Visão geral
Coelenterazina é uma fluoresceína natural abundante na natureza e é a molécula de armazenamento de energia luminosa da maioria dos organismos luminescentes marinhos (mais de 75%). A coelenterazina pode ser usada como substrato para muitas enzimas luciferase, como a luciferase de rim marinho (Rluc), a luciferase secretada por Gaussia (Gluc) e fotoproteínas, incluindo aequorina e Obelia. Ao contrário do sistema luciferina/luciferase do vaga-lume, o sistema Coelenterazina/luciferase não requer trifosfato de adenosina (ATP), facilitando o estudo da biofluorescência in vivo. Portanto, a coelenterazina é comumente usada como substrato luminescente para ensaios de fluorescência baseados em ensaios de gene repórter e ensaios em animais vivos.
A principal Coelenterazina comercial atualmente sendo usada é a Coelenterazina nativa. Existem também muitos derivados de coelenterina, como Coelenterazina h, Coelenterazina 400a, Coelenterazina cp, Coelenterazina f, Coelenterazina hcp, Coelenterazina n equals são sintetizados. Teoricamente, essas celenterinas podem ser usadas nos mesmos experimentos, mas devido às suas diferenças em comprimento de onda luminoso, permeabilidade da membrana celular e eficiência quântica de luz, elas mostram diferentes efeitos experimentais na mesma aplicação.
Espécies de Coelenterazina
Também conhecido como ácido livre de Coelenterazina. É o substrato de muitas enzimas luciferase, como Renilla luciferase (Rluc) e Gaussia luciferase (Gluc), e também é o cofator da proteína luminescente de água-viva.
Cenários de aplicação: Detecção da concentração de íons de cálcio em células vivas, análise de relatório genético, estudo BRET (transferência de energia por ressonância bioluminescente), ELISA, HTS e detecção de quimioluminescência dos níveis de ROS em tecidos ou células, etc.
É o substrato de muitas enzimas luciferases, como a luciferase Renilla (Rluc) e a luciferase Gaussia (Gluc), e também é o cofator da proteína luminescente da água-viva.
Cenário de aplicação: A intensidade luminosa é mais de 10 vezes maior que a da Coelenterazina Nativa, sendo adequada para análise de genes repórteres e detecção de concentração de íons de cálcio em células vivas.
Coelenterazina hcp
É um dos derivados da Coelenterazina Nativa. A intensidade de fluorescência do complexo Coelenterazina hcp-Aequorina é 190 vezes maior que a do complexo Coelenterazina Nativa, com alto rendimento quântico e rápida formação de Ca2+ taxa de reação, que é muito adequada para a detecção de níveis de íons de cálcio.
Cenário de aplicação: Adequado para detecção de nível de íons de cálcio.
Também conhecido como DeepBlue CTM, é um dos derivados do Coelenterazine Native. É um bom substrato para Renilla luciferase (Rluc), e seu comprimento de onda de emissão é de cerca de 400 nm, que tem pouca interferência com o sinal da proteína receptora GFP e não pode ser oxidado pela luciferase secretada por Gaussia (Gluc).
Cenário de aplicação: É o substrato de coelenterazina preferido para pesquisa de BRET (transferência de energia por ressonância bioluminescente).
É o substrato preferido para aequorina, e a única diferença estrutural da Coelenterazina Nativa é que o grupo hidroxila em seu grupo fenol R-1 é substituído por flúor (F).Comparado ao número total de fótons produzidos pelo complexo Coelenterazina Nativa-Apoaequorina, este complexo produz apenas 80% da energia do fóton. A vantagem é que leva muito pouco tempo para gerar o complexo de aequorina. Quando entra em contato com Ca2+, emite luz rapidamente e com alto rendimento, com uma intensidade de produção 20 vezes maior que a da Coelenterazina Nativa. Além disso, possui boa permeabilidade celular.
Cenário de aplicação: Quando Ca extremamente alto2+ sensibilidade de detecção é necessária para estudar experimentos de regeneração de proteínas em águas-vivas, o uso de substratos é recomendado.
Coelenterazina cp
É um derivado da Coelenterazina Nativa. O complexo fotoproteico formado com a proteína Apoaequorina é 15 vezes mais luminoso que a Coelenterazina Nativa e tem um Ca mais rápido2+ taxa de reação.
Cenário de aplicação: Ele pode ser usado para triagem de alto rendimento de medicamentos com receptores acoplados à proteína G (GPCRs).
Coelenterazina n
Sua intensidade de fluorescência é mais fraca em todos os derivados de Coelenterazina, e a taxa de reação ao Ca2+ é significativamente menor que a da Coelenterazina Nativa.
Coelenterazina e
Um derivado de Coelenterazina Nativa que é estruturalmente um grupo etil a mais do que Coelenterazina Nativa. Como substrato para a luciferase Renilla, sua intensidade de fluorescência é 137% da de Coelenterazina Nativa. Coelenterazina e tem uma alta reatividade in vitro de proteína luminescente de água-viva e picos de emissão dupla (405 e 465), o que permite a determinação de Ca2+ concentração na faixa de pCa5-7 pela razão de comprimentos de onda duplos. Este método é independente da concentração de Coelenterazina, melhorando assim a precisão da detecção. Como a permeabilidade celular deste derivado é baixa, ele não tem esta vantagem para experimentos relacionados intracelulares.
Cenário de aplicação: Substrato muito útil para Ca2+ detecção de baixa sensibilidade.
Coelenterazina 2-metil
É um poderoso antioxidante celular. Pode atuar efetivamente em espécies reativas de oxigênio intracelular, como oxigênio singlete e ânions superóxido, e o estresse oxidativo é um elo intermediário no processo de apoptose. Além disso, o composto tem as características de não toxicidade e permeabilidade de membrana, portanto pode ser usado para estudar a apoptose.
Aplicação do produto:
1) Como uma ferramenta importante para estudar a apoptose;
2) Também pode ser usado para quimioluminescência para detectar níveis de ânion superóxido e ânion peroxinitrito.
| Nome do produto | Peso molecular | Fórmula molecular | Em (nm) | RLC* | Intensidade Relativa | Tempo de meia subida (ms)** |
| 423.46 |
| 466 | 1,00 | 1 | 6-30 | |
| 407,48 |
| 466 | 0,75 | 16 | 6-30 | |
| Coelenterazina hcp | 399,48 |
| 445 | 0,65 | 500 | 2-5 |
| Coelenterazina cp | 415,48 |
| 442 | 0,63 | 28 | 2-5 |
| 425,46 |
| 472 | 0,80 | 20 | 6-30 | |
| Coelenterazina n | 457,52 |
| 468 | 0,25 | 0,15 | 6-30 |
| Coelenterazina e | 449,5 |
| 405 e 465 | 0,5 | 4 | 0,15-0.3 |
| 2-metil celenterazina | 331,37 |
| / | / | / | / |
| 391,48 |
| 400 | / | / | / |
Informações do produto
| Nome do produto | Número de catálogo | Especificações |
| 40901ES01/02/03/08 | 100mg/500mg/1g/5g | |
| 40902ES01/02/03/09 | 100mg/500mg/1g/5g | |
| 40903ES01/02/03 | 100mg/500mg/1g | |
| 40904ES02/03/08 | 1×500 μg/2×500 μg/5mg | |
| 40905ES02/03 | 1×500 μg/2×500 μg | |
| 40906ES02/03/08 | 1×500 μg/2×500 μg/5mg | |
| 40908ES02/03 | 1×500 μg/2×500 μg |
Literatura publicada por usuários (estatísticas incompletas)
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