-NAME, como beber solução de NaCl a 1%, pode acelerar a moldagem |
Ciclo do molde | 2-4 semanas | 3-5 semanas | 4-5 semanas |
Cenários de aplicação | Pesquisa sobre danos por estresse oxidativo e RAS | Estudos relacionados ao RAS e água sódica Pesquisa relacionada ao metabolismo | Sistema NO, pesquisa relacionada ao sistema cardiovascular |
Recomendações de produtos relacionados (Resumo)
Classificar | Nome do produto | Número de catálogo | Sespecificação |
Modelo de hipertensão | Cloridrato de L-NOME (HCl de L-NOME) | 52302ES | 100 mg |
Angiotensina II humana | 54041ES | 10 mg | |
Acetato de desoxicorticosterona | 54344ES | 50 mg/500 mg | |
Modelo de artrite reumatóide | Adjuvante Completo de Freund (CFA) | 60718ES | 10 mL/5x10 mL |
Adjuvante de Freund incompleto (IFA) | 60719ES | 10 mL/5x10 mL | |
Modelo de colite | Sal de sódio de sulfato de dextrano (DSS) MM:36000~50000 Grau de modelagem de colite DSS | 60316ES | 25 g/100 g/500 g/1 kg |
Modelo animal de pancreatite aguda | Caeruleína | 60321ES | 1 mg |
Modelo de Doença Diabética | Estreptozocina (STZ) | 60256ES | 100 mg/500 mg/1 g |
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