O ácido nucleico serve como base para toda a pesquisa em biologia molecular. Além disso, a qualidade do ácido nucleico extraído também é um dos principais fatores que determinam o sucesso ou o fracasso dos experimentos posteriores. Ao desenvolver reagentes de extração de ácido nucleico, além dos componentes químicos convencionais, alguns ácidos nucleicos de moléculas pequenas ou enzimas podem melhorar muito a eficiência da extração ou remover a interferência de substâncias não-alvo e se tornar componentes importantes na extração de ácido nucleico.

Sobre substâncias auxiliares para precipitação de ácidos nucleicos

RNA transportador

Conceito e função de RNA transportador

RNA transportador, também conhecido como auxiliar de precipitação de ácido nucleico em chinês. No processo de extração de ácido nucleico, os tubos de centrífuga usados para extração são feitos principalmente de polipropileno. Há eletricidade estática na parede do tubo, que adsorverá ácidos nucleicos. Usar RNA transportador no processo de extração e purificação pode ajudar os ácidos nucleicos a remover o efeito eletrostático, garantir que os ácidos nucleicos possam ser bem adsorvidos na coluna de purificação, melhorar a eficiência de eluição e, assim, atingir a recuperação de ácidos nucleicos na amostra tanto quanto possível.

Tipos comuns de RNA transportador

Como substância auxiliar para precipitação de ácido nucleico, o RNA transportador tem vários tipos, como sal de potássio PolyA, RNA total de E. coli, RNA total de levedura, tRNA, etc.

Problemas comuns no uso de RNA transportador

O Carrier RNA ainda pode ser usado após ser colocado em temperatura ambiente por um período de tempo? A degradação do Carrier RNA afeta seu uso? O Carrier RNA afeta experimentos posteriores?
O RNA transportador é dissolvido em um protetor de RNA. O RNA transportador líquido tem pouco impacto quando colocado a 37 °C ou à temperatura ambiente por um curto período (dentro de 7 dias). Essencialmente, o RNA transportador é um fragmento na faixa de 500 nt a 1000 nt. Uma leve degradação não afeta o uso normal. Para aplicações posteriores, como PCR quantitativa fluorescente, o RNA transportador não tem efeito no valor Ct. Para aplicações posteriores, como NGS, ele pode ser adicionado de acordo com as necessidades reais.

Introdução do produto de RNA transportador

O RNA transportador de Yeasen é um RNA derivado de levedura. Não há enzimas DNase ou RNase residuais, e o conteúdo residual de proteína e DNA é extremamente baixo. Ele pode ser usado em experimentos como extração de ácido nucleico viral e extração de DNA traço. Os ácidos nucleicos extraídos podem ser usados em experimentos subsequentes, como RT-PCR e RT-qPCR. O produto está disponível em formulações líquidas e em pó liofilizado para uso direto conveniente, transporte de longa distância e armazenamento.

Nome do produto	Produto Número	Especificação	Condições de armazenamento e prazo de validade
RNA transportador, 6 μg/μL	19701ES	1 mL / 5 mL / 100 mL	Armazenado entre -25 e -15 °C. O prazo de validade é de 2 anos.
Pó de RNA transportador, 216 μg/tubo	19703ES	1 tubo / 100 tubos / 1000 tubos	Armazenado em temperatura ambiente. O prazo de validade é de 2 anos.
Pó de RNA transportador, 310 μg/tubo	19704ES	1 tubo / 100 tubos / 1000 tubos	Armazenado em temperatura ambiente. O prazo de validade é de 2 anos.

Solução de acrilamida linear

Conceito e função da solução linear de acrilamida

A acrilamida linear, com o nome em inglês Linear Acrylamide (Linear Polyacrylamide, abreviado como LPA), é um coprecipitante que ajuda a precipitar ácidos nucleicos durante o processo de purificação de ácidos nucleicos.

Características da solução de acrilamida linear

É um veículo neutro e de origem não biológica. Portanto, não contém contaminação potencial de ácido nucleico ou nuclease.

Não interferirá nas leituras de A260/A280 e não inibirá as atividades da polimerase e da endonuclease de restrição.

É compatível com outras aplicações subsequentes de biologia molecular, como PCR e digestão enzimática.

Pode auxiliar na precipitação de DNA e RNA de nível de picograma ou acima (incluindo Oligo). O comprimento do fragmento recuperável é acima de 20 nucleotídeos, e ácidos nucleicos de fita simples e fita dupla são aplicáveis.

Introdução ao produto

Nome do produto	Produto Número	Especificação	Condições de armazenamento e prazo de validade
Solução de acrilamida linear (5 mg/mL)	10408ES	1 mL	Armazenado em 4 °C. O prazo de validade é de 3 anos.

Enzima auxiliar de extração de ácido nucleico

RNase A

Conceito e função da RNase A

A ribonuclease A (RNase A), como uma endoribonuclease, degrada especificamente resíduos de citosina (C) ou uracila (U) em RNA fita simples. A aplicação mais comum da ribonuclease A (RNase A) é remover RNA durante a preparação de DNA plasmídico ou DNA genômico. Além disso, este produto também pode ser usado em experimentos de biologia molecular, como ensaios de proteção de RNase e análise de sequência de RNA.

Características da RNase A

RNase A é derivada do pâncreas bovino. Não há contaminação de endo- e exonuclease desoxirribonuclease. Pode ser usada diretamente sem pré-aquecimento e é resistente a ambientes de alta temperatura.

