Pancreatite aguda (PA) é uma condição abdominal aguda comum na prática clínica, com etiologia complexa e uma taxa de mortalidade de 5% a 10%. A taxa de mortalidade para PA grave pode chegar a 20% a 30%. A patogênese ainda não é totalmente compreendida e não há métodos de tratamento específicos. Os métodos atuais para criar modelos animais de PA vivos incluem ligadura do ducto pancreático, fechamento da alça duodenal, injeção de punção do ducto biliar pancreático, injeção pancreática subcapsular, injeção pancreaticobiliar combinada com infusão intravenosa e injeção intraperitoneal de ceruleína combinada com lipopolissacarídeo.

Caeruleína é uma molécula reguladora gástrica que é funcional e composicionalmente semelhante à colecistocinina (CCK). Ela estimula a secreção excessiva de células acinares pancreáticas, causando um distúrbio de separação de tripsinogênio intracelular e hidrolases lisossômicas. A ativação ocorre de maneira dependente de catepsina B, e a atividade de enzimas pancreáticas pode levar ainda mais à ativação de proenzima, causando uma série de atividades de protease que levam a danos celulares. A resposta inflamatória causada pela autodigestão do tecido pancreático recruta células inflamatórias e libera fatores inflamatórios, que podem causar ainda mais respostas inflamatórias locais ou mesmo sistêmicas graves.

Figura 1. Estrutura química da caeruleína (CAS NO.17650-98-5)

Este modelo foi aplicado com sucesso em ratos, camundongos, cães e hamsters sírios etc., e é adequado para estudar autofagia prejudicada, sinalização patológica de cálcio e estresse do ER, nos quais o PA é caracterizado pela variação na quantidade de ceruleína, ajustando o número de injeções, resultando em diferenças no grau de gravidade.

Protocolo do modelo de AP induzido por Caeruleína

Preparação da solução de ceruleína

Dissolver 1 mg de ceruleína em 1 mL de solução salina. Esterilizar com 0,22 Filtro de membrana de μm e armazenar a -20 °C. Descongele antes de usar e dilua com solução salina para 5 μg/mL ou 10 μg/mL de solução de trabalho.

Preparação Animal

A ceruleína pode induzir PA na maioria dos animais, sendo usada principalmente em roedores (como ratos e camundongos).

Administração de medicamentos

O AP induzido por caeruleína é principalmente do tipo edematoso, que é mais usado no estudo de AP leve (MAP) e na conversão de MAP em SAP. Para pesquisa de SAP, a caeruleína é frequentemente combinada com outros compostos para atingir maior gravidade de AP, por exemplo, lipopolissacarídeo (LPS).

Os animais ficaram em jejum, mas puderam beber livremente 12 horas antes da cirurgia. Injeção intraperitoneal com Caerulein (20-100 μg/kg, geralmente 50 μg/kg) a cada hora por 7 h, seguida por uma injeção de 10 mg/kg de LPS.

Avaliação do modelo

1)Atividades de amilase e lipase séricas aumentadas.

2)Concentração elevada de NO no soro.

3) Patologia pancreática: edema do tecido pancreático com vacúolos, infiltração de células inflamatórias, necrose de células acinares focais e periductais.

4) Aumento da expressão de fatores inflamatórios no soro e no tecido pancreático.

Vantagens do modelo

O método é simples, fácil de copiar, boa repetibilidade e não invasivo.

UMcaso de aplicação(Cat#60321ES Caeruleína)

Figura 2. Modelo AP resultados relacionados em camundongos Balb / c (Número de identificação pessoal: 35339899, SE: 5.736)

Camundongos Balb/c foram injetados intraperitonealmente com 50 μg/kg de caeruleína (Yeasen, Cat#60321ES) sete vezes em intervalos de 1 hora, e LPS (10 mg/kg) foi administrado simultaneamente com a última dose para induzir SAP. Imagens de H&E pancreáticas e pontuação histológica (b), bem como níveis séricos de amilase (c), IL-6 (d) e ALT (e) foram avaliados.

Figura 3. Resultados do modelo AP correlação em camundongos Kunming (Número de identificação pessoal: 27579473, SE: 4.096)

Camundongos Kunming fêmeas foram injetados intraperitonealmente com 50 μg/kg de caeruleína (Yeasen, Cat#60321ES) quatro vezes em intervalos de 1 hora para induzir AP. Níveis de amilase, lipase e TNFα no soro (A), e imagens de H&E pancreáticas e pontuação histológica (C) foram avaliados.

Informações para pedidos

Nome do produto

Gato#

Especificação

Caeruleína

60321ES03

1 mg

LPS, de Escherichia coli O55:B5

60747ES08/10

5 mg/10 mg

LPS, de Escherichia coli O111:B4

60748ES08/10

5 mg/10 mg

Investigação