Descrição
Cap AG (3'Acm) é um análogo de cap com a estrutura de m7(3'AcmG)(5')ppp(5')(2'0MeA)pG, sua fórmula molecular é C35E48Não16O24P4 e o peso molecular é 1200,75. O produto é usado para transcrição com a sequência inicial de 5'AG3', e a estrutura natural cap1 é produzida pelo capping de transcrição Cap1. Comparado com Cap0 produzido pelo método de capping tradicional, a estrutura cap1 produzida por CapAG (3'Acm) permite que o mRNA tenha maior atividade e eficiência de tradução in vivo.
Recurso
Comparado com produtos existentes como o CleanCap, este produto é um 3'Acm análogo de cap de mRNA modificado. Sua estrutura de ligação dupla aumenta a estabilidade molecular, tornando-o resistente ao reconhecimento e à hidrólise por nucleases. Com o 3'Acm, ele estabiliza efetivamente a estrutura da tampa final 5', aumentando a capacidade de ligação do mRNA com o fator de iniciação eucariótico (eIF4E) e, assim, melhorando a eficiência da tradução do mRNA. Além disso, esse tipo de análogo de tampa demonstra dados promissores em termos de rendimento de transcrição in vitro e eficiência de cobertura.
Componentes
| Cat No. | Nome | Tamanho |
| 10684 | LZCap AG (3'Acm) (100 mM) | 100 μL |
| 1 mL |
Detalhes do produto
| Fórmula Molecular | C35E48Não16O24P4 (Ácido livre) |
| Peso molecular | 1200,75 (ácido livre) |
| Concentração | 100± 3 mM |
| Pureza | CLAE ≥95% |
Figura
Figura 1. O análogo de LZCap mostrou afinidade mais forte aos fatores de iniciação da tradução eIF4E, permitindo uma iniciação mais eficiente da tradução de mRNA. Quanto menor o valor de Kd, mais forte a afinidade do análogo de cap à proteína de ligação de cap eIF4E.
Figura 2. A expressão in vivo do mRNA encapsulado em LZCap AG é muito maior do que a do análogo de encapsulamento 3'OMe.
Figura 3. Os mRNAs capped LZCap são mais resistentes à enzima de decapagem. Quanto maior o valor de IC50, mais forte é a capacidade do análogo cap de resistir à clivagem pela enzima de decapagem
Figura 4. mRNA encapsulado em LZCap reduz o RNA estimulado por um único nível de transcrição do fator imunológico na célula THP-1.
Perfil Geral de Segurança
| Resultado e Conclusão | |
| Citotoxicidade Teste | Não citotoxicidade era observado com o modificado nucleosídeo em múltiplo célula linhas |
| Polimerase Inibição Estudar | O modificado nucleosídeo é nenhum um inibidor nem um substrato de humano ARN e ADN polimerases e é portanto não integrado em o genoma |
| Ames Teste* | Não genotoxicidade era observado em o Ames teste |
Armazenar
Este produto pode ser armazenado a -25~-15 ℃ por dois anos.
Precauções
- Para sua segurança e saúde, use equipamentos de proteção individual (EPI), como jalecos e luvas descartáveis, ao operar este produto.
- Somente para uso em pesquisa.
Perguntas e respostas
1. Como você projeta o LZCap?
As enzimas têm um reconhecimento relativamente "específico" de substratos. Portanto, ao projetar uma nova estrutura de cap, por um lado, precisamos de novas modificações estruturais para fins de patente, mas, por outro lado, nos esforçamos para manter a similaridade com estruturas naturais/conhecidas tanto quanto possível. A estrutura natural tem uma ribose 3' OH, que pode ser modificada (por exemplo, metilação). Com base nessa consideração, escolhemos adicionar um carbono na posição 3' para novidade de patente, seguido por um NH para imitar a ligação de hidrogênio de OH e, em seguida, um grupo acetil para reduzir a basicidade de NH e aumentar sua capacidade de ligação de hidrogênio. A atividade de LzCap é melhor que metilatoboné natural ed, possivelmente devido ao aumento da ligação de hidrogênio. Comparado aos grupos metil e metoxi, o grupo acetil amino também pode aumentar as interações de van der Waals entre o substrato (cap) e o fator iniciador (enzima).
2. O grupo acetil amino é estável?
O grupo acetil amino já é suficientemente estável. Ele é muito mais estável do que a posição 7-metilada e a ligação fosfodiéster, que são as partes menos estáveis do cap.
Publicação
- As vacinas polivalentes de mRNA mpox provocam respostas imunológicas robustas e conferem proteção potente contra o vírus vaccinia, 2024, Cell Reports 43,114269
- Estudo preliminar da eficácia e duração de um agonista de GLP-1R baseado em mRNA em macacos diabéticos.2024, Diabete, 73
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Investigação
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