Introdução ao produto

Nome do produto	Produto Número	Especificação	Condições de armazenamento e prazo de validade
RNase A (100 mg/mL)	10406ES	1 mL	Armazenado a -20°C. O prazo de validade é de 2 anos.
RNase A (10 mg/mL)	10405ES	1ml	Armazenado em temperatura ambiente.O prazo de validade é 1 anos.
Ribonuclease A (RNase A), do pâncreas bovino	10407ES	100mg/1g	Armazenado em temperatura ambiente. O prazo de validade é de 2 anos.

Desoxirribonuclease I (DNase I)

1.Conceito e função da DNase I

A desoxirribonuclease I (DNase I), uma endonuclease encontrada em várias células e tecidos, tem como alvo e cliva a ligação fosfodiéster adjacente às pirimidinas, produzindo polinucleotídeos com um grupo fosfato na extremidade 5' e um grupo hidroxila na extremidade 3'. O produto mínimo médio de digestão é um polímero tetra-nucleotídeo. A DNase pode catalisar várias formas de DNA, como DNA fita simples, DNA fita dupla e até mesmo cromatina (cuja taxa de clivagem é afetada por histonas). Em experimentos de biologia molecular, ela é frequentemente usada para remover DNA de proteínas ou para introduzir cortes no DNA para inserir bases marcadas no DNA.

2.Características da DNase I

A faixa de trabalho ideal da DNase I é pH 7-8, e sua atividade depende de Ca²⁺ e pode ser ativado por íons metálicos divalentes, como Co²⁺, MN²⁺, Zinco²⁺, etc. 5 mM Ca²⁺ pode proteger a enzima de ser hidrolisada. Na presença de Mg²⁺, esta enzima pode reconhecer e cortar aleatoriamente qualquer sítio em qualquer fita de DNA; enquanto na presença de Mn²⁺, ele pode reconhecer ambas as fitas de DNA simultaneamente e cortar quase no mesmo local.

3. Introdução ao produto

Nome do produto	Produto Número	Especificação	Condições de armazenamento e prazo de validade
Desoxirribonuclease I (DNase I) do pâncreas bovino	10607ES	15 KU/10×15 KU	Armazenado a -20°C. O prazo de validade é de 2 anos.
Desoxirribonuclease I (DNase I) do pâncreas bovino	10608ES	25 mg/100 mg/1 g	Armazenado a -20°C. O prazo de validade é de 2 anos.

Proteinase K

1.Conceito e função da Proteinase K

Proteinase K (Proteinase K) é uma serina protease com uma ampla gama de atividades de clivagem. Seu peso molecular relativo é de cerca de 29,3 kDa e pode clivar as ligações peptídicas carboxil-terminais de aminoácidos alifáticos e aminoácidos aromáticos. A proteinase K tem uma ampla gama de aplicações e pode ser usada em experimentos como preparação de DNA cromossômico para eletroforese em gel de campo pulsado, Western blotting e remoção de nucleases em preparações de DNA e RNA. Agentes desnaturantes como SDS (1%) podem aumentar sua atividade.

2.Características da Proteinase K

Derivado de uma cepa de levedura geneticamente recombinante.

Livre de RNase e DNase.

Ativo e estável em ureia e SDS.

Ativo em uma ampla faixa de pH (pH 4,0 - 12,0), e a faixa de pH ideal é pH 7,5 - 9,0.

3.Introdução ao produto

Nome do produto	Produto Número	Especificação	Condições de armazenamento e prazo de validade
Proteinase K	10401ES	100mg/1g/5g/100g	Armazenado a 4°C. O prazo de validade é de 3 anos.
Solução de proteinase K (20 mg/mL)	10412ES	1 mL/10 mL/25 mL/500 mL	Armazenado a 4°C. O prazo de validade é de 2 anos.
Solução de proteinase K (20 mg/mL)	10410ES	1 mL/10 mL/25 mL/500 mL	Armazenado a 4°C. O prazo de validade é de 2 anos.

Estabilizador de RNA

Solução estabilizadora de RNA para tecidos animais e vegetais

1. Função da solução estabilizadora de RNA para tecidos animais e vegetais

As RNases estão amplamente presentes no ambiente e são muito propensas a degradar o RNA em amostras recém-coletadas de tecidos animais e vegetais, sangue, fluidos corporais, etc. O estabilizador de tecido RNAsafe para tecidos animais e vegetais (RNAsafe Tissue Stabilizer) é especialmente desenvolvido para estabilizar e proteger o RNA em amostras coletadas. Como uma solução não tóxica, ele pode penetrar rapidamente nos tecidos e inativar RNases endógenas.

2.Características da solução estabilizadora de RNA para tecidos animais e vegetais

Extremamente fácil de operar: basta cortar tecidos frescos em blocos de tecido de tamanho apropriado (≤0,5 cm) e mergulhá-los em 5 a 10 vezes o volume de RNAsafe.

Longo período de estabilização: Tecidos/células infiltrados com RNAsafe podem ser armazenados a 37°C por 1 dia, em temperatura ambiente por 1 semana, a 4°C por 4 semanas e para armazenamento de longo prazo a -20°C/-80°C.

Ampla compatibilidade downstream: é compatível com quase todos os métodos de isolamento de RNA, como o HieffTM Total RNA Extraction Reagent (número de catálogo: 10606ES60) e quase todos os kits comerciais de extração de RNA, incluindo o método de extração por coluna centrífuga e o método de purificação por esferas magnéticas.

Ampla aplicação de materiais: Pode ser usado para a preservação de vários tecidos animais e vegetais (como cérebro, coração, fígado, pâncreas, rim, baço, testículos, músculos, caules e folhas de plantas, etc.), e também para leveduras, células de cultura de tecidos, etc.