Fosfatase alcalina de camarão (SAP) (1 u/μl) _ 10322es

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Tamanho: 250 u
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A fosfatase alcalina pode remover os grupos fosfato 5' do DNA e do RNA. É comumente usada para evitar a autoligação de vetores. Em experimentos de clonagem molecular, a DNA ligase requer a presença de grupos fosfato para catalisar a ligação do DNA. Após a digestão com enzimas de restrição, os vetores retêm um grupo fosfato no local de clivagem. No entanto, após a desfosforilação pela fosfatase alcalina, a extremidade 5' do vetor não tem um grupo fosfato e, portanto, não pode se conectar com sua própria extremidade 3'. Como resultado, a autoligação do vetor, que de outra forma ocorreria preferencialmente na reação de ligação, é evitada. Isso aumenta a taxa de inserção do fragmento alvo. Além disso, a fosfatase alcalina pode ser usada para preparar moldes de DNA para marcação da extremidade 5'.

Este produto é uma fosfatase alcalina derivada de camarão que pode degradar quase todos os monoésteres de fosfato. No entanto, não pode hidrolisar diésteres ou triésteres de fosfato. A enzima atua na desfosforilação terminal, independentemente de os terminais serem pegajosos ou rombos. A SAP também pode ser usada para degradar dNTPs em reações de PCR, o que é útil para sequenciamento subsequente e análise de SNP.

Características

  • Remoção de grupos fosfato das extremidades do DNA e do RNA. Prevenção da autoligação de vetores.
  • Preparação de moldes de DNA para marcação da extremidade 5'.
  • Degradação de dNTPs em reações de PCR.

Aplicações

  • Molecular csolitário
  • Sequenciamento de DNA
  • Análise SNP

Componentes

Componentes No.

Nome

10322ES72

10322-UM

Fosfatase Alcalina de Camarão (SAP) (1 U/µL)

250 você

10322-B

Buffer SAP 10×

1 eueu

Especificações

Fonte

De Pichia pastoris, o gene da fosfatase alcalina do camarão foi clonado de Pandalus borealis.

Controle de qualidade

Livre de contaminação por ribonuclease e desoxirribonuclease.

Pureza

95%

Inativação Térmica

Incubação aos 65 anos°C por 5 minutos resulta em perda completa e irreversível da atividade.

Definição de unidade

A quantidade de enzima necessária para desfosforilar 1 μg de DNA pUC19 digerido com HindIII (que produz saliências 5') em 30 min a 25°C é definido como uma unidade de atividade.

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O os produtos devem ser armazenados em -25~-15℃ para 3 anos.

Documentos:

Ficha de dados de segurança

10322ES-MSDS-HB.PDF

Manuais

10322_Manual_Ver. EN20250219_EN.pdf

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Investigação

